山东省重点畜间人兽共患病防控现状调查及问题分析

布鲁氏菌病、牛结核病、炭疽、狂犬病等是当下我省畜间人兽共患病防治的重点,生物安全风险高。目前病原种类多且复杂、基层防疫体系重视不够、宣传不广泛是动物疫病防控的短板。因此,建议夯实基层防疫基础,强化基层畜间人兽共患病教育培训,深化多部门联防联控,切实加强公共卫生安全。2023年1月调研组对山东省16地市的重点畜间人兽共患病防控现状进行了调研,为进一步提升全省畜间人兽共患病防控能力提供了参考。

牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法,本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明,建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10^(1)~3.67×10^(7) copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9905;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为3.67×10 copies/μL;该方法特异性良好,与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内和批间的变异系数均介于0.133%~1.81%。该方法,临床样品的检测符合率达90%。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法,为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。

山东省部分宠物犬饲养免疫情况问卷调查与分析

为更好地开展狂犬病防控与净化工作,采用问卷调查的方式,对山东省16个地市80家宠物医院的接受服务宠物犬进行摸底调查,并探讨了宠物犬饲养免疫情况对山东省狂犬病无疫区建设的影响。结果显示:宠物犬饲养者以18~40岁人群为主,占总数的66.92%;主要饲养小型犬,占67.87%;92.70%的饲养者为宠物犬进行了狂犬病疫苗免疫,其中78.67%的饲养者在幼犬3月龄时为其进行首次狂犬病疫苗免疫,94.40%的已免疫狂犬病疫苗的宠物犬能够得到定期的加强免疫接种;93.38%的饲养者选择携带患病犬前往动物医院就医,61.95%的饲养者为犬佩戴免疫标识或将标识随身携带。结果表明:山东省各地宠物犬饲养者具有一定的疫病防疫知识,基本掌握了宠物犬饲养中的疫病防控风险点,这有利于山东省狂犬病无疫区建设的推进。部分宠物犬饲养者对于当地动物疫病防控相关政策法规以及专业知识仍缺乏科学全面的认识,因此需要继续加大狂犬病防控的宣传力度,加强对宠物市场的监督管理和对饲养者的专业指导,这将是今后山东省狂犬病无疫区建设工作的重点。

鸡毒支原体病的传染病学、发病机制及防控措施

家禽的支原体病是由软膜体纲(Mollicutes)支原体目(Mycoplasmatales)支原体科(Mycoplasmataceac)支原体属(Mycoplasm)的鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起,其中MG是分布最广泛的致病性支原体,具有广泛的宿主易感性和毒力。MG主要感染家禽的呼吸系统、生殖系统和肌肉骨骼系统,导致死胚、雏鸡生长性能差、降低产蛋鸡生产性能,对肉、种禽养殖业危害巨大,行业内对其净化的呼声越来越高。鸡毒支原体病的预防主要依赖于农场和鸡群的生物安全、管理策略、早期诊断、抗菌剂的使用和疫苗接种。本文综述了鸡毒支原体病的传染病学、感染的发病机制以及防控措施,以期为鸡毒支原体的净化防治提供理论支撑。

山东部分地区禽传染性支气管炎流行病学调查

为了解近年来山东省流行的禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)S1基因遗传特性,试验于2020-2023年从山东14个地市的肉鸡养殖场及蛋鸡养殖场共收集462份病料(包含组织器官、泄殖腔拭子和咽拭子),采用RT-qPCR和RT-PCR对病料进行IBV检测。结果显示:山东省2020-2023年肉鸡和蛋鸡养殖场IBV阳性检出率为27%(125/462),并在3年试验期间IBV感染率呈现逐年上升趋势,在初春、秋末及冬季感染率较高,以济南(49%)、泰安(33%)和东营(28.9%)地区IBV阳性检出率最高,肉鸡的IBV感染率略高于蛋鸡。试验成功分离37株IBV分离株,其S1基因核苷酸同源性为74.8%~99.8%,分属GⅠ-22、GⅠ-13、GⅠ-7、GⅠ-1、GⅠ-28(LZ05型)和GⅠ-19(QX型)6种基因型,其中QX型为分离株优势基因型(83.7%,31/37)。31株QX型IBV分离株S1基因在第68、116、208、261、333和369位的碱基突变、替换最为频繁。研究提示:山东部分地区IBV感染率呈现逐年上升趋势,多发于寒冷季节且肉鸡发病较为严重,流行毒株仍以QX基因型为主,并且LZ05型首次在鲁中地区被检出。

2023年山东省某市牛羊布鲁氏菌病横断面调查

为掌握山东省A市牛羊布鲁氏菌病(以下简称“布病”)流行情况,为布病防控决策提供数据支撑,采用横断面调查研究方法,运用普查抽样策略,对A市牛羊存栏量、布病流行率及不同规模场群布病流行情况进行了调查。结果显示:牛布病场群表观流行率和个体表观流行率分别为0.64%(95%CI:0~1.52%)和0.03%(95%CI:0~0.07%),羊布病场群表观流行率和个体表观流行率分别为3.37%(95%CI:2.07%~4.67%)和0.39%(95%CI:0.34%~0.44%)。规模<50头(只)场群的场群表观流行率最低,与存栏50~99和100~499头(只)场群均具有统计学差异(P<0.05)。阳性场群复检的场群表观流行率(25.00%)高于全市整体布病场群表观流行率(3.40%),差异具有统计学意义(P<0.05)。以上结果表明:该市牛布病流行率较低,处于稳定控制状态,羊布病流行率稍高,需在后续监测净化中重点关注;不同规模场群的布病场群流行率存在差异,养殖规模较大的场群流行率较高,这为探寻风险因素提供了方向;阳性场群布病复发风险较高,今后在布病防控中应对阳性场群开展持续性监测净化工作。

山东省羊场布鲁氏菌病病例对照研究

为探究羊养殖场引进调出环节风险因素对布鲁氏菌病(简称“布病”)传播的影响,运用病例对照研究方法,依据2020—2021年山东省各市上报的布病监测数据,筛选病例组和对照组,按照1:1匹配的方式开展调查,收集相关数据资料。通过Logistic多因素回归分析,调整“饲养动物种类”“饲养模式”“曾引进过羊”“近1年有母羊发生流产”风险因素后,发现“经经纪人引羊”与养殖场发生布病存在统计学意义(OR=5.64,95%CI:2.22~14.31,P<0.001)。结果表明,通过经纪人引羊相对增加了羊养殖场发生布病的风险。建议相关部门加强对经纪人引导和规范,建立备案制度,规范收羊方式,提升生物安全意识,从而降低引进调出环节布病传播风险。

非洲猪瘟流行病学与防控措施研究进展

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种烈性传染病性疾病,在家猪和欧亚野猪中具有极高的致死率。在过去的十年里,非洲猪瘟在欧洲、亚洲和美洲等国家中相继出现,目前已广泛分布于全球各地。在此背景下,本文综述了非洲猪瘟病毒的病原学、流行病学、诊断及防控措施等方面的最新研究进展,以期为非洲猪瘟的防控提供理论参考。

一例鸭伤寒沙门氏菌的诊治报告

鸭沙门氏菌病是一种由沙门氏菌引起的禽副伤寒,对养鸭业危害巨大,是种鸭场要净化的疾病之一,也是目前养鸭场重点控制的疾病之一。该病既能垂直传染,又能水平传播,具有发病迅速、传染性高、死亡率高的特征,各个日龄段均可发病,雏鸭在孵蛋器里感染后呈败血症而迅速死亡;鸭场雏鸭感染发生鸭沙门氏菌病,多为急性或亚急性感染,群体出现腹泻、结膜炎,乃至批量死亡;成年鸭感染本病常呈慢性或隐性经过,部分成鸭消瘦,不仅影响生产性能,更有可能作为带菌鸭,成为沙门氏菌感染的隐患。

2022年山东省规模场牛羊养殖人员布鲁氏菌病知信行调查

为了解山东省牛羊养殖人员的布鲁氏菌病知识知晓、态度意愿和行为实施情况,探寻宣传干预的薄弱点,为今后宣传培训工作提供数据支持,采用随机抽样方法,对规模场牛羊养殖人员进行问卷调查,计算知信行(KAP)水平,并运用卡方检验、logistic回归等统计方法分析影响因素。结果显示:山东省牛羊养殖人员的布病知识知晓率、态度意愿率、行为实施率、KAP水平分别达到90.91%、84.62%、87.50%、86.61%。结论表明:山东省规模场牛羊养殖人员KAP水平总体较高,年龄与文化程度是影响KAP水平的关键因素。建议对不同文化程度、年龄偏大与从事养殖时间不长的养殖人员开展针对性宣传。

鸡传染性支气管炎病毒遗传演化最新研究进展

鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种分布范围广泛、传染性较强,能对家禽养殖业造成重大经济损害的二类动物疫病。同其他RNA病毒一样,遗传变异方面为独特的套式转录方式,在复制过程中病毒基因组的不连续性和RNA聚合酶校对不完全性,致使碱基在复制过程中易发生替换、缺失和插入,进一步造成了该病毒高突变性的特征。近年来多个研究表明,IBV产生变异株的主要原因并不是点突变,而是滥用疫苗、盲目免疫所造成的基因重组,在自然选择以及外部高强度免疫压力的双重影响下,促使IBV不断演化变异产生新的强毒株。着重论述了近年来IBV在全球各地的流行状况,深入分析了IBV遗传演化发生原因,为该病的疫苗防控提供可靠的数据支撑。

山东省养鸽场新城疫情况流行病学调查

鸽新城疫是一种由禽I型副黏病毒引起的、流行于鸽群的高度接触性急性传染病。改革开放40余年来,我国养鸽业发生了天翻地覆的变化,信鸽和赛鸽业得到长足发展,种鸽、蛋鸽、集约化肉鸽养殖产业呈现集群现象,随着养鸽业的高速发展,鸽新城疫已经悄然成为养鸽业第一杀手,是重点防控的传染病之一。国家新城疫参考实验室主动监测的数据表明,鸽群新城疫带毒率呈上升趋势[1]。因此,对鸽群新城疫病毒感染情况应重点加以关注。

对济南某羊场青贮饲料中毒的调查

[目的 ]2013年8月21日至9月6日,济南市某羊场出现不明原因羊只持续死亡的病例,本次调查的目的是为了发现疾病暴发的主要原因及其可能的风险因素。[方法 ]通过现场问卷调查及实验室检测结合的方法进行研究。[结果 ]调查及实验室检测结果显示该羊场青贮饲料饲喂过多,实验室检测鉴定到魏氏梭菌,针对调查发现的问题,提出了具体防控建议,采取措施后迅速有效控制了疫情。[结论 ]综合调查、实验室检测结果及防控措施实施的有效性推断该羊场本次疾病暴发的主要病因是青贮饲料饲喂过多引起酸中毒,造成羊群群体发病,魏氏梭菌病的继发感染是羊只发生死亡的重要因素。

绵羊ARQ基因型PrP前体蛋白基因的克隆及原核表达

目的构建ARQ基因型PrP前体蛋白基因原核表达重组质粒,为TSE的检测及诊断、PrP的结构与功能研究奠定基础。方法根据GenBank中绵羊PrP基因全序列和表达载体pET28a载体的多克隆位点设计了绵羊PrP前体蛋白基因引物,以绵羊基因组DNA为模板,PCR扩增绵羊PrP前体蛋白基因,通过酶切将些基因克隆到pET28a(+)载体中,构建了重组原核表达质粒pET-OPrP。重组质粒转化E.coliBL-21感受态细胞,用IPTG诱导表达,通过PAGE电泳和Western-blo-ting鉴定表达的重组蛋白。结果在pET28a(+)载体中成功克隆了PrP前体蛋白基因,并在E.coli中成功表达了重组的PrP前体蛋白。结论绵羊PrP前体蛋白基因可以在E.coli中表达。本次克隆得到的小尾寒羊的PrP基因型为ARQ。

与朊毒体相关的鱼类朊蛋白研究概况

疯牛病(mad cow disease),即牛传染性海绵状脑病(bovine transmissible spongiform encephalopathy,BSE)的俗称,是一种慢性消耗性、致死性、中枢神经系统退行性疾病。疯牛病被认为与朊毒体(Prion)有关,朊毒体是由正常朊蛋白(Prion protein,或者PrPC)发生构象改变后形成的异常蛋白(PrPSc)。疯牛病的发生引起了世界各国政府和科学界的高度重视,PrP的起源及其功能研究已成为研究热点。鱼类PrP相关蛋白的研究正在展开中,由于鱼类PrP相关蛋白与朊蛋白的结构相似,鱼类感染TSE类似病存在理论上的风险。本文全面地综述了疯牛病的概况、朊毒体的特性、朊毒体与哺乳动物朊蛋白、鱼类PrP相关蛋白(PrP1、PrP2和PrP3)及鱼类其他PrP相关蛋白的研究情况,为国内水生动物PrP相关蛋白研究提供参考。

绵羊PrP前体蛋白基因真核表达载体的构建及汉逊酵母中的初步表达

根据已知的绵羊PRNP基因序列设计引物,扩增出完整的PrP前体蛋白基因,将获得的基因克隆到pGEM-T载体中,得到插入PrP前体蛋白基因的pGEM-T-OPrP质粒,经PCR、酶切、测序鉴定后,用EcoRI和NotI从pGEM-T-OPrP上切下目的片段后,连接到汉逊酵母表达载体pFMDHZ-α-A中,通过PCR、酶切、插入鉴定保证正确插入后,经电转化将重组质粒pFMDHZ-α-A-OPrP转入多形汉逊酵母中,随后通过甲醇诱导进行表达。本研究表达的绵羊PrP前体蛋白,为绵羊痒的检测及诊断、PrP的结构与功能研究奠定基础。

山东省猪瘟Erns基因系统进化分析与表达模式的研究

采用RT-PCR方法从山东省采集的怀疑携带猪瘟病毒(CSFV)的病料组织中扩增出全长为696bp囊膜糖蛋白ErnscDNA,其编码232个氨基酸的蛋白质,命名为SDCQ。通过构建E^rns蛋白家族系统进化树分析可知,山东省内流行的CS-FV毒株与传统强毒株和疫苗用毒株在主要抗原编码基因上存在较大差异。将阳性重组表达质粒pPIC9K/E^rns电转化GS115酵母菌,经筛选、鉴定、甲醇诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,在培养液上清中检测到了目的蛋白E^rns,大约50kDa。Western Blot显示,E^rns是以同源二聚体的形式存在,且表达产物可以特异性识别CSFV抗体。

新疆地方绵羊品种PRNP基因多态性研究

从新疆采取了8个地方绵羊品种的血液样品171份,提取绵羊基因组DNA,用PCR方法扩增绵羊PRNP基因,通过序列测定,对它们的PRNP基因型进行研究,确定了PRNP基因136、154、171位密码子的多态性为136(A/A),154(H/R)和171(Q/R/H/K),结果发现所检测的新疆地方绵羊品种PRNP基因136位密码子均为A,其基因型均为A型痒病抵抗性基因型。

山东省地方黄牛品种的遗传多样性研究

测定了山东省地方黄牛品种渤海黑牛和鲁西黄牛19头个体线粒体DNA(mtDNA)控制区(D-loop)的全序列,结合两个品种已报道的16个序列,用Lasergene、Mega 4.0和Dna SP 4.90软件对所得序列进行分析、构建进化树。结果显示:发现了29个单倍型,83个核苷酸多态性位点,转换/颠换比为4.27。山东黄牛主要有两个母系来源:欧洲牛和印度瘤牛,但受欧洲牛的影响更大一些。表明:山东地方黄牛品种具有丰富的遗传多样性和较高的进化潜力。