20(S)-人参皂苷Rg3抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞迁移和侵袭

目的:观察低极性20(S)-人参皂苷Rg;(S-Rg;)体外抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞迁移和侵袭的作用。方法:将不同浓度(0、20、40和80 mg/L)的S-Rg;加入THP-1细胞培养体系,Transwell小室检测S-Rg;抑制细胞迁移的作用。采用免疫细胞化学、免疫荧光、Western blot和RT-qPCR等多种方法,检测S-Rg;对THP1细胞黏附、迁移和侵袭相关蛋白表达的影响及其相关机制。结果:S-Rg;能有效地抑制THP-1细胞迁移,下调黏附相关蛋白N-cadherin,迁移相关蛋白C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)和基质细胞衍生因子1(SDF-1),以及侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,但上调抑制迁移侵袭相关蛋白E-cadherin、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)和TIMP3表达,同时下调CXCR4 mRNA表达,上调E-cadherin和TIMP1 mRNA表达,呈剂量依赖性。此外,S-Rg;降低PI3K/AKT信号通路相关蛋白激酶的磷酸化水平。结论:S-Rg;能有效抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞的迁移和侵袭,其机制可能与降低细胞内PI3K/AKT信号通路相关蛋白激酶的磷酸化水平有关。

低极性人参皂苷F4抑制SHI-1和K562白血病细胞增殖及诱导分化的研究

目的:观察低极性人参皂苷F4(F4)抑制人单核系白血病细胞SHI-1和红系白血病细胞K562增殖及诱导分化的作用。方法:以不同浓度(0、40、80和120 mg/L)的F4处理SHI-1和K562细胞,MTT比色法和半固体集落形成实验检测F4对细胞增殖的抑制作用;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞趋向分化的形态;流式细胞术和免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b和CD14阳性表达率及其荧光反应强度;免疫细胞化学和Western blot法分析SHI-1细胞分化相关转录因子PU.1和K562细胞红系分化相关GATA-1和γ-globin的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测PU.1和GATA-1的mRNA表达变化。结果:与对照(0 mg/L)组比较,F4能够抑制SHI-1和K562细胞增殖(P<0.01),诱导白血病细胞趋向分化,表现为细胞核/质比缩小,染色质粗糙,核仁减少,可见空泡,SHI-1细胞核有扭曲。SHI-1细胞CD11b和K562细胞CD14阳性表达率显著升高(P<0.01),且免疫荧光反应从弱阳性转变为强阳性;但SHI-1细胞CD14和K562细胞CD11b阳性表达率无显著变化。同时,F4上调PU.1和GATA-1的mRNA和蛋白表达水平及γ-globin的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:低极性人参皂苷F4具有抑制SHI-1和K562白血病细胞增殖及诱导分化的抗白血病作用,其作用可通过调控分化相关PU.1、GATA-1和γ-globin的表达来实现。