氧化苦参碱对小鼠哮喘模型保护作用的初步研究

目的初步探讨氧化苦参碱(OMT)对哮喘小鼠的保护作用。方法用A1(OH)3和卵清白蛋白诱发BALB/c小鼠过敏性哮喘,每日观察小鼠一般情况和体质量变化。哮喘模型建立后,予OMT或地塞米松进行治疗,分别在治疗后5 d、15 d处死部分小鼠,留存肺组织和支气管肺泡灌洗液进行检测。将留存的肺组织行HE染色观察其病理变化,BALF预处理后瑞氏染色行细胞总数和嗜酸性粒细胞计数。结果 OMT介入可改善哮喘小鼠体质量降低,在治疗后5 d和15 d时,各治疗组肺组织亦出现与哮喘模型组相似的病理变化,但炎性细胞或嗜酸细胞浸润不同程度减少。OMT的各治疗组与哮喘模型组比较,BALF中的细胞总数和嗜酸性粒细胞计数均降低(P<0.05或P<0.01)。结论氧化苦参碱对哮喘小鼠具有治疗作用。

实验动物SPF实验室改革初探

实验动物广泛应用于医学、药学、遗传学、生物学等众多研究领域。随着科学技术的进步和发展．对实验动物的要求也越来越严格。SPF（Speciific Pathogen Free）动物即无特定病原体动物，因其不携带潜在感染或条件致病菌，能够保证实验数据的精确性，已成为生命科学研究中被广泛使用的实验动物。

利用特定基因监测小规模畜禽保种群遗传多样性变化的研究

利用计算机模拟技术,观测特定基因在小规模畜禽保种群体中基因频率的变化,进而探讨畜禽保种群体遗传多样性的变化规律,为畜禽品种资源特定的种质特性保护提供科学依据和理论支持。运用Fotran90程序模拟重建Buri经典果蝇实验的保种过程,以基因频率、F-statistics和杂合度为度量指标,观测特定基因在保种世代推进过程中保种群体内和群体间遗传多样性的变化;随后,通过OMPG(one-migration-per-generation)原则研究迁移对畜禽保种群体遗传多样性的维持效应。结果发现,保种群体的遗传多样性总体趋势随保种世代的延长而逐代降低,具体表现群体分化程度加剧:Fst,Fit从初始世代0.0421,0.0011,上升到19世代的0.3885,0.3305,上升幅度高达89.16%和99.67%;杂合度降低:群体hi,hs从初始世代0.4994,0.4790下降到19世代0.3347,0.3057,下降幅度达32.98%和36.18%;而后利用OMPG原则操作保种群体,群体分化程度减弱:Fst,Fit从操作OMPG原则后初始世代0.3667,0.3504,下降到19世代的0.2341,0.1944,下降幅度达36.16%和44.52%;杂合度回升:群体hi,hs从操作OMPG原则后初始世代的0.3248,0.3166,上升到19世代的0.4025,0.3826,回升幅度分别达23.92%和20.84%。结论遗传漂变效应导致群体内遗传多样性丢失,OMPG原则输入效应可抵消小保种群体的遗传衰退,维持保种群体遗传多样性的稳定性。

不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数研究

目的研究不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数。方法采用SD大鼠64只,雌雄各半,体重200-250 g,随机分为空白对照组（n=16）;模型组（n=48）。模型组分为高剂量组（n=16）：80 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;10 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;中剂量组（n=16）：55 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;8 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;低剂量组（n=16）：30 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射,3 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周。动物饲养到第6周后,行肺动脉压和右心室内压检测,心系数和右心室肥厚指数测定。结果与对照组比较,低剂量平均肺动脉压和右室收缩压均无差异变化;中剂量组平均肺动脉压、右室收缩压均有差异变化（P〈0.05）,低剂量组心系数和右心室肥厚指数均无差异显著。中剂量组心系数差异极显著（P〈0.01）,右心室肥厚指数差异显著（P〈0.05）。结论说明采用一次性注射野百合碱55 mg/kg,联合连续注射8 mg/kg异丙肾上腺素1周。既保证了大鼠的存活率,又保证了肺动脉高压的成功形成,野百合碱和异丙肾上腺素能对大鼠产生肺动脉高压,导致心气虚弱。

杜洛克、长白、大约克猪性能对比试验

我国是一个养猪大国，猪品种资源十分丰富。据调查，现有地方猪种60个，培育品种20个，还有引人我国并已适应我国气候和生产环境的杜洛克、长白、大约克等主要外来品种。从20世纪80年代开始，根据国内外市场对瘦肉型猪日益增长的需要，以提高瘦肉率为主攻目标，用国外引进的瘦肉型猪品种为父本，用新培育猪种或地方良种猪为母本，以杂交为主要途径，开展了培育瘦肉型猪的研究，取得了重大科技成果，并积极推广应用于养猪生产。

重组甲型流感病毒NS2蛋白抑制感染小鼠肺组织干扰素的产生

目的用大肠杆菌表达获得甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白2(NS2),并观察NS2蛋白对小鼠肺组织γ干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法构建p ET22b(+)/NS2原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),通过诱导表达、纯化获得NS2。将40只BALB/c小鼠,随机分8组,分别为正常对照组、200μg/kg NS2联合病毒组、200μg/kg NS2联合RNA组、100μg/kg灭活病毒、0.2×半数致死量(LD50)病毒组、50μg/kg病毒RNA组、200μg/kg NS2组和100μg/kg NS2组,各组滴鼻给予小鼠处理。通过反转录PCR、Western blot法分别检测肺组织IFN-γ的mRNA和蛋白表达。结果在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达并纯化获得重组NS2;将NS2或/和IAV滴鼻给小鼠后,反转录PCR和Western blot法检测表明NS2联合病毒组的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白水平较病毒组均降低。结论 NS2抑制IAV所诱导的小鼠肺组织IFN-γmRNA和蛋白的水平。

老年高危型人乳头瘤状病毒感染后宫颈微环境中细胞因子变化

目的探究老年女性患者高危型人乳头瘤状病毒(HR-HPV)感染后宫颈微环境中细胞因子的变化。方法HR-HPV感染的老年女性(60岁以上)患者150例,按宫颈活检病理分级分为无宫颈上皮内病变(NSIL)组、低级别宫颈上皮内病变(LSIL)组和高级别宫颈上皮内病变(HSIL)组各50例。用流式技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测阴道灌洗液中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN)-γ、IL-17A及人转化生长因子(TGF)-β免疫炎性因子的水平。同时用焦磷酸测序法对所有患者行宫颈脱落细胞HR-HPV分型测定,并比较不同分型之间的炎性因子水平差异。结果IL-2含量随宫颈病变分级增加而逐渐降低(P<0.01);IL-6含量随宫颈病变分级增加而逐渐升高(P<0.01);其余6种细胞因子含量随宫颈病变分级增加无显著变化(P>0.05)。所有入组患者中以HPV16单独感染最常见(43.3%),其次为其他HR-HPV混合感染(39.4%),而包含HPV16型的混合感染最少见(17.3%)。3组HPV感染分型总体比较无统计学差异(P>0.05)。HPV亚型间8种细胞因子比较无显著差异(P>0.05)。结论老年女性HR-HPV感染后宫颈微环境中免疫炎性因子的变化更有利于肿瘤细胞生长,定期检测可以预测宫颈疾病的发展方向。

野鸡育雏期的饲养管理

野鸡的育雏期是指雏野鸡从出壳到脱温这段时间，一般为1日龄～30日龄，有些地区可长达42日龄。育雏期是饲养野鸡过程中最关键的环节。雏野鸡在1周龄内死亡率最高，许多品质低劣的种蛋孵出的雏野鸡多在这一时期死亡。所以，养殖户必须提供完全符合野鸡生长的良好生活环境和营养。

猪白细胞干扰素对猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染的治疗效果观察

目的：讨论猪白细胞干扰素对猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染的临床疗效,为日后的临床治疗提供参考.方法：选择某养殖场猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染病猪100头为研究对象,所有病猪均实施猪白细胞干扰素治疗,观察临床疗效.结果：经过一段时间的治疗后,100头猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染病猪的表现出现了显著的变化.临床统计后,显效52头,占52.0％;有效45头,占45.0％;无效3头,占3.0％.结论：通过对猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染实施猪白细胞干扰素治疗,能够较好的稳定病猪的情况,积极的实施治疗,可减少病死率,提高病猪的成活率,对饲养场的积极意义较大.建议在日后的临床治疗中,推广应用猪白细胞干扰素.

SPF级动物实验室的建设及管理要点之研究

对于实验动物而言,在医学以及药学中具有广泛的应用,同时在生命科学中也具有一定的研究,但在生物医学中具有重要的研究.近几年来,我国实验动物科学得到了较好的发展,医学实验更多的依赖于实验动物.SPF动物,主要是无特定病原的一种实验动物,能够将病原体排除,进而确保实验结果的精准性.在生命科学研究中成为一种主要的实验动物.

对引进美国SPF大约克种猪抗腹泻后代选育探讨

试验旨在对美国引进大约克种猪腹泻抗性有利基因检测，在种猪世代选育中加大GG纯合抗性个体的选留比例，建立抗K88（F4）腹泻专门化品系。选取引进美国SPF大约克纯种猪的后代137头，其中种母猪126头，种公猪11头，采耳组织样本送江西农业大学动物生物国家重点实验室培育基地检测抗腹泻基因。结果表明，大约克种猪腹泻抗性有利基因占16．79％（23／137），将检测过的种猪按试验组（GGxGG）、对照1组（GAxGG）、对照2组（AAxGG）、对照3组（GAxGA）、对照4组（AA~GA）、对照5组（AAxAA）等6个组合进行选配，在饲养条件相同的条件下，试验组（GGxGG）后代的腹泻率2．71％，腹泻死亡率0，30日龄断奶仔猪成活率为99．22％，上述3个指标与对照1～5组相比差异显著或极显著。

医学院校动物实验课程教学改革探索

文章针对已有部分实验动物操作基础的学生如何开展医学院校《实验动物学》实验课程教学改革进行了探讨,在教学实践中首先对学生已有的理论知识结构及动手能力进行分析,并结合毕业后从事职业的特殊性精简教学内容,理论联系实际,创新性地采用每种动物进行基本技能操作与应用相结合开展实验教学,不仅注重学生基本动手技能的培养,更注重加强培养学生运用所学知识开展科学研究的能力,并在此基础上引入《实验动物学》的新技术、新方法,拓宽学生的知识面,增加学生的学习兴趣,取得了良好的教学效果。

高校实验室的构成及建设管理

针对高校实验室建设中存在的重硬件、轻软件,重建设、轻管理的现象,特别是对实验室的内涵建设认识不够等问题,通过分析高校实验室的构成体系,提出实验室构成的基本思路,强调实验室内涵建设的重要性,并结合目前在实验室管理中所采用的新技术、新办法,加强实验室的建设及管理。

基于p38MAPK信号因子重组甲型流感病毒M1/2诱导气管上皮细胞产生γ干扰素的研究

目的探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1/2(rM1/2)诱导气管上皮细胞产生干扰素-γ的作用,以及基于p38MAPK信号因子的诱导作用机制。方法将小鼠原代气管上皮细胞分成6组,分别为M1组、M2组、病毒组、M1+病毒组、M2+病毒组、正常对照组。各组分别用相应制剂干预细胞4、8、24h,抑制试验中各实验组提前1h分别加入p38抑制剂,再进行相应制剂干预。提取细胞总RNA和总蛋白,分别采用RT-PCR和Western blot方法检测IFN-γmRNA和IFN-γ、p38MAPK、P-p38MAPK的表达。结果重组甲型流感病毒M1/2作用于小鼠气管上皮细胞,作用4h,8h,24h后的半定量RT-PCR和Western blot实验结果为rM1、rM2组诱导IFN-γmRNA表达量高于正常组,表示M1/2能诱导IFN-γ的产生。Western blot结果显示rM1、rM2组诱导P-p38MAPK表达量高于正常组,用p38MAPK抑制剂SB203580后,rM1联合病毒、rM2联合病毒组诱导P-p38MAPK表达量低于病毒组,且rM1联合病毒、rM2联合病毒组诱导IFN-γmRNA表达量低于病毒组,表示M1/2能诱导p38MAPK磷酸化。结论甲型流感病毒rM1/2能够在早期诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ;该作用与p38MAPK信号因子激活有关。

人硫氧还蛋白1在大肠杆菌中的重组表达及其对高糖导致的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的克隆人硫氧还蛋白1(h TRX1)基因并构建其原核表达载体,获得重组人硫氧还蛋白1(rh TRX1),评价rh TRX1对高糖导致的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法采用逆转录PCR方法扩增h TRX1基因片段,插入p ET22b(+)质粒并转化大肠杆菌Rosetta-gami(2),获得工程菌Rosetta-gami(2)-p ET22ab(+)/h TRX1。用SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定重组蛋白的正确性,用镍亲和层析纯化重组蛋白。采用高糖制备HUVEC损伤模型,MTT比色法检测HUVEC的存活率,生化方法测定HUVEC中乳酸脱氢酶(LDH)的外漏率以及细胞上清液中一氧化氮(NO)的水平。结果构建的工程菌及其产生的重组蛋白rh TRX1正确。与正常对照组比较,高糖损伤组HUVEC的存活率降低、LDH外漏率明显升高,NO的水平明显地降低。不同剂量rh TRX1处理组HUVEC的存活率升高、LDH的外漏率明显降低,NO的水平明显地升高。结论成功克隆并在大肠杆菌中表达rh TRX1、获得结构正确的rh TRX1,rh TRX1对高糖诱导的HUVEC损伤具有保护作用。

重组小鼠β防御素3体内抗甲型流感病毒H1N1作用

目的观察重组小鼠β防御素3(r MBD3)对甲型流感病毒感染小鼠的保护作用。方法以10 mg·kg-1·d-1r MBD3腹腔注射3月,观察小鼠的一般状态,以及对主要脏器的影响。BALB/c小鼠,♀,分为正常对照组、模型对照组、r MBD3高剂量组(10 mg·kg-1·d-1)、r MBD3低剂量组(5 mg·kg-1·d-1)和利巴韦林组(100 mg·kg-1·d-1)。采用流感病毒液滴鼻感染建立甲型流感病毒H1N1感染小鼠模型,感染病毒12 h后分别腹腔注射给药。每日观察小鼠一般情况和死亡情况。于攻毒第3天检测肺泡灌洗液流感病毒滴度、血清γ干扰素含量、肺指数和肺组织病理变化。结果小鼠腹腔注射10 mg·kg-1·d-1r MBD3 3月,未发现明显异常反应或死亡,各重要脏器的未见明显病理改变。r MBD3各剂量组肺泡灌洗液中的病毒滴度、肺指数抑制率均降低,肺组织病理改变减少。结论 r MBD3对小鼠无明显毒性作用,在体内具有抗流感病毒、保护流感小鼠的活性。

重组甲型流感病毒基质蛋白1和2通过ERK信号因子诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ

探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1和2(rM1和rM2)通过细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)诱导小鼠气管上皮细胞产生γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用及机制。以原代小鼠气管上皮细胞为实验模型,实验分为6组(rM1组、rM2组、甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)组、rM1+IAV组、rM2+IAV组和正常对照组)。在各组分干预细胞4h、8h、24h时,采用半定量RT-PCR法检测各组细胞中IFN-γmRNA的表达和免疫印迹法检测各组细胞中IFN-γ、ERK、磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)蛋白的表达;用抑制剂阻断ERK信号因子信号传导,观察对各组分诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ的影响。各组分干预细胞4h、8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于正常对照组(P<0.01或P<0.05);rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于IAV组(P<0.01或P<0.05)。在干预细胞4h,仅rM2组细胞中ERK磷酸化水平显著高于正常对照组(P<0.01),在干预细胞8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞中ERK磷酸化水平均显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05)。加入ERK抑制剂,rM1组、rM2组、rM1+IAV组、rM2+IAV组细胞的IFN-γmRNA和IFN-γ蛋白表达水平显著低于非抑制剂组。本研究数据表明rM1和rM2可通过上调ERK信号因子的磷酸化水平诱导小鼠气管上皮细胞中产生IFN-γ,该诱导作用在干预4h即显著表现,并维持至少24h。

实验动物学实验课程教学改革初探

实验动物学是生命科学、医学创新研究的重要组成部分和可持续发展的重要支撑平台,在推动生命科学、医学等诸多学科发展方面发挥了巨大作用。本文结合实践经验,通过优化整合实验内容、实践动物福利理念的培养、构建"互联网+教育"背景下的线上与线下相结合的教学模式、"翻转课堂"、利用形成性评价科学考核学生等多个方面,对实验动物学实验教学进行教学改革与探索,进而提高学生的学习兴趣,提升教学效果。