不同植物精油对淡色库蚊生物活性的筛选及成分分析

目的筛选对淡色库蚊幼虫和成蚊均有较高生物活性的植物精油,获得对淡色库蚊有生物活性的精油成分。方法采用药液浸养法测定19种植物精油对淡色库蚊幼虫的毒杀活性;选取幼虫毒杀活性实验中24 h死亡率超过50.00%的精油,采用密闭三角瓶熏蒸法测定其对雌性成蚊的熏蒸活性;选择对幼虫和成蚊均有较高活性的精油,通过气相色谱-质谱联用技术(chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析其成分。结果大葱与马樱丹精油对淡色库蚊Ⅲ龄幼虫活性较好,在80μg/mL浓度下,蚊幼虫24 h平均死亡率高达100.00%;香附、檀香、肉桂和雪松精油活性次之,蚊幼虫24 h死亡率分别为91.67%、91.67%、88.33%、83.33%。选择上述6种精油开展成蚊熏蒸实验,结果大葱、雪松和香附精油的熏蒸活性较好,击倒中时(median knockdown time,KT50)值分别为5.31、8.60和9.49 min。选择对幼虫和成蚊均有较高活性的大葱、香附和雪松精油进行GC-MS成分分析,结果显示,大葱、香附和雪松精油中分别鉴定出32、62和48种成分,涉及烃类、醇、醛、胺、酮、酸、酚、酯等多种化合物。结论大葱、雪松和香附精油对淡色库蚊幼虫和成蚊均有较强的生物活性,在媒介蚊虫的防治中有潜在的应用价值。

微山湖地区2022年三带喙库蚊生境与抗药性调查研究

目的对微山湖地区三带喙库蚊的孳生地种类以及抗药性进行调查和测定,为合理选择、使用杀虫剂和防控乙脑提供科学依据。方法2022年7月至9月在微山湖地区监测点,采用勺捕法采集三带喙库蚊幼虫。按照WHO推荐的幼虫浸渍法,检测三带喙库蚊幼虫对4种常用杀虫剂的抗药性,成蚊则采用接触筒法测定抗性水平。结果三带喙库蚊幼虫主要孳生于稻田和灌溉渠,对敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯和氯氰菊酯的抗性倍数分别为6.53、3.27、98.75和295.50。对溴氰菊酯和氯氰菊酯的抗药性最高,表现为高度抗性;对敌敌畏和残杀威表现为中度抗性。将三带喙库蚊成蚊暴露于0.05%溴氰菊酯、0.15%氯氰菊酯、0.5%马拉硫磷和0.1%残杀威各1 h、24 h,死亡率分别为21.05%、19.35%、45.45%、94.11%。结论微山湖地区三带喙库蚊对4种常用杀虫剂均产生了抗药性,其中以菊酯类杀虫剂抗性水平最高,当地媒介防控部门应合理选择使用杀虫剂,以更好地控制蚊媒密度及其传染病流行。

淡色库蚊成蚊肠道可培养细菌的分离鉴定与产消化酶活性分析

目的为明确淡色库蚊成蚊肠道可培养细菌的组成及产消化酶活性。方法采用传统分离培养的方法,分离纯化淡色库蚊成蚊肠道可培养细菌,通过16S rRNA序列分析进行分子鉴定,利用平板透明圈法筛选产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的细菌,通过水解圈(D)与菌落直径(d)的比值,比较不同细菌的产消化酶活性。结果从淡色库蚊成蚊肠道中共分离出11种细菌,其中可产淀粉酶的细菌有6种,产蛋白酶的细菌有7种,4种细菌同时产淀粉酶和蛋白酶,未筛选到产纤维素酶和脂肪酶的细菌。6种细菌的产淀粉酶活性差异具有统计学意义(F=19.451,P<0.0001),其中Pseudochrobactrum的产淀粉酶活性最强;7种细菌的产蛋白酶活性差异有统计学意义(F=5.437,P=0.004),其中金黄杆菌(Chryseobacterium candidae)的产蛋白酶活性最强。结论淡色库蚊成蚊肠道中存在产淀粉酶和蛋白酶的细菌,这些细菌可协助淡色库蚊成蚊消化和分解食物。

山东省单县2023年白纹伊蚊种群密度与抗药性调查

目的 掌握单县白纹伊蚊的种群密度、季节消长及其对常用杀虫剂的抗药性水平,为当地合理选择杀虫剂防控蚊虫提供科学依据。方法 选择单县4个村庄作为监测点,采用双层叠帐法采集成蚊,采用勺捞法采集白纹伊蚊幼虫。采用幼虫浸渍法测定白纹伊蚊幼虫对常用杀虫剂的抗药性水平。结果 2023年单县共捕获成蚊4 526只,种群密度在8月达到峰值。幼虫对溴氰菊酯和氯氰菊酯表现为高度抗性,抗性倍数分别为52.00倍和169.00倍;对残杀威和敌敌畏表现为中度抗性,抗性倍数分别为9.40倍和5.39倍;对苏云金杆菌(Bt)表现为敏感。结论 单县地区白纹伊蚊密度较高,存在登革热流行传播的风险,对溴氰菊酯、氯氰菊酯的抗性均达到了高抗水平,对敌敌畏、残杀威等常用的杀虫剂也产生了一定水平的抗性。

2023年山东省微山湖流域淡色库蚊抗药性调查

目的掌握山东省微山湖流域优势蚊种对5种常用卫生杀虫剂的抗药性水平,为合理有效的蚊幼虫防制提供科学指导。方法2023年5—10月在微山湖流域设立监测点:任城区、鱼台县、微山县、滕州市、邹城市,采用勺捕法采集淡色库蚊幼虫。采用幼虫浸渍法,测定淡色库蚊3龄末4龄初幼虫死亡数。结果2023年微山湖流域各地区孳生淡色库蚊幼虫对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏、残杀威等化学杀虫剂的抗性倍数均大于166,对高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的抗性倍数最高,均处于高抗水平。对敌敌畏和残杀威处于中抗或低抗水平,对Bt处于低抗或敏感水平。结论2023年微山湖流域优势蚊种已对常用卫生化学杀虫剂均产生了不同程度的抗药性。在灭蚊工作中,要注重环境整治和杀虫剂的科学合理使用。

多组学分析在昆虫滞育中的应用

组学技术将生物的相关问题分别展现在基因、蛋白质和代谢物等不同层次水平上,已成为解读生命过程的重要工具。本文分别从转录组学、蛋白质组学、代谢组学以及组学间的联合应用等方面概括总结了组学技术在昆虫滞育研究中的应用情况,阐述了以转录组学、蛋白质组学和代谢组学为代表的多组学技术在昆虫滞育调控分子机制中取得的重要成果,并针对当前研究现状,对昆虫滞育中组学技术应用的前景和局限性进行了总结和展望,以期为昆虫滞育调控分子机制的研究提供参考依据。

淡色库蚊CYP6F1基因的克隆及表达差异的鉴定

目的克隆淡色库蚊细胞色素P450(CYP6F1)基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT-PCR技术和RACE策略,从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系Ⅳ龄幼虫中克隆细胞色素P450基因(CYP6F1),用相应的软件进行生物信息学分析,并用实时定量PCR和RT-PCR技术分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因,基因全长1639bp,开放阅读框为1527bp,编码508个氨基酸(GenBank登录号:AY662654)。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因(CYP6F1)有99%的同源性,并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征,一个膜锚定信号、两个还原酶结合位点、一个的典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT-PCR结果表明,CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关,并且在各个发育阶段有不同的表达。

淡色库蚊细胞色素P450基因的克隆、序列分析及表达差异的鉴定

目的克隆淡色库蚊细胞色素P450(CYP6F1)基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT-PCR技术和RACE策略,从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系4龄幼虫中克隆细胞色素P450基因(CYP6F1),用相应的软件进行生物信息学分析,并用实时定量PCR和RT-PCR分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因,基因全长1639bp,开放阅读框为1527bp,编码508个氨基酸(GenBank登录号:AY662654)。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因(AB001324)有99%的同源性,并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征,1个膜锚定信号、2个还原酶结合位点、1个典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT-PCR结果表明,CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关,并且在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。

昆虫抗药性与控制对策

媒介昆虫严重危害人类健康,据估计传染病中有2/3由媒介昆虫传播。世界史上闻名的虫媒传染病如鼠疫、斑疹伤寒、黄热病、疟疾等都曾造成广泛的流行,夺去许多人的生命。当今世界随着人类交往的日益频繁,发现许多新的和重新出现的由媒介昆虫传播的疾病。目前,主要的媒介昆虫都对杀虫剂产生了抗性,到1992年为止,52种按蚊;39种库蚊、体虱、臭虫、锥春;8种蚤和9种蜱对杀虫剂产生了抗性。另一些重要的昆虫如蝇,蟑螂等也产生了抗性[1]。

山东省囊虫病的危害及对经济影响的调查评价

目的 为探讨囊虫病的危害性及对社会经济的影响。方法 随机调查了 15 0例囊虫病住院患者 ,对其造成的机体损害作了评价并对患者的直接和间接经济损失进行了量化研究 ,并评价全省因囊虫病猪所造成的经济损失。结果 住院患者中 ,脑囊虫病占 97 33% ,造成严重损害 ,如癫痫发作、高颅压等 ,给病人及家属精神和心理上造成伤害。患者年人均经济损失为 6 80 5元 ,最高者达 375 97元。人均直接损失 5 770元 (84 8% ) ;间接损失 10 35元 (15 2 % )。直接经济损失占家庭年均纯收入的 82 2 % ,最多为 32 912元 ,占家庭年纯收入的比例最高者达 6 0 1%。误诊、误治率为 34% ,最高费用 2 0 0 0 0元。全省囊虫病患者年经济损失为 2 3817 5万元 ,其中直接经济损失为 2 0 195万元 ,间接经济损失 36 2 2 5万元。全省猪囊虫病平均感染率为 0 74 % ,平均每年检出囊虫病猪 174 4 2 0头 ,年直接经济损失为 115 6 4万元。全省因囊虫病而造成的总的经济损失为 35 381 5万元。结论 囊虫病不但对人体造成严重的危害 ,而且引起巨大的经济损失。

猪带绦虫病和囊虫病研究进展

猪带绦虫病和囊虫病研究进展公茂庆，高永娥，赵中平山东省寄生虫病防治研究所（济宁２７２１３３）济宁市任城区党校卫生室猪带绦虫病和囊虫病流行于亚洲、非洲、东欧及中南美洲，引起严重的公共卫生问题，特别是脑囊虫病，对人类健康危害极大。在某些发展中国家，人囊虫...

淡色库蚊抗药性相关胰蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定

目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区。T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/try。经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1neo质粒共转染蚊虫细胞C6/36,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞。用RTPCR、Westernblotting鉴定胰蛋白酶基因的转录表达。结果酶切和PCR鉴定表明,成功构建昆虫细胞表达载体pIE13/try;证实胰蛋白酶基因已转入C6/36细胞,并建立稳定转染细胞系,成功地表达目的基因。结论稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究胰蛋白酶与抗药性的关系提供了良好的实验基础。

333例乳糜尿患者临床检验分析

1986年以来,我们先后对苍山县、滕州市、邹县的各一个乡镇进行调查确诊的333例乳糜尿患者进行了临床检验,结果报告如下。一、检验对象凡各乡镇在预备调查中发现的疑似乳糜尿肴经询问病史等确诊后,不论现症或非现症乳糜尿患者均作为临床检验对象。

埃及伊蚊中肠上皮细胞的原代培养和细胞的持续培养(英文)

目的 探讨蚊虫中肠上皮细胞的培养 ,建立细胞的原代培养和细胞持续培养。 方法 用含抗生素的 10 %蔗糖水喂养新羽化出的埃及伊蚊成蚊 ,3d后 ,在无菌的条件下解剖中肠 ,用含抗生素的平衡盐溶液洗 3次 ,放入Grace’s培养基中 (含有 7%小牛血清 ,0 .5 %庆大霉素 ,1mg/ml抗酵母菌素和 6μl/ml复合维生素 ) ,2 5℃培养箱中培养。 结果 培养 3d后 ,95 %的细胞生长良好 ,7d后 ,大约 2 5 %的细胞死亡。第 3d的细胞死亡率明显低于以后的任何时间 (P <0 .0 5 ) ,从第 7d到 3 5d细胞死亡率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。成功地建立起中肠上皮细胞的原代培养并能持续存活 40多天 ,保持细胞的连续培养。 结论 所发展的埃及伊蚊中肠上皮细胞的原代培养和细胞的持续培养的方法是成功的。

外源性双链RNA在蚊虫细胞中介导的基因沉默(英文)

目的 近年来 ,双链RNA介导的基因沉默 (RNA干扰 )已在许多动植物中发现 ,并成为研究基因功能的强有力的工具。为确定蚊虫细胞中是否有RNA干扰现象 ,以期为利用RNAi效应消除蚊虫抗药性研究奠定基础。 方法 设计 5′端带T7启动子的绿色荧光蛋白 (GFP)及糜蛋白酶特异性引物 ,PCR扩增目的基因获得 5′端带有T7启动子DNA片段 ,体外转录成单链RNA ,退火后形成双链RNA。转染带有GFP基因的昆虫细胞表达载体 pAct .GFP和双链RNA进入C6/ 3 6蚊虫细胞 ,72h后收集细胞 ,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达差异 ,用半定量RT PCR检测GFP的mRNA的表达水平。 结果 转染糜蛋白酶基因双链RNA和 pAct .GFP质粒的细胞及仅转染pAct .GFP的细胞的GFP表达水平没有明显差异 ;转染GFP基因的双链RNA和pAct .GFP质粒的细胞的GFP表达水平显著下降 ,达 40 %～ 5 0 % ,GFP的mRNA的表达水平也相应下降了 60 %。 结论在蚊虫细胞内 ,双链RNA能特异性的抑制相应的同源性基因的表达 ,引起基因沉默 。

SPA-IEST检测囊虫病抗体的应用

本文应用猪囊尾蚴头节冰冻切片抗原进行SPA-IEST,检测了经证实为囊虫病的67名患者血清,52例其它寄生虫病患者及60例健康人血清。结果囊虫病的阳性率为92.5%,其它寄生虫病患者的交又反应率为5.8%,健康人的假阳性率为3.3%。表明此法敏感性高、特异性强、重现性好,且简便、快速不需特殊仪器,经济安全,可用于囊虫病的临床诊断。

RNAi技术及其在寄生虫相关基因功能研究上的应用

RNAi是近几年发展起来的抑制基因表达的新技术。它通过dsRNA介导的特异性降解相应序列的mRNA ,从而导致转录后的基因沉默。目前已在线虫、果蝇、锥虫、真菌、小鼠及植物等生物中建立RNAi技术。其可以作为一种简单有效的代替基因敲除的分子遗传的研究工具 。

山东省基本消灭丝虫病后乳糜尿的调查研究(英文)

目的 探讨山东省班氏丝虫病基本消灭 10年、2 3年后乳糜尿的发病情况。方法 于 1985年 ,现场流行病学调查了 4个县 190 0 38人 ;1998年 ,随机调查了上述 4县中的 1个县 41114人。结果 第 1次调查发现 35 7例乳糜尿 ,其中 110例为现征乳糜尿 ,2 47例为非现征乳糜尿。 131例 ( 36 .6 9%)在控制前发病 ,2 2 6例 ( 6 3.31%)在控制后发生。第 2次共查出了 78例病人 ,平均发病率为 0 .19%。仅有 4例新发病人 ,较 1985下降了 95 .87%。 2 4例死于各种原因 ,累计死亡率为 2 4.74%。结论 基本消灭丝虫病后 10年内乳糜尿有增加的趋势 ,10年后乳糜尿逐渐下降直至停止发生。