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利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系
被引量:
4
1
作者
翟菲菲
全芷仪
+12 位作者
王路鹿
张士军
鞠丹迪
水一鸣
常江
常恒祯
胡盼
李岩松
卢士英
周玉
柳增善
李兆辉
任洪林
《动物医学进展》
北大核心
2019年第4期36-40,共5页
利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉...
利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉素初步筛选。单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。结果表明,在敲除细胞株基因组中存在碱基缺失,导致移码突变。说明成功获得敲除Prdx6基因的RAW264.7细胞系。
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关键词
CRISPR/Cas9
RAW264.7
Prdx6
移码突变
布鲁菌
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系
被引量:
4
1
作者
翟菲菲
全芷仪
王路鹿
张士军
鞠丹迪
水一鸣
常江
常恒祯
胡盼
李岩松
卢士英
周玉
柳增善
李兆辉
任洪林
机构
吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室
长春市实验中学
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第4期36-40,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0500900)
吉林省科技发展计划重点科技攻关项目(20170101149JC)
文摘
利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉素初步筛选。单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。结果表明,在敲除细胞株基因组中存在碱基缺失,导致移码突变。说明成功获得敲除Prdx6基因的RAW264.7细胞系。
关键词
CRISPR/Cas9
RAW264.7
Prdx6
移码突变
布鲁菌
Keywords
CRISPR/Cas9
RAW264.7
peroxiredoxin 6
frameshift mutation
Brucella
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系
翟菲菲
全芷仪
王路鹿
张士军
鞠丹迪
水一鸣
常江
常恒祯
胡盼
李岩松
卢士英
周玉
柳增善
李兆辉
任洪林
《动物医学进展》
北大核心
2019
4
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