循环肿瘤细胞在结直肠癌转移复发检测中的意义

复发转移是结直肠癌(CRC)中癌症相关死亡的主要原因。血液中循环肿瘤细胞(CTC)的存在与肿瘤复发风险的增加、预后不良风险的增加有关。CTC作为一种新生物标志物的临床意义在近十年来得到了广泛的研究。研究表明,CTC的存在与转移性扩散和低生存率相关,也可作为治疗反应的标志物。本文对CTC检测在CRC复发转移方面的作用进行综述。

长链非编码RNA ZNF674-AS1通过Wnt信号通路调节肝癌细胞的增殖与凋亡

目的 检测长链非编码RNA ZNF674-AS1在肝癌组织中的表达,探讨其表达对肝癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 收集2017年10月至2018年4月期间广西医科大学第一附属医院外科手术切除的肝癌标本10例及癌旁组织10例,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对组织中ZNF674-AS1的表达水平进行定量。此外,小干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞株HepG2和QGY7701中构建ZNF674-AS1稳定敲低的细胞株,并利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测ZNF674-AS1对肝癌细胞增殖的影响,并检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达水平。利用原位缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞学技术检测空白对照组和ZNF674-AS1敲低组肝癌细胞的凋亡水平。同时利用免疫印迹技术检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达水平。结果 肝癌组织中ZNF674-AS1表达水平约为癌旁组织9.6倍(P<0.05);利用siRNA抑制ZNF674-AS1后,HepG2和QGY7701肝癌细胞增殖明显受到抑制,两组细胞NC-siRNA组和ZNF674-AS1 siRNA组克隆形成数分别为:HepG2:(282.13±2.13)个比(86.00±10.21)个;QGY7701:(225.52±1.93)个比(64.00±6.82)个(P<0.05);此外,两种细胞bax表达明显上调(HepG2:2.35±0.23比11.35±1.32;QGY7701:3.47±1.45比14.22±1.58),而bcl-2表达水平受到抑制(HepG2:12.17±0.39比4.22±1.92;QGY7701:13.52±1.92比3.89±1.42)。TUNEL和流式细胞学技术结果显示,敲低HepG2和QGY7701肝癌细胞中的ZNF674-AS1能够分别将凋亡率增加24.56倍及14.88倍(P<0.05)。ZNF674-AS1敲低后,两种细胞株中的Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达被抑制(P<0.05)。结论 抑制肝癌细胞中的ZNF674-AS1表达可以抑制肝癌细胞增殖,同时促进其凋亡,其机制可能与ZNF674-AS1介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。

补体因子CD59缺乏显著加重小鼠胆汁淤积性肝损伤

目的观察补体因子CD59缺乏在小鼠胆总管结扎(BDL)模型中对胆汁淤积性肝损伤的作用.方法 BDL诱导小鼠胆汁淤积模型,于术后第3天检测肝脏损伤相关指标.结果与野生型小鼠比较,在CD59缺乏的BDL小鼠中观察到血清谷丙转氨酶[ALT:(730.67±104.50) U/L比(311.33± 52.47) U/L,t=8.784,P< 0.01],谷草转氨酶[AST:(877.17±76.31) U/L比(454.83±45.87) U/L,t=11.620,P<0.01],总胆红素[TBIL:(244.15±32.22) U/L比(141.85±41.51) U/L,t=4.769,P<0.01]水平升高,表明CD59缺乏显著加重小鼠胆汁淤积性肝损伤.然而,两个BDL组之间C3a[(408.30±167.82)μg/L比(269.48±49.33)μg/L,t=1.587,P>0.05]和C5a[(284.43±80.88)μg/L比(212.95±13.53)μg/L,t=1.743,P>0.05]水平差异无统计学意义,表明CD59缺乏不影响体内C3和C5活化产物的产生.在CD59缺乏的小鼠肝组织中观察到膜攻击复合物(MAC)沉积量增加.结论 CD59缺乏上调了MAC的表达,导致胆汁淤积性肝损伤加重.

三维重建在术前确定手术方式及评估手术安全性中的作用

目的探讨三维重建技术在术前评估肝癌切除安全性及确定手术方式中的作用。方法分析我院肝胆外科行肝癌切除手术30例患者资料。术前行CT增强扫描,结合美国EDDA公司IQQA(R)-Liver系统对肝脏CT图像进行三维重建,得出全肝体积(TLV)、肿瘤体积(TV)、功能性肝体积(FLV)、拟切除的功能性肝体积(EFLV)、拟切除的肝体积(ELV)、剩余肝体积(FLR),排水法得出实际切除的肝脏体积(AELV),计算标准肝体积(SLV)。统计手术时间、术中出血量、术后并发症及死亡率。对ELV与AELV进行t检验;分析TV与EFLV、FLR相关性。结果ELV(686±488)与AELV(687±485)差异无统计学意义(t=-0.370,P=0.773),术前模拟肝癌切除的手术方案与实际手术方案一致。对TV与EFLV、FLR进行Spearman相关性检验,TV与EFLV呈正相关(r=0.392,P=0.010),与FRL呈负相关(r=-0.476,P=0.003)。术后无肝功能衰竭及死亡患者。结论利用计算机三维辅助定量分析,进行术前模拟手术,可以在术前充分评估肝癌切除安全性;可以根据FLR来确定不同的手术方式。

丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在肝细胞癌组织的表达及其临床意义

目的检测肝癌组织芯片中丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP)的表达,探讨其在肝癌诊断与预后中的临床意义.方法应用免疫组织化学法检测93例肝癌及对应癌旁组织中STRAP表达,并统计分析STRAP表达水平与患者临床病理特征、术后预后等的关系.结果 STRAP在肝癌组织表达水平明显高于癌旁组织,9例伴有脉管侵犯的肝癌组织中,STRAP表达阳性率为66.7%,且均为强阳性;肝癌组织中STRAP表达水平与病理分级呈负相关(R=-0.205,P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期无明显相关(x2=0.167、0.015、0.522、0.004,P>0.05);患者术后生存时间与肿瘤大小(P<0.05)、临床分期有关(P<0.01),而STRAP表达水平与生存时间无明显相关(P>0.05);Cox回归分析提示临床分期是影响预后的独立危险因素(P<0.01).结论 STRAP在肝癌中高表达,同时在伴有脉管侵犯的肝癌组织中阳性率比较高,且均为强阳性,提示STRAP可能与肝癌侵袭能力有关;STRAP与病理分级呈负相关,但STRAP对肝癌预后无预测价值,临床分期是影响肝癌预后的独立危险因素.

丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在肝癌细胞生物学功能中的作用

目的检测丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白(STRAP)在肝癌细胞及正常肝组织中的表达,并探索其对肝癌细胞生物学功能的影响。方法通过检测九种肝癌细胞株及正常肝组织STRAP相对表达量,并分别在肝癌细胞株HepG2、SNU449中构建STRAP过表达及敲减细胞株。使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹技术检测细胞株构建后STRAP表达,用Transwell小室及含有基质胶的Transwell小室检测肝癌细胞的迁移和侵袭能力,并使用细胞计数试剂盒(CCK-8)及细胞克隆形成实验检测STRAP对肝癌细胞增殖能力的影响,并利用流式细胞学技术检测STRAP对肝癌细胞凋亡的影响。结果肝癌细胞株中STRAP表达水平明显高于正常肝组织;在肝癌细胞中STRAP敲减后,敲减组与对照组mRNA相对表达量分别为(0.17±0.19)、(2.22±1.02),敲减组表达水平明显低于对照组(P<0.05)。过表达STRAP基因后,过表达组与对照组mRNA相对表达量分别为(3.25±0.39)、(1.05±0.37),过表达组明显高于对照组(P<0.01)。STRAP基因敲减后,SNU449细胞克隆形成实验对照组和敲减组细胞克隆数目分别为(221.30±9.60)、(58.30±4.49),迁移实验对照组和敲减组细胞穿膜数分别为(0.76±0.04)、(0.44±0.06),侵袭实验对照组和敲减组细胞穿膜数分别为(1.11±0.05)、(0.60±0.05),细胞增殖实验敲减组在第72、96、120小时,细胞增殖数目较对照组下降,细胞凋亡实验对照组和敲减组细胞凋亡比例分别(4.11±0.12)、(11.73±0.40),细胞的克隆形成能力、迁移侵袭能力及增殖能力明显受抑制(P<0.05),细胞凋亡明显增多(P<0.01);SRTAP基因过表达后,HepG2细胞在第48、72、96、120小时,细胞增殖数目较对照组增多,细胞增殖能力明显增强(P<0.01),细胞凋亡实验对照组和过表达组细胞凋亡比例分别(8.87±0.12)、(8.34±0.06),细胞凋亡明显受抑制(P<0.05)。结论STRAP在肝癌细胞中呈高表达,并且起着促进肝癌细胞增殖、增强肝癌细胞迁移侵袭能力,同时抑制肝癌细胞凋亡的作用。