氯霉素残留一步式化学发光酶免疫法的建立

【目的】建立一种简便、快速、精确的氯霉素(CAP)残留检测方法。【方法】在常规两步式化学发光酶免疫法(CLEIA)的基础上,同时加入一抗和二抗,并进一步优化抗原包被条件、抗体工作浓度、竞争反应时间等试验参数,建立了检测CAP残留的一步式CLEIA。【结果】该方法最佳检测范围为0.045～128μg/L,检测灵敏度达3.16μg/L,最低检测限为0.01μg/L,可检出国际规定的CAP残留标准底限值以下的残留量。与常规两步法相比,在不影响检测限和灵敏度的前提下,可缩短反应时间1.5h。【结论】采用一步式CLEIA检测CAP残留,与常规两步式CLEIA的检测效果相近,且耗时短,更符合快速检测的要求。

马尾藻多糖对南美白对虾免疫调节作用

[目的]研究马尾藻多糖对南美白对虾免疫功能的影响。[方法]用含不同比例(0、0.10%、0.15%和0.20%)马尾藻多糖的虾饲料喂养对虾14 d,测定虾血淋巴液中溶菌酶、超氧化物歧化酶、酚氧化物酶和酸性磷酸酶的活性,计算攻毒感染后不同处理对虾存活率。[结果]含马尾藻多糖0.20%的虾饲料能极显著提高溶菌酶和酚氧化物酶活性,显著提高超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶活性和攻毒虾存活率,溶菌酶和酚氧化物酶含量分别达到(0.209±0.076)(、258.800±203.080)U/ml;含马尾藻多糖0.15%的虾饲料能极显著提高酚氧化物酶和超氧化物歧化酶活性,显著提高溶菌酶活性和攻毒虾存活率,酚氧化物酶和超氧化物歧化酶含量分别达到(321.267±218.406)和(0.453±0.190)U/ml。[结论]马尾藻多糖能显著增强南美白对虾的免疫功能,其加入量为0.20%时效果最好。

马尾藻多糖对小鼠免疫功能调节作用的研究

试验旨在观察马尾藻多糖(SP)对小鼠免疫调节的影响。用地塞米松作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,测定了小鼠胸腺指数和脾脏指数,血浆中溶菌酶含量和酸性磷酸酶(ACP)活力,胸腺和脾脏匀浆中总超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮水平(NO)和丙二醛(MDA)含量。结果表明,马尾藻多糖能显著提高正常小鼠和免疫抑制小鼠的胸腺指数、血浆中溶菌酶含量、ACP活力和胸腺及脾脏中NO含量;显著提高免疫抑制小鼠脾脏CAT活力;增强正常小鼠脾脏总SOD活力;显著降低正常小鼠脾脏匀浆MDA含量;显著降低免疫抑制小鼠胸腺和脾脏匀浆中XOD活力。因此,马尾藻多糖能显著增强小鼠的免疫功能。

中药“金花液”防治鸡传染性支气管炎对鸡血液生化指标的影响

[目的]为了研究中药"金花液"防治鸡传染性支气管炎对鸡血液生化指标的影响。[方法]选择20日龄的三黄鸡80只,随机分为5组。健康对照组不攻毒不给药,其余4组接种IBV-M41病毒。0.5%浓度预防组从攻毒前3 d开始给药连续8 d;3%高剂量和1%低剂量治疗组从临床症状开始时给药,连续5 d;阳性对照组不给药,攻毒后7 d检测血液生化指标。[结果]结果表明:阳性对照组的AST、ALP、R-GT在0.01水平上极显著高于健康组和其他预防治疗组;ALT、HBDB、D-BIL与其他各组差异显著;阳性对照组的BUN、UA差异达0.01极显著水平,CRE在0.05水平上显著高于健康组和其他预防治疗组;预防组血清中的TP和ALB在0.01水平上极显著高于阳性对照组,IgG在0.05水平上显著高于健康组。[结论]"金花液"对肝功能有显著保护作用;对肾功能有显著保护作用;能提高肌体的免疫力,有效预防传染性支气管炎病的发生。

苦木生物碱提取及其复方注射液的安全性研究

【目的】筛选出苦木中生物碱的最佳提取方法及研究复方苦木注射液的安全性,为优化苦木生物碱有效成分的提取工艺及开发出能有效治疗畜禽大肠杆菌病的复方中药注射液奠定基础。【方法】采用高效液相色谱法对乙醇回流提取法、乙醇渗漉提取法和酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木生物碱进行含量测定并比较,同时对昆明小鼠进行口服和腹腔注射复方苦木注射液的急性毒性试验,测定半数致死量(LD5)0。【结果】酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木总生物碱、苦木碱己和苦木碱丁含量分别为3.10±0.22、0.30±0.06和0.05±0.01mg/mL,均极显著高于乙醇回流提取法和乙醇渗漉提取法(P<0.01)。昆明小鼠口服复方苦木注射液的给药剂量为10000mg/kg时,小鼠仍健康存活;腹腔注射给药的LD50=2336mg/kg,安全性评价为基本无毒物质。【结论】酶解—乙醇渗漉可作为复方苦木注射液中苦木生物碱的规模化提取方法,复方苦木注射液具有毒性小、无传染、无残留、无耐药性等优点,可在畜禽业中代替抗生素对大肠杆菌等细菌性传染病进行防治。

不同提取方法对马尾藻多糖含量的影响

[目的]比较不同提取方法对马尾藻多糖提取效果的影响。[方法]分别采用水提醇沉、梯度醇提和101果汁澄清剂提取马尾藻多糖,经纯化后用苯酚-硫酸法测定提取液中有效成分多糖含量。[结果]101果汁澄清剂法提取的马尾藻多糖含量和纯度均优于其他2种方法,精制马尾藻多糖的含量为6.55%,红外光谱确认为较纯的多糖结构。[结论]101果汁澄清剂法提取马尾藻多糖的方法为最优,稳定且可行性高。

用紫外分光光度法测定痢速宁注射液中甲氧苄氨嘧啶的含量

为了准确测定痢速宁注射液中抗菌增效剂甲氧苄氨嘧啶 (TMP)的含量 ,笔者试验以氯仿为溶剂 ,提取TMP ,同时分离除去干扰组分 ,然后采用紫外分光光度法测定TMP的含量。结果表明 ,TMP平均回收率 98 3 4 %(n =5) ,变异系数为0 45%。

右旋糖酐铁合成工艺改进试验

研究了提高右旋糖酐铁合成收率的工艺条件 ,就络合过程体系 pH值的控制、三氯化铁的浓度对合成收率的影响进行了探讨。

苏云金杆菌杀虫剂试产报告

苏云金杆菌(简称Bt)杀虫剂是目前世界上产量最大的微生物杀虫剂。它对水稻,蔬菜、果树、茶叶、林木等农林植物的鳞翅目昆虫有很强的毒杀力。长期大量使用化学农药,农产品中易残留化学农药,且对环境造成污染。而Bt相对于化学农药来说,它具有对人体健康无损,对生态环境无害。

抗人红细胞单链抗体与猪瘟E2蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测

为构建具有凝集性、免疫反应性的双功能融合蛋白,本研究采用重叠延伸PCR方法将2E8ScFv(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和mE2(猪瘟病毒E2蛋白主要抗原编码区基因)拼接成融合基因2E8mE2,并插入原核表达载体pET-DsbA,将重组表达质粒pET-DsbA-2E8mE2转化入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)PlysS中进行IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定,结果表明:2E8mE2融合基因在大肠杆菌中获得了表达,表达产物以包涵体形式存在,分子量约为65kDa,与预期的大小一致。分别采用亲和层析法和谷胱甘肽再氧化法对融合蛋白进行纯化和复性,红细胞凝集试验证实:2E8mE2融合蛋白复性效果良好,既能够与人红细胞结合,又能够与猪瘟病毒抗体反应,具有双功能特性。