基于适配体-杂交链式反应比色检测生鲜牛乳中四环素类抗生素

)以特异性识别四环素类抗生素(TCs)的广谱型适配体为识别元件,结合杂交链式反应(HCR)信号放大策略,提出了一种TCs多残留比色检测方法,并优化了检测条件和进行了方法学考察。取40 nmol·L^(-1)生物素化检测探针(bio-DP)溶液加入到包被有亲和素的酶标板中,室温孵育后加入牛血清白蛋白(BSA)溶液,封闭反应1 h。加入生鲜牛乳样品稀释液,室温孵育20 min,如果样品中含有TCs,TCs与bio-DP的适配体序列结合,其发夹结构被打开。加入200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA1(bio-H1)溶液和200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA2(bio-H2)溶液,室温下进行HCR 40 min,从而形成具有多个重复单元的双链DNA(dsDNA)纳米线。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA-HRP),室温孵育标记dsDNA。加入显色剂[含3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)],HRP催化TMB生成蓝色物质,显色5~8 min后终止反应,在酶标仪中于450 nm测量上述体系的吸光度。结果显示,bio-DP对四环素、土霉素、金霉素和多西环素具有高特异性,和卡那霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、泰乐菌素、磺胺嘧啶和恩诺沙星等抗生素无交叉反应。四环素、土霉素、金霉素和多西环素的质量浓度总和在0.8~100μg·L^(-1)内与对应的吸光度总和呈线性关系,检出限(3s/k)为0.18μg·L^(-1)。对生鲜牛乳样品进行加标回收试验,TCs回收率为86.4%~106%,测定值的相对标准偏差(n=3)为2.5%~7.1%。方法应用于生鲜牛乳样品的分析,检测结果与国家标准方法GB 31658.6-2021差异不显著(P>0.05),检出的TCs总量也均未超标(GB 31650-2019)。与文献报道的其他方法相比,上述方法兼具简单、快速、检出限低、准确度高等优点,适用于食品中四环素类抗生素多残留的快速检测。

高通量测序技术在乳制品微生物多样性中的研究进展

高通量测序技术,以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定为标志,目前已广泛应用于各个领域。为了阐明高通量测序技术在乳制品微生物多样性研究中的应用前景,本文归纳介绍了Solexa、454、SOLID和Ion Torrent等常用高通量测序技术的原理和优点,综述了近年来高通量测序技术在乳制品微生物物种多样性的研究进展,指出了高通量测序结果中处理海量数据难的问题,并分析展望了高通量测序技术在乳制品微生物多样性中的发展趋势。

新疆少数民族大学生马克思主义“五观”教育的必要性及实施路径

新疆少数民族大学生是未来建设新疆的中坚力量。积极探索新时期下新疆高校"五观"教育实施路径,进一步教育和引导少数民族大学生树立正确的马克思主义"五观",对稳定新疆、建设新疆和培养社会主义事业合格建设者和可靠接班人有重要意义。

结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的克隆、表达、纯化和复性

目的 构建结核分枝杆菌分泌蛋白MPT 64的重组质粒,并在大肠杆菌中表达及纯化和复性重组蛋白.方法 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出mpt64基因片段,插入PKRX-T载体中,再亚克降到表达载体PET30a中,在大肠杆菌中表达;应用组氨酸标签（His-Tag）纯化重组蛋白;在PBS中通过半透膜恢复重组蛋白的天然结构.结果 构建了含MPT64重组质粒的大肠杆菌工程菌,并以包涵体形式表达重组蛋白MPT 64,其占细胞总蛋白的20%～30%;重组蛋白变性后经镍柱纯化,其纯度达90%以上;通过半透膜完全恢复重组蛋白的天然结构.结论 具有天然结构和高纯度的重组融合蛋白有可能成为有效的结核病血清学诊断的候选抗原.

大管径供热管道直埋敷设技术应用初探

在《城镇直埋供热管道工程技术规程》的基础上 ,对大管径直埋供热管道的强度条件、稳定条件进行了分析和补充 。

以学科竞赛为抓手的化工类时代新人培养探索

高校肩负着立德树人的根本任务,为党育人为国育才的使命,是培养担当民族复兴大任时代新人的重要阵地。青年学生富有想象力和创造力,是创新创业的有生力量。作为时代新人,要让创新成为青春远航的动力,让创业成为青春搏击的能量。因此,创新创业成为时代新人重要的核心要素之一。创新创业教育在高等学校是培养学生实践能力和创新精神的有力抓手,是深化高等教育教学改革的重要举措。

基于适配体识别-纳米金比色法快速检测苏丹红

以苏丹红Ⅲ核酸适配体为识别元件,以无标记的纳米金为颜色指示剂,NaCl溶液作为纳米金聚集诱导剂,构建了一种简单、快速、灵敏的苏丹红可视化比色检测方法。对适配体浓度、NaCl浓度、反应时间等条件进行优化,并对该方法的灵敏度、准确性、特异性进行评估,将其应用于食品中苏丹红Ⅲ的快速检测,并与国标法对比验证。结果显示,在适配体浓度100 nmol/L、NaCl浓度40 mmol/L、反应时间10 min等最优条件下,纳米金吸光度比值(A_(620)/A_(520))与苏丹红浓度在1.8~57.6 ng/mL范围内呈良好线性关系(R^(2)=0.981),方法检出限范围0.76~1.12 ng/mL,裸眼可视化检出限为7.2 ng/mL,检测时间为12 min。特异性分析显示,本方法对苏丹红Ⅰ,Ⅱ和Ⅳ有交叉反应,表明可以用于检测苏丹红Ⅰ~Ⅳ。食品中苏丹红Ⅲ加标回收率为82.1%~94.7%,相对标准偏差3.9%~7.7%,与国标方法相比无显著差异(P>0.05)。该方法适用于批量样品中苏丹红的快速检测。

新疆不同地域发酵乳品中Lactobacillus多样性的研究

利用MRS,M17等5种不同培养基从12份采自新疆北部伊犁、博乐、塔城、阿勒泰地区牧民家庭传统方法制作的乳品中分离乳酸菌,并进行了生理生化表型特征鉴定。对这些乳酸菌进行16Sr RNA基因序列的测序,构建系统发育树,初步建立其属水平的进化地位,再利用乳杆菌种间特异性引物对其进行种水平的鉴定和分类。共分离164株疑似乳酸菌,大部分菌株对温度适应性较强。以杆菌为主,系统发育表明:样品中乳酸菌主要有7个属,其中Lactobacillus(78株)、Carrobacterium(3株)、Weissella(1株)、Lactococcus(22株)、Enterococcus(47株)、Streptococcus(8株)、Vagococcus(5株)。种特性扩增显示乳杆菌存在种水平的差异。主要有4个种。利用牛津杯从样品中筛选出了10株对大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)均具有明显抑制作用的乳杆菌,为乳酸菌作为生物型防腐剂应用到食品工业中奠定基础。