鱼腥草制剂抗炎动物模型的建立及研究

目的建立鱼腥草制剂抗炎动物模型。方法耳根皮下注射制剂、小鼠耳二甲苯致炎、耳圆片称重建立炎症模型,检验鱼腥草制剂的抗炎效果。结果二甲苯最佳致炎时间为1 h;鱼腥草制剂在小鼠体内作用约2 h时对致炎鼠疗效最好;给药次数为第6次时,小鼠耳肿胀度最小;以80μl/20 g的剂量给药组肿胀度抑制率最大,建立了鱼腥草制剂鼠耳肿胀法抗炎动物模型。结论鱼腥草制剂鼠耳肿胀法抗炎动物模型可用于鱼腥草制剂药效研究。5种鱼腥草制剂均有明显的抗炎效果,其中8号制剂抗炎效果最好。

软骨发育不良一家系的FGFR3基因突变分析

目的探讨一个中国汉族软骨发育不良家系的临床表型及FGFR3基因突变类型,确定其致病原因。方法在获得知情同意后对该家系成员进行病史采集和临床检测,并对其中3例患者和3例正常亲属及家系外100例正常对照者采血进行DNA提取,采用聚合酶链反应结合DNA直接测序法对FGFR3基因的第10、13外显子及其部分内含子进行突变检测。结果该家系中3例患者的临床表现为身材矮小、四肢过短、腰椎前突、头颅增大、前额突出。3例患者在FGFR3基因对应cDNA序列发现C1620A(N540K)杂合突变及第13内含子3'剪接位点上游23 bp处发现一G>A杂合突变,3例正常亲属及家系外100例正常对照者均未发现该两种突变。结论FGFR3基因的N540K突变是导致该家系软骨发育不良的关键性分子病因,而内含子IVS13-23突变可能加重了患者的病情。

全外显子组测序技术及其在遗传性耳聋研究中的应用

近年来,全外显子组测序技术迅猛发展,为遗传疾病的基因研究带来了新的机遇,受到遗传学多个领域的重视与应用,其在遗传性耳聋的应用也日益受到关注。该技术先应用靶向富集技术捕获基因组的外显子区域,再通过高通量测序获得编码区序列遗传信息。本文主要介绍全外显子组测序的技术路线及在遗传性耳聋中的应用与研究成果。

一短指家系临床特征调查及IHH基因的突变分析

目的探讨广东省一个汉族A1型短指(brachydactyly type A1)家系的临床特征及致病原因。方法在获得知情同意后对该家系成员进行病史采集和临床检测,并对其中7例患者和7例正常亲属采血进行DNA提取,采用聚合酶链反应结合DNA直接测序法对IHH基因的外显子进行突变检测。结果该家系的短指症为A1型,常染色体显性遗传;所有患者第二至第五手指和脚趾的中节指(趾)骨缺失,末节指(趾)骨短小,第一手指的远侧和近侧指骨均缩短;7例患者在IHH基因对应cDNA序列存在G391A(E131K)杂合突变,7例正常亲属均未发现该突变。结论中国广东汉族A1型短指家系的发病机制是IHH基因发生了E131K错义突变所致。

一个遗传性非综合征型耳聋家系的GJB2基因突变分析

目的对1个遗传性非综合征型耳聋家系的临床表型特征进行分析,并选取GJB2基因进行突变检测。方法详细询问病史和临床检查后,提取患者及家系成员的外周血基因组DNA,PCR扩增GJB2基因的外显子及外显子和内含子的交界区域,然后对扩增产物进行DNA测序和BLAST比对进行突变分析。结果该家系所有患者为迟发性、渐进性、早期以高频听力下降为主的感觉神经性聋。GJB2基因突变分析检测到6种单核苷酸多态,其中c.79G>A(p.Val27Ile)和c.341G>A(p.Glu114Gly)为已知单核苷酸多态,而位于3′-UTR的g.4159T>C、g.5142G/T、g.5227G/A、g.5352T/C突变为本研究新发现。结论该家系未发现GJB2外显子致病性突变,遗传性非综合征型耳聋存在明显的遗传异质性。

中国汉族高度近视一家系的ZNF644基因突变分析

目的:ZNF644基因突变被报道与一个中国汉族(四川)高度近视家系的性状相关,本研究旨在探索ZNF644基因与另一个中国汉族(湖南)高度近视家系的相关性。方法:收集家系中5例患者临床资料并采集5例患者及2例家系正常成员的外周血,提取基因组DNA,采用PCR扩增ZNF644基因的全部6个外显子及外显子与内含子交界区域,用直接双向测序、BLAST比对进行突变分析。结果:此家系中5例患者的近视屈光度均高于6.00 D,同时部分患者伴发视网膜脱离、白内障等症状,家系其余成员视力正常,符合常染色体显性遗传模式的遗传性高度近视;在ZNF644;基因中发现了6个变异序列,所有变异序列均存在于患者及其正常亲属中,与疾病表型无共分离现象。结论:排除了ZNF644基因外显子突变导致该家系高度近视的可能性。

一先天性睑裂狭小综合征家系FOXL2基因的突变检测

目的对1个天性睑裂狭小综合征(BPES)家系成员的FOXL2基因编码序列进行分析,寻找患者的致病基因突变。方法提取患者及家系成员的外周血基因组DNA,应用聚合酶链反应和DNA测序技术检测FOXL2基因编码序列,并与患者家属及50名正常人相应序列进行比对。结果在该家系患者中检测到FOXL2基因c.672_701dup30杂合突变,该突变导致多肽链第224位重复插入10个氨基酸(p.Ala224_Ala234dup)。而家系中的正常人及50例正常对照者的FOXL2基因中均未发现该突变。结论 FOXL2基因c.672_701dup30杂合突变使多聚丙氨酸链延长10个氨基酸,导致蛋白质功能的改变,这可能是该家系BPES的致病原因。

C_(57)BL/6小鼠繁殖性能的观察与研究

C57BL/6纯系小鼠生殖能力较低,为提高受孕率,对其生殖性能进行了研究。结果表明:性周期动情期的鉴定是提高小鼠受孕率的关键;自然交配的受精卵质量比超数排卵的好,产仔成活率高,但超数排卵仍是一种良好的获得更多受精卵的辅助办法;光照、温度、噪音、湿度、营养等因素对小鼠性周期影响很大。

AK078438基因功能的初步研究

目的初步研究AK078438基因的功能。方法用已制备的AK078438抗体为一抗,对小鼠心、肝、脾、肺、肾组织进行免疫组织化学(Immunochistochemistry)检测各组织中该基因的表达情况。检测到肾脏组织中表达该基因之后,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,从小鼠肾脏中提取总RNA,并以之为模板,扩增出AK078438基因。构建绿色荧光表达载体,转染内皮细胞,MTT以及Hoechst荧光染色检测该基因对细胞凋亡的影响。结果免疫组织化学结果显示在小鼠的肾脏组织中检测到该基因表达。RT-PCR得到全长为1065bp的AK078438基因,并成功构建了p-EGFP-AK078438质粒,MTT以及Hochest33258荧光染色检测结果表明该基因的过表达有促进内皮细胞凋亡的作用。结论AK基因在肾脏组织中呈阳性表达,并有促进内皮细胞凋亡的作用,为进一步深入研究该基因功能提供了实验基础。

一先天性头皮单纯少毛症家系CDSN基因突变分析

目的:对一个先天性头皮单纯少毛症家系编码角化桥粒素的CDSN基因进行突变分析,旨在寻找致病原因。方法:收集家系中4例患者及正常家系成员的详细临床资料和外周血样本,提取基因组DNA,采用PCR技术扩增CDSN基因的2个外显子,用直接双向测序、BLAST比对进行突变分析。结果:在CDSN基因中发现了7个变异序列,其中4个已被报道为多态,3个为新发现的突变。所有序列变异均存在于患者的正常亲属中,与疾病表型无共分离现象。结论:排除了CDSN外显子突变导致该家系先天性头皮单纯少毛症的可能性。

转化医学理念对医学遗传学教学的启迪

转化医学是把基础研究成果快速转化为临床应用的新型医学研究模式,医学遗传学是基础医学与临床医学的桥梁课程,以转化医学理念指导医学遗传学教学改革,通过实施病例式教学、实验课加入病案讨论和开展大学生科技创新,将临床知识及科研意识融入医学遗传学理论与实践教学中,加强基础与临床联系,有利于提高教学质量。

提高教学型院校医学细胞生物学教学效果的探索与实践

医学细胞生物学是医学的重要基础学科,该课程知识更新快,学习内容多,学生的学习积极性低。结合笔者所在院校实际情况,对医学细胞生物学在教学内容、教学方法和实验教学等方面进行了改革和探索。

先天性手指屈曲挛缩畸形一家系七例

先证者（Ⅲ5）男，57岁。患者自出生起除双手拇指外其余8手指均不能伸展，呈不同程度的屈曲，其中以食指和小指为甚。患者拇指掌指关节活动范围小，虎口张口最大角度小于45度，其余八指掌指关节伸展正常，近侧指关节屈曲挛缩，远侧指关节呈轻微屈曲，近侧指关节大（图1）。双手呈对称性畸形。体查：先证者红血球沉降速率为9mm／1h，C反应蛋白浓度为2mg／L，定量测定类风湿因子、抗链球菌素抗体、抗核抗体和抗环瓜氧酸肽抗体均为阴性，初步排除患风湿病和类风湿关节炎的可能性，病情无进行性变化且关节无疼痛感。

寻常型鱼鳞病一家系11例

先证者（Ⅳa）男，20岁。自出生起除面部、掌跖皮肤外，其余部分被覆细薄鳞屑，且随年龄增长而增多，以小腿伸侧最为明显，屈侧相对较轻，腿部皮肤毛囊化丘疹较其他部位明显，青春期后发展成胸腹、四肢以及头部皮肤分布白色鳞屑，腋窝、肘窝、胭窝及腹股沟等部位的皮肤无明显异常，鳞屑样皮肤斑块中间附着、边缘上翘、常呈多角形或菱形，病情在干燥季节加重。先证者掌纹较常人多、深且乱。先证者系足月顺产，发育、营养以及智力均正常，皮肤检查结果为寻常型鱼鳞病。

一个中国汉族遗传性多发性骨软骨瘤家系的基因诊断

目的确定1个遗传性多发性骨软骨瘤家系的分子病因。方法采集家系中2例患者临床资料、2例患者及5名正常家系成员和家系外100名正常对照的外周血DNA，应用聚合酶链反应扩增EXT1基因的全部外显子及外显子与内含子接头，并对扩增产物进行双向直接测序。结果测序发现患者EXT1基因存在c．600G〉A杂合突变（P．Trp200X），正常家系成员及100名正常对照无此突变。结论EXT1基因P．Trp200X突变是导致这个家系发生骨软骨瘤的原因。

一个先天性头皮单纯少毛症家系的临床表型及CDSN基因突变分析

目的通过对1个先天性头皮单纯少毛症（hypotricho sissimplex of the scalp，HSS）家系的临床特征调查及CDSN基因突变分析，以确定该家系的疾病类型和致病基因并建立产前诊断的方法。方法经家系调查及临床检查确定疾病类型；抽取3例患者及7名正常家系成员和100名正常对照的外周血提取基因组DNA，PCR扩增CDSN基因的第1、2外显子，用直接双向测序、BLAST比对进行突变分析。结果家系中3例患者均表现为先天性头皮单纯少毛症，呈常染色体显性遗传；在3例患者的CDSN基因第2外显子cDNA序列发现717C〉G无义杂合突变（Y239x），正常家系成员和对照中均未发现该突变。结论CDSN基因Y239X无义突变是该家系先天性头皮单纯少毛症的致病突变，此突变是首次在中国HSS疾病人群中报道。

医学遗传学教学中的困惑与改革探索

医学遗传学是高等医学教育的重要组成部分.面对社会医疗的实际需要,医学遗传学教学应该与临床应用相结合.本文讨论了医学遗传学教学的现状和困惑,并就提高教学质量阐述了可行性的改革措施.

常染色体显性遗传非综合征型耳聋一家系八例

先证者（Ⅳ2）男，45岁，侗族。从20岁左右开始出现耳鸡、听力下降，并逐渐加重。纯音测听显示：左耳的听力为80分贝，右耳的听力为82分贝。患者表现为双耳先以高频下降为主后累及全频的重度感音神经性聋。查体：耳廓、外耳道和鼓膜均正常。X射线断层扫描未见耳蜗异常。除耳聋之外，无其它器官系统疾患，临床诊断为非综合征型耳聋。

睑裂狭小综合征一家系四例

先证者（Ⅲ2）男，24岁，右眼裸眼视力o．8，左眼裸眼视力o．6。睑裂宽度：双眼均为1．5mm。睑裂长度：右19mm，左20mm。倒向内眦赘皮。内眦间距43mm。双眼向各方向运动自如，瞳孔直径正常，眼球无震颤。

一个Usher综合征2型家系USH2A基因的突变分析

目的 鉴定1个Usher综合征2型家系USH2A基因的致病性突变,为其提供分子遗传学依据.方法 对1个Usher综合征家系2例患者与4名表型正常家系成员的USH2A基因的全部编码区及侧翼剪切位点进行PCR扩增,产物直接测序进行突变分析,同时选择100名无亲缘关系的正常对照进行检测.结果 家系中2例患者（先证者及其妹妹）均携带了USH2A基因第42外显子c.8272G＞T（p.E2758X）和第63外显子c.12376-12378 ACT＞TAA（p.T4126X）复合杂合性突变.而患者的父亲为c.12376-12378 ACT＞TAA杂合突变携带者,其母亲为c.8272G＞T杂合突变携带者,两名表型正常的家系成员未检测到突变.经检索HGMD数据库两个突变均为新突变,且与家系疾病表型共分离.100名无血缘关系的正常人中未发现该突变.结论 USH2A基因的c.8272G＞T（p.E2758X）和c.1237612378ACT＞TAA（p.T4126X）复合杂合性突变可能为该家系的致病原因,为该Usher综合征家系的病因诊断提供了分子遗传学依据.