人鼻咽癌细胞株中类肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定

目的检测CD133在人鼻咽癌细胞株SUNE中的表达以及CD133+肿瘤细胞的体外增殖、分化情况,并对其进行类肿瘤干细胞的鉴定。方法采用免疫荧光细胞化学技术及流式细胞仪检测鼻咽癌细胞株SUNE中CD133的表达情况以及CD133+细胞体外分化能力;免疫磁珠分选技术纯化CD133+肿瘤细胞;MTT法检测CD133+细胞的体外增殖能力,并将其与CD133-及未分选细胞进行比较。结果鼻咽癌细胞株SUNE中有0.35%的微量细胞呈CD133+表达;免疫磁珠富集的CD133+肿瘤细胞在无血清培养基中悬浮生长,并可以形成肿瘤细胞球,具有很强的自我更新和繁殖能力,且在3、5、7 d的紫外吸光度(A)值分别为0.317±0.007、0.370±0.002、0.558±0.004,均高于相同条件下未分选细胞和CD133-细胞(P<0.05);CD133+细胞在含血清培养基中的比例逐日下降,至培养的第12天,由第1天的89.67%下降至0.37%。结论CD133可作为鼻咽癌类干细胞的标志之一。鼻咽癌细胞株SUNE中存在类肿瘤干细胞,并具有自我更新和分化能力。

hTERT启动子调控TK基因靶向性杀伤鼻咽癌移植瘤的实验研究

目的研究人端粒酶反转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-TK/GCV)系统对鼻咽癌移植瘤的体内杀伤作用。方法采用培养细胞移植法,将人鼻咽癌细胞系C666-1接种于裸鼠腋部皮下,建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型。将40只裸鼠随机分为5组:hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组、CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组、HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组,每组8只。采用脂质体介导,进行瘤内直接注射,同时经腹腔给予GCV治疗,观察各组裸鼠生存状况及肿瘤相对体积、抑瘤率,并进行荷瘤裸鼠肝肾组织的常规病理检查。结果成功构建了C666-1裸鼠皮下移植瘤动物模型,hTERTp/HSV-TK/PGL3/GCV组移植瘤被明显抑制,抑瘤率达到45.51%,与HSV-TK/PGL3/GCV组、GCV组及生理盐水组(抑瘤率分别为5.52%、14.31%、0.03%)比较有显著性差异(P<0.01),肝肾病理检查发现,该组裸鼠肝肾均无明显病理学变化。CMV/HSV-TK/PGL3/GCV组的抑瘤率亦达到51.56%,但病理检查发现裸鼠出现肝肾毒性。结论hTERT启动子调控TK基因靶向治疗系统能够在体内特异性杀伤鼻咽癌移植瘤,而无明显全身毒副作用,是一种安全、有效的肿瘤靶向基因治疗系统,将为鼻咽癌临床基因治疗开辟新领域。

基于风险理论的预防控制与紧急控制的协调优化

电力系统的静态安全是关系着系统安全运行的重要问题。针对线路过载和低电压2个子问题进行了探讨,提出了一种预防控制与紧急控制的协调优化模型。此模型基于风险理论,考虑了事故发生的概率和事故后果的严重程度,充分利用预防控制与紧急控制的互补性,结合了灵敏度的概念,及反相等量配对调整原则,通过粒子群优化算法,得到合理的协调化策略,确保系统的安全性和经济性。通过IEEE30节点系统仿真,证明了此方法的有效性。

hTERTp/TK/pGL3靶向抑制端粒酶活性及其对鼻咽癌干细胞的杀伤作用

目的:探讨hTERTp/TK/pGL3载体靶向抑制端粒酶活性及其杀灭鼻咽癌CD133+干细胞的作用机制。方法:将已构建的hTERTp/TK/pGL3载体及其对照处理因素(CMV/TK/pGL3和TK/pGL3载体)转染至鼻咽癌CD133+干细胞、CD133-肿瘤细胞、人脐静脉内皮细胞(ECV)(对照组)和鼻咽癌SUNE未分选细胞中,采用Stretch PCR法检测4种细胞端粒酶活性改变。MTT法测定CD133+干细胞和ECV细胞存活率。结果:CD133+鼻咽癌干细胞体外培养7d后细胞逐渐增多,CD133+鼻咽癌干细胞体内成瘤实验阳性。CD133+鼻咽癌干细胞转染hTERTp/TK/pGL3或CMV/TK/pGL3后端粒酶活性降低;而ECV细胞端粒酶为阴性表达;CD133+鼻咽癌干细胞分别转染TK/pGL3、CMV/TK/pGL3和hTERTp/TK/pGL3后细胞存活率平均为(87.4±0.4)%、(20.5±0.4)%和(27.9±0.2)%,ECV对照细胞组转染TK/pGL3、CMV/TK/pGL3和hTERTp/TK/pGL3后细胞存活率平均为(90.7±0.1)%、(18.1±0.2)%和(86.2±0.1)%,hTERTp/TK/pGL3杀灭鼻咽癌CD133+干细胞效率明显高于ECV细胞组(P<0.01)。结论:hTERTp/TK/pGL3载体可以通过下调端粒酶活性靶向抑制端粒酶阳性的鼻咽癌CD133+干细胞。

动量自适应学习速率梯度下降法神经网络电力负荷预测

电力系统负荷预测的精度将直接影响电力系统的经济效益和用电的安全和稳定,是电力负荷预测的重要组成部分。利用人工神经网络可以任意逼近非线性系统的特性,将其用于短期负荷预测。在标准的BP网络中加入了动量项和自适应学习速率,预测结果表明比标准BP算法具有更好的性能。在相同的情况下,连续预测六天的负荷和一年的负荷,结果都证明了研究方法具有一定的实用性。

靶向增强型TK表达载体在鼻咽癌细胞中的作用研究

目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控机制的增强型表达载体pGL3-bas-ic-EGFP-TK-hTERTp-CMV enhancer在鼻咽癌细胞中的靶向杀伤效应。方法构建靶向性增强型hTERT启动子及CMV增强子双调控TK表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer,并以单启动子载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp作为对照组,分别转染端粒酶阳性的人鼻咽癌细胞株5-8F、人乳腺癌细胞MCF-7(阳性对照)及正常人血管内皮细胞ECV(阴性对照)。荧光显微镜下观察其TK基因绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中TK基因mRNA定量表达差异,Stretch PCR法检测肿瘤细胞端粒酶活性,MTT法分析杀灭鼻咽癌细胞的效果等作为检验指标。结果①该增强型表达载体转染5-8F细胞及MCF-7细胞后的绿色荧光表达及TK基因的mRNA表达均强于单启动子pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp组;而ECV细胞只有极微弱的绿色荧光和极弱的TK基因的mRNA表达。实时荧光定量PCR显示,增强型载体组A值较对照组单启动子组明显增高,是单启动子组的2～5倍。StretchPCR法检测转染前后5-8F细胞端粒酶活性明显被抑制。②加入GCV后增强载体组对鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞体外增殖均有明显抑制作用,均高于单启动子载体组、不加GCV的增强型载体组、空载体组及空白对照组。结论以hTERT启动子及CMV增强子双调控机制介导TK基因的新型靶向增强型表达载体能够高效靶向性杀灭鼻咽癌细胞,这种新型高效靶向增强型载体有可能成为一种针对包括鼻咽癌在内的具有较为广泛抗癌谱的恶性肿瘤临床靶向基因治疗的新策略。

《五礼通考》征引《宋史》考异

《五礼通考》是中国古代礼学的集大成之作,从文献学角度来讲,有着极其重要的考证校勘价值。《五礼通考》所征引《宋史》与中华本《宋史》存在诸多差异,今举例说明《五礼通考》引文之考校价值及其讹误之处。

耳内镜视频下中耳检查与鼓室成形术的疗效观察

目的探讨耳内镜应用于中耳检查及鼓室成形术的优越性及临床效果。方法采用美国Stryker产长11 mm直径1.9 mm角度0°、30°、70°耳内镜及配套视频系统,在视频图像下先检查外耳、中耳、咽鼓管情况,采用外植法、内置法、咽鼓管内置管法完成鼓室成形手术,分析疗效、术耳听力恢复及不良反应发生情况。结果本组145耳通过检查均符合单纯型鼓室成形术适应证,手术过程中耳内镜术野清晰,清除病灶及分离残留鼓膜上皮更彻底,手术成功率达97.2%,术后听力较术前提高15～30 dB,无不良反应发生。结论耳内镜能在术前、术中清楚观察外耳、中耳、咽鼓管情况,术中可彻底清除病变组织,可以一期完成鼓室成形手术,与传统灯光显微镜下手术相比,管径小、多角度、物像清晰度高、操作简单方便、创伤少、时间短、手术成功率高、听力改善疗效更可靠等优点。

疏风解毒胶囊治疗慢性化脓性中耳炎活动期临床研究

目的:探讨疏风解毒胶囊治疗慢性化脓性中耳炎活动期的临床疗效及安全性。方法:将110例136耳慢性化脓性中耳炎活动期患者按就诊时间随机分为治疗组和对照组,其中对照组55例(63耳),治疗组55例(73耳)。对照组给予头孢类抗生素口服、过氧化氢溶液清洗耳道及中耳腔,治疗组在对照组基础上加用疏风解毒胶囊治疗,疗程均为10d。观察患者临床症状体征恢复情况,检查治疗前后病原菌变化,评估治疗效果,记录不良反应发生情况。结果:治疗组病菌清除率为89.6%,对照组病菌清除率为71.4%,2组差异比较有统计学意义(P<0.05);治疗组有效率达89.1%,明显高于对照组的74.5%,治疗组优于对照组(P<0.05);2组均未出现明显的不良反应。结论:疏风解毒胶囊联合抗感染等治疗能更有效的清除患耳病原菌,提高临床治疗效果。

hTERT及CMV双调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的实验研究

目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控表达载体调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的效应。方法将双调控增强型载体及hTERT单启动子载体(作为对照组)分别转染两种端粒酶(+)的人鼻咽癌5-8F细胞及对照组人乳腺癌MCF-7细胞及端粒酶(-)的正常人血管内皮ECV细胞,StretchPCR法验证5-8F细胞、MCF-7细胞及ECV细胞中端粒酶活性,荧光显微镜下观察TK基因绿色荧光蛋白表达差异,MTT法分析杀灭鼻咽癌细胞的效果。结果①Stretch PCR法验证人鼻咽癌细胞5-8F、人乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性呈阳性,人血管内皮ECV细胞端粒酶活性呈阴性。②增强型表达载体转染上述两种端粒酶(+)肿瘤细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,单启动子亦有较强的荧光表达,但比增强型表达载体要弱,而ECV细胞几乎无绿色荧光。③加入GCV后,增强型表达载体对两种端粒酶(+)肿瘤细胞体外增殖均有明显抑制作用,且均高于单启动子组、空载体组及空白对照组,而增强型表达载体转染ECV细胞体外增殖无明显抑制作用。结论以hTERT启动子及CMV增强子双调控TK基因的表达载体能够靶向杀灭鼻咽癌细胞,且作用明显强于单启动子载体组。这种新型高效、靶向增强型载体有可能成为一种鼻咽癌临床靶向基因治疗的新策略。

基于个体数据的新原型制版方法研究

对比例法、原型法、基型法、立裁法、剥样的服装制版方法进行了对比,研究发现其中比例法和原型法在服装整体吻合度、胸部、体侧、背部的合体性方面还存在不足。为了提高服装制版的合体性,结合原型法基于单个人体主要部位数据提出了"一级原型—二级原型—三级原型—样衣制作—生产成衣"新原型制版方法。通过样衣试验,专家对各样衣静态着装合体效果进行打分,试穿者对样衣的动态穿着舒适性进行打分并对新原型制版进行验证,同时利用模糊多层次分析法对试验结果进行了分析,得出新原型制版方法能有效提高服装的合体性。

下肢残疾者裤装结构设计研究

从下肢残疾者对裤装审美、功能和款式3方面需求设计出3种裤装款式,通过对3种款式外观、紧固件、合体程度、松紧程度等方面的评价优选出评分最高的裤装进行样衣制作。根据裤装样衣的宽松度、审美感、功能性、款式的评价,总结改进下肢残疾者裤装结构。结果表明,对裤装的结构形式、紧固件的选择、合体度的设计和面料性能的选择进行改进,既满足下肢残疾者对功能性的需求,同时也满足了美观性需求。

手术联合克拉霉素、曲安奈德治疗慢性鼻-鼻窦炎的效果

目的探讨手术联合克拉霉素、曲安奈德治疗慢性鼻-鼻窦炎的效果。方法以我院2016年4月至2018年4月收治的96例慢性鼻-鼻窦炎患者为研究对象,随机分为两组各48例。对照组采用鼻内镜手术治疗,干预组采用鼻内镜手术联合克拉霉素、曲安奈德治疗,比较两组的临床疗效。结果干预组的术中出血量、鼻黏膜修复时间、鼻腔通气时间、住院时间均显著低于对照组(P <0.05);干预组的总有效率97.92%,显著高于对照组的83.33%(P <0.05)。结论手术联合克拉霉素、曲安奈德治疗慢性鼻-鼻窦炎具有良好的临床疗效,能在保证手术疗效的同时,有效降低手术对患者造成的创伤,改善患者预后。

抢救文化遗产 深山绽放奇葩——湖北省十堰市成功举办首届地方戏曲调演

为2010年10月在十堰市举办的第四届世界传统武术节提前预热并营造良好氛围，全面挖掘、传承和繁荣十堰市优秀地域文化，9月8日，由中共十堰市市委宣传部主办，十堰市文化体育局承办的十堰市首届地方戏曲调演在十堰市艺术剧院举行。原湖北省省委副书记、湖北省政协主席，现全国政协提案委员会副主任王生铁，著名剧作家、湖北省文联主席沈虹光等领导专家观看了调演剧目，并参加了十堰市地方文化保护与发展座谈会。

智能服装中纺织电极对心电监测信号的影响

针对纺织电极传感器与人体相互作用对信号质量产生影响的问题,文中从电极-皮肤接触面、电极-人体压力、电极-皮肤滑移3个方面,对相关参数进行研究,设置参数变化区间,进行心电监测试验,通过分析所得心电图对监测效果进行评价。研究表明,4.00 cm×4.00 cm的椭圆纺织电极是监测效果最好的接触面规格;电极-人体压强在0.50~3.50 kPa区间时,可获得质量良好的心电信号;电极-皮肤滑移在0~2.00 cm范围时,可获得准确清晰的心电信号。从提高心电源信号质量的角度,对纺织电极在心电监测中的性能进行更广泛的研究,为心电监测提供更充分的数据参考。

增强型胸苷激酶基因表达载体的构建及其杀伤鼻咽癌细胞的实验研究

目的 探讨改良构建人端粒酶催化亚单位（human telomerase catalytic subunit promoter,hTERT）启动子及巨细胞病毒原核（cytomegalovirus,CMV）增强子联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（thymidine kinase,TK）的增强型表达载体在鼻咽癌细胞体内外实验中的靶向杀伤效应及体内应用的安全性评价.方法 以pGL3-basic空载体为模板,分别酶切连接hTERT启动子、CMV增强子及TK基因构建靶向性增强型表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTERTp-CMV（以hTERT单启动子调控TK基因表达载体作为对照组）,转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞及用做对照组的人乳腺癌MCF-7细胞和端粒酶阴性的正常人脐静脉内皮细胞ECV-304,分别采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达差异、实时荧光定量PCR检测转染后TK基因mRNA表达差异、TeloChaser法检测上述细胞中的端粒酶活性、四甲基偶氮唑蓝（MTt）联合Boyden小室实验分析增强型载体对鼻咽癌细胞增殖及侵袭抑制的作用.将鼻咽癌细胞接种于裸鼠腋部皮下,构建裸鼠鼻咽癌移植瘤模型,研究增强型载体对裸鼠移植瘤的体内生长抑制作用及对全身的毒副反应情况.结果 ①成功改良构建hTERT/CMV双调控TK基因的增强型表达载体.②转染增强型载体组及单启动子载体组的鼻咽癌5-8F细胞均有绿色荧光表达,但前者荧光数量及强度均较后者强,对照组端粒酶阳性的乳腺癌细胞也有很强的荧光表达,而ECV-304细胞几乎无绿色荧光表达.实时荧光定量PCR结果显示,增强型载体组的TK基因mRNA表达量是单启动子组的2-5倍.③ TeloChaser法结果显示,两种肿瘤细胞（5-8F细胞、MCF-7细胞）端粒酶活性均为阳性,正常对照ECV-304细胞端粒酶活性为阴性.④MTT联合Boyden小室侵袭实验结果显示,增强型表达载体对5-8F细胞体外增殖及侵袭力均有明显抑制作用.相对细胞存活率为37.0%,较对照组明显低（P〈0.01）.⑤体内实验结果显示,增强型靶向表达载体对裸鼠鼻咽癌移植瘤生长具有明显抑制作用,抑瘤率达56.3%,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,而裸鼠肝肾病理检查未发现明显损害.结论 以hTERT/CMV双调控机制介导TK基因的增强型表达载体能够高效、靶向杀伤鼻咽癌细胞及移植瘤,实验动物体内应用无明显毒副作用.

鼻咽癌细胞中增强型表达载体调控TK基因与端粒酶活性关系的研究

目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因核心启动子和原核增强子CMV联合调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦系统对TK基因的活性改变及与鼻咽癌细胞中端粒酶活性的关系。方法:将改良构建后的增强型载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer及单启动子载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp(作为对照组)分别转染端粒酶阳性的人鼻咽癌5-8F细胞株及对照组细胞人乳腺癌MCF-7细胞(端粒酶阳性)及正常人血管内皮ECV细胞(端粒酶阴性),采用荧光显微镜下观察其TK基因绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中TK基因mRNA定量表达差异,TRAP银染法检测肿瘤细胞转染前后端粒酶活性改变并分析TK基因表达与端粒酶活性之间的关系。结果:①增强型表达载体转染鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,比单启动子pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及ECV细胞绿色荧光要强。实时荧光定量PCR显示,增强型载体组A值亦较对照组明显增高。②转染增强型载体(加GCV)后TRAP银染法检测鼻咽癌5-8F细胞端粒酶活性较转染前明显降低,但转染正常对照细胞后活性无变化。③加入GCV后,pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer对鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞体外增殖均有明显抑制作用,高于单启动子组pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp及空载体组pGL3-basic-EG-FP3及空白对照组,而pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer转染ECV细胞无明显抑制作用。结论:hTERT启动子及CMV增强子可明显增强TK基因活性,并可导致该种肿瘤细胞端粒酶活性降低,靶向杀灭该种肿瘤细胞,但这种由TK基因介导的端粒酶活性抑制机制尚不清楚。

饮食与运动干预对高血压的影响

本文旨在探讨饮食与运动干预在高血压管理中的前沿研究。高血压作为全球范围内心血管疾病的主要风险因素之一,饮食与运动的干预策略日益受到重视。本文分析了蒙医传统医学在高血压干预中的价值,并结合现代医学视角,探讨了蒙医饮食与现代膳食的融合,以及蒙医运动方法在高血压管理中的应用。还探讨了生物标志物在评估干预效果中的应用以及基因与干预响应的关系。强调了综合膳食与运动干预的协同作用,以及个体化干预的前景,为未来高血压管理提供了新的思路和方向。

多导联心电监护服的研究现状及发展趋势

心电监护服是老龄化社会的必需品,为了达到穿着舒适且心电监测数据精确的目的,多导联心电监护服成为心电监护服的发展趋势。介绍了心电信号监测原理及动态心电图,综述了多导联医疗系统的导联体系与导联选择、心电电极与最佳电极位置的研究现状,并分析了医学导联及家庭常用导联。对现有心电监护服的电极数、导联数及服装设计进行了总结并发现存在的问题,最后展望了发展前景。

欧压法治疗鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎临床观察

目的鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎是耳科临床上最常见的并发症,易导致耳闷胀痛、耳鸣、听力下降、头昏头痛,症状易反复,严重者影响正常生活质量,目前治疗方法较多,临床疗效欠佳,为了更有效更好地治疗分泌性中耳炎,总结选用最有效的治疗方法。方法近5年来对123例鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎患者选用鼓膜穿刺欧压法鼓室中耳加压给药治疗,其中男性87例、女性36例;双耳105例、单耳18例;欧压法外加压使药物将鼓室及乳突气房咽鼓管内分泌物置换冲冼出来,特别是粘稠胶冻样分泌物。结果患者自觉症状消失,听力提高,经5～15次治疗后鼓室穿刺抽吸无渗出液,穿刺点愈合。查电测听气骨导在20～30 dB内,声阻抗为A型曲线图,临床观察3～6个月无复发者为痊愈。结论通过欧压法外加压使药物将鼓室及乳突气房咽鼓管内分泌置换清除干净,并使药物直接作用于鼓室及乳突气房咽鼓管病变黏膜上皮组织使其恢复正常生理功能。