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济南市腹泻患者沙门氏菌PFGE分子分型及耐药特征研究 被引量:13
1
作者 李娜 刘辉 +6 位作者 李健 刘铭 姜慧钰 陈潇 关恒云 刘岚铮 张京云 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期893-897,902,共6页
目的对2017-2020年济南市哨点医院腹泻患者中分离到的沙门氏菌进行病原学分析,了解济南市腹泻患者沙门氏菌的血清型分布特征、分子分型特征及耐药情况。方法分别利用血清检测试剂盒和脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对来自济南市各医院腹泻门... 目的对2017-2020年济南市哨点医院腹泻患者中分离到的沙门氏菌进行病原学分析,了解济南市腹泻患者沙门氏菌的血清型分布特征、分子分型特征及耐药情况。方法分别利用血清检测试剂盒和脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对来自济南市各医院腹泻门诊病人的的90株沙门氏菌进行血清分型和分子分型分析,酶切电泳图谱导入BioNumerics软件进行聚类分析;利用微量肉汤稀释法对40株沙门氏菌进行耐药性检测。结果90株沙门氏菌可分为27个血清型,鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为优势血清型,分别占总数的47.78%和17.78%。PFGE电泳后产生的带型具有多态性,以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的带型最为集中;药敏结果显示,沙门氏菌对氨苄西林耐药率最高,为72.50%,多重耐药率达67.50%。结论济南地区沙门氏菌具有血清型多样化和遗传多样性特征,对抗生素的高耐药和多重耐药现象严重,应加强济南地区耐药检测。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PFGE 药敏
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miRNA let-7a1真核表达载体的构建及对肺癌细胞增殖的影响 被引量:3
2
作者 张菊 关恒云 +5 位作者 张鹏举 陈蔚文 刘闻闻 赵健 胡晓燕 姜安丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1495-1500,共6页
目的:构建miRNA let-7a1真核表达载体,研究其在肺癌A549细胞株的表达及对A549细胞增殖的影响。方法:以人肺癌细胞A549的总RNA为模板,RT-PCR扩增miRNApre-let-7a1基因序列,将miRNApre-let-7a1基因克隆到真核表达载体pSilencerTM4.1-CMVne... 目的:构建miRNA let-7a1真核表达载体,研究其在肺癌A549细胞株的表达及对A549细胞增殖的影响。方法:以人肺癌细胞A549的总RNA为模板,RT-PCR扩增miRNApre-let-7a1基因序列,将miRNApre-let-7a1基因克隆到真核表达载体pSilencerTM4.1-CMVneo中,构建成pSilencerTM4.1-let-7a1重组体。将pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体瞬时转染肺癌A549细胞,RT-PCR法检测miRNAlet-7a1在转录水平的表达。根据miRBaseTargets数据库,查hsa-let-7a1靶序列,构建let-7a1靶序列-报道基因融合质粒pMIR-report-let-7a1T,与pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体共转染A549细胞,通过荧光素酶活性检测pSilencerTM4.1-let-7a1质粒对其靶序列的作用。MTT法检测pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,对细胞增殖的影响。结果:pSilencerTM4.1-let-7a1真核表达栽体和let-7a1靶序列-报道基因融合质粒经酶切及测序鉴定正确。pSilen-cerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,经RT-PCR证明能有效表达miRNAlet-7a1。pSilencerTM4.1-let-7a1质粒和pMIR-report-let-7a1T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测,相对荧光素酶活性明显降低,表明pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,可表达let-7a1并具有生物学活性。MTT检测结果显示:pSilencerTM4.1-let-7a1转染后的A549活细胞数目明显减少。结论:成功构建了真核表达载体pSilencerTM4.1-let-7a1,转染肺腺癌A549细胞后能有效表达,miRNAlet-7a1基因过表达抑制A549细胞的增殖。 展开更多
关键词 MIRNA let-7a1 真核表达载体 A549细胞 细胞增殖 基因表达
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前列腺特异的转录因子NKX3.1上调Dicer1基因的表达 被引量:1
3
作者 张菊 关恒云 +7 位作者 张鹏举 陈蔚文 陈兆波 倪娜娜 朱闻捷 王坤 胡小燕 姜安丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1764-1768,共5页
目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱... 目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响。进一步应用RT-PCR、Western blot-ting进行验证。为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用。结果:基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞。RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞。microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞。结论:NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用。 展开更多
关键词 同源盒基因NKX3.1 PC3细胞 基因 Dicer1
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间日疟原虫传播阻断疫苗新型候选抗原Pvs48T.B细胞表位的预测与分析
4
作者 李娜 刘铭 +3 位作者 刘岚铮 白爱英 关恒云 刘辉 《智慧健康》 2021年第2期26-28,共3页
目的预测与分析间日疟原虫传播阻断疫苗新型候选抗原Pvs48的T.B细胞表位。方法运用SYFPEITHTI在线预测Pvs48的T细胞抗原表位,然后再利用表位数据库(IEDB)从抗原性、表面易接近性、柔韧性、亲水性、β转角5个方面在线预测Pvs48的B细胞线... 目的预测与分析间日疟原虫传播阻断疫苗新型候选抗原Pvs48的T.B细胞表位。方法运用SYFPEITHTI在线预测Pvs48的T细胞抗原表位,然后再利用表位数据库(IEDB)从抗原性、表面易接近性、柔韧性、亲水性、β转角5个方面在线预测Pvs48的B细胞线性抗原表位。结果成功预测了Pvs48中的6个B细胞表位肽、7个细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位及7个辅助性T细胞(Th)表位。结论预测分析的Pvs48 T.B细胞线性表位为今后制定间日疟原虫的表位疫苗提供理论依据。 展开更多
关键词 间日疟 疫苗 T细胞表位 B细胞表位 表位预测
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梅河口——绿优水稻的故乡
5
作者 关恒云 《建筑与文化》 2005年第10期22-29,共8页
梅河口是一个很美的地方。她美得自然.美得质朴.美得毓秀.美得处处充满着生机和绿意。梅河口土地平旷、河流纵横.素有“千库之县、鱼米之乡”的誉称。
关键词 河口 故乡 水稻 鱼米之乡
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健康6月龄内儿童肺炎链球菌携带状况及耐药特征分析 被引量:2
6
作者 关恒云 刘岚铮 +3 位作者 姜慧钰 白爱英 刘辉 阮师漫 《实用预防医学》 CAS 2023年第2期169-172,共4页
目的 了解济南地区健康6月龄内儿童鼻咽部肺炎链球菌携带血清型及耐药特征,为肺炎球菌疫苗推广接种提供数据。方法 2019年11月—2020年4月采集济南地区216例健康6月龄内儿童鼻咽拭子,经分离培养获得疑似肺炎链球菌菌株;利用基质辅助激... 目的 了解济南地区健康6月龄内儿童鼻咽部肺炎链球菌携带血清型及耐药特征,为肺炎球菌疫苗推广接种提供数据。方法 2019年11月—2020年4月采集济南地区216例健康6月龄内儿童鼻咽拭子,经分离培养获得疑似肺炎链球菌菌株;利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和奥普托欣敏感试验鉴定后,采用多重PCR方法明确肺炎链球菌血清型;进一步采用微生物药敏分析仪进行药物敏感性检测。结果 216例健康6月龄内儿童肺炎链球菌携带率为5.1%(11/216),共携带7种血清型:15B、23F、6B、8、18C、19F和13。13价肺炎球菌多糖结合疫苗血清型覆盖率为54.5%,23价肺炎球菌多糖疫苗覆盖率为90.9%。19种抗生素中红霉素和阿奇霉素耐药率为100.0%;耐药率80.0%以上的有四环素、克林霉素、甲氧苄胺嘧啶/磺胺甲噁唑;头孢呋辛和青霉素(口服)的耐药率超过50.0%。万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、氯霉素和莫西沙星未发现耐药菌株。11例儿童鼻咽部肺炎链球菌分离株显示多重耐药,耐药种类3~6种。结论 济南地区健康6月龄内儿童鼻咽部定植的肺炎链球菌具有多种血清型,且抗生素耐药现象较严重。 展开更多
关键词 健康儿童 肺炎链球菌 血清型 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 耐药 多重耐药
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济南市2012~2017年手足口病肠道病毒谱变化及流行特征 被引量:9
7
作者 关恒云 王春荣 +4 位作者 刘岚铮 杨国樑 赵怀龙 孙洁 成洪旗 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第11期90-97,共8页
目的阐明济南市手足口病肠道病毒病原谱的构成及变化,探索不同肠道病毒类型的流行特征。方法收集2012年1月~2017年12月济南市手足口病标本4 929例,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测EV-A71、柯萨奇病毒A组16型(CV-A... 目的阐明济南市手足口病肠道病毒病原谱的构成及变化,探索不同肠道病毒类型的流行特征。方法收集2012年1月~2017年12月济南市手足口病标本4 929例,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测EV-A71、柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)、柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)和柯萨奇病毒A组10型(CV-A10);对肠道病毒通用(PE)阳性而未明确分型标本采用巢式RT-PCR方法,扩增肠道病毒5′-非翻译区(5′-UTR),经核苷酸序列测定明确肠道病毒类型。结果 4 929例标本中共检出27种肠道病毒类型,除EV-A71、CV-A16、CV-A6和CV-A10外,柯萨奇病毒A组(CV-A2、4、5、9、12、13、21、22、24)、柯萨奇病毒B组(CV-B1~5)、埃可病毒(E3、6、7、9、11、18、24、25、30)均有检出。轻型病例肠道病毒感染率居前4位的是CV-A16(29.03%)、EV-A71(25.67%)、CV-A6(17.58%)和CV-A10(3.10%),重症病例为EV-A71(77.64%)、CV-A16(5.59%)、CV-A6(1.86%)和CV-A10(1.24%)。CV-A6和CV-A10感染者的发病年龄较EV-A71和CV-A16感染者略小,分别为(3.02±2.43)岁、(2.87±1.67)岁、(3.29±2.34)岁和(3.36±2.18)岁,差异有统计学意义(F=3.659,P=0.003)。流行季节研究显示,EV-A71和CV-A16发病高峰为第2或4季度,CV-A6好发于6~12月份,CV-A10病例6~8月份发病较多。平阴县和章丘区肠道病毒阳性检出率较高,分别为93.49%和91.99%。结论济南市手足口病肠道病毒谱以EV-A71、CV-A16、CV-A6和CV-A10为优势型别,27种肠道病毒共存。常年监测非EV-A71非CV-A16肠道病毒的流行特征,及时掌握肠道病毒谱变化,有助于及时完善手足口病疫情的防控措施。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 病原谱 流行特征
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2012年济南市手足口病病原学及流行特征 被引量:7
8
作者 关恒云 王春荣 +3 位作者 吕燕 张雯 杨国樑 刘岚铮 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第10期101-104,共4页
目的分析2012年济南市手足口病的病原学及流行特征。方法采用实时荧光定量PCR方法(real-time PCR),同时检测肠道病毒71型(HEV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)及肠道病毒其他型(PE)。结果 2012年济南市各医院所送手足口病样本859例(包括重... 目的分析2012年济南市手足口病的病原学及流行特征。方法采用实时荧光定量PCR方法(real-time PCR),同时检测肠道病毒71型(HEV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)及肠道病毒其他型(PE)。结果 2012年济南市各医院所送手足口病样本859例(包括重症46例),阳性662例,总阳性率为77.1%;其中HEV71占22.1%(190/859),CVA16占41.9%(360/859),HEV71和CVA16混合感染占0.9%(8/859),非HEV71和CVA16的肠道病毒其他型(PE)占12.1%(104/859)。病例多发生于6岁以下儿童,普通病例中以CVA16感染为主;重症多发生于3岁以下儿童,以HEV71感染为主。结论 2012年济南市手足口病病原以CVA16为主,并存在HEV71和CVA16混合感染;重症病例以HEV71为主,多发生于3岁以下儿童。 展开更多
关键词 手足口病 人肠道病毒 实时荧光定量PCR 济南市
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GeXP多重基因表达遗传分析系统对2009~2012年济南市手足口病病原谱的研究 被引量:6
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作者 关恒云 杨梦婕 +5 位作者 刘岚铮 王佶 杨国樑 张雯 马学军 王春荣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期567-571,共5页
本研究旨在利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,检测与手足口病密切相关的多种肠道病毒类型,探明济南市手足口病病原谱的构成。选取济南市2009~2012年6月手足口病病例标本274例,经多重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,利用GeXP多重基因... 本研究旨在利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,检测与手足口病密切相关的多种肠道病毒类型,探明济南市手足口病病原谱的构成。选取济南市2009~2012年6月手足口病病例标本274例,经多重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,研究与手足口病密切相关的15种肠道病毒:肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV71)、柯萨奇病毒A组(Coxsackievirus A,CVA)16、4、5、6、9、10型和柯萨奇病毒B组(Coxsackievirus B,CVB)1、3、5型,以及埃可病毒(Echovirus,Echo)6、7、11、13、19。结果显示:2009~2012年济南市手足口病274例标本中,检出EV71 69例(25.18%),CVA16 44例(16.06%),CVA10 39例(14.23%),CVA6 20例(7.30%),CVB1 3例(1.09%),Echo6 2例(0.73%),CVA9 1例(0.36%),CVB3 1例(0.36%);两种以上病原体混合感染14例(5.11%)。CVA10和CVA6是引起济南市手足口病的两大病原体,仅次于EV71和CVA16;流行季节为4~8月,发病高峰分别在4月和6月。利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,首次明确了济南市手足口病的肠道病毒主要类型,为济南市手足口病疫情的防控及临床治疗提供了科学依据。 展开更多
关键词 GeXP系统 手足口病 肠道病毒 多重RT-PCR
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肠道病毒71感染手足口病患者27种细胞因子的研究 被引量:6
10
作者 关恒云 黄象娟 +4 位作者 王春荣 刘岚铮 杨国樑 韩秀云 成洪旗 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2015年第6期483-487,共5页
目的基于液相芯片分析平台,揭示EV71感染手足口病患者细胞因子表达水平与病情严重程度的关系。方法收集济南市2009—2014年43例EV71感染手足口病患者血清,其中16例为轻症患者、27例为重症患者,同时随机选取10例健康人群血清作为对照... 目的基于液相芯片分析平台,揭示EV71感染手足口病患者细胞因子表达水平与病情严重程度的关系。方法收集济南市2009—2014年43例EV71感染手足口病患者血清,其中16例为轻症患者、27例为重症患者,同时随机选取10例健康人群血清作为对照组。利用Bioplex液相芯片平台检测分析血清中27种细胞因子表达水平。结果EV71感染手足口病患者重症组血清中22种细胞因子表达水平较对照组有不同程度升高(P〈0.02),包括IL-1ra、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL.12(p70)、IL-13、IL-15、IL-17、etotaxin、G—CSF、IFN-γ、IP-10、MCP-1、PDGF—BB、MIP-1β、RANTES和TNF-α;轻症组血清中21种细胞因子表达水平较对照组显著升高(P〈0.02)。GM-CSF在重症组和轻症组表达水平均较对照组明显降低(P〈0.02)。等级相关分析显示12种细胞因子表达水平与病情严重程度呈中度正相关(IL-1ra、IL-7、IL-9、IL-10、IL-13、IL-17、etotaxin、IP-10、PDGF—BB、MIP-1β、RANTES和TNF—α),GM—CSF与病情程度呈中度负相关。结论济南市EV71感染手足口病患者血清中多种细胞因子表达水平在病情发展过程中发生显著变化,并与病情严重程度密切相关。液相芯片为手足口病细胞因子研究提供了-种高效平台。 展开更多
关键词 肠道病毒属 细胞因子类 液相芯片
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2014年济南市一起聚集性病毒性脑炎的调查及快速病原学鉴定 被引量:4
11
作者 关恒云 王春荣 +6 位作者 刘岚铮 杨国樑 赵小东 吕燕 韩秀云 张先慧 徐胜平 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期769-771,共3页
目的 快速鉴定2014年济南市一起聚集性病毒性脑炎的病原体,分析其流行病学及病原学特征.方法 采用统一的个案调查表对住院患儿逐一进行个案调查.4例患儿均采集粪便和脑脊液标本.采用实时荧光定量(RT) PCR方法检测总肠道病毒(PE)、... 目的 快速鉴定2014年济南市一起聚集性病毒性脑炎的病原体,分析其流行病学及病原学特征.方法 采用统一的个案调查表对住院患儿逐一进行个案调查.4例患儿均采集粪便和脑脊液标本.采用实时荧光定量(RT) PCR方法检测总肠道病毒(PE)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组(CVA) 16、10和6型病毒核酸;PE阳性标本采用巢式反转录PCR方法扩增5&#39;-UTR区基因,测定核苷酸序列并进行同源性分析.结果 本起聚集性病毒性脑炎疫情首发病例出现于2014年4月8日,呈人传人的传播模式.RT-PCR结果显示,所有标本PE核酸检测为阳性,而EV71、CVA16、CVA10和CVA6核酸检测均为阴性.5&#39;-UTR区核苷酸序列在美国生物技术信息中心网站经碱基局部对准检索工具分析(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)显示与肠道病毒柯萨奇病毒B5(CVB5)同源性最高,彼此之间核苷酸同源性为99.2% ~ 100.0%,与2010年河南株CVB5(HQ998851)的核苷酸同源性为96.7%~97.4%.4例患儿经积极的抗病毒、抗感染及相关对症支持治疗,均痊愈出院,无后遗症发生.结论 本起聚集性病毒性脑炎病原体为CVB5,与2010年河南株CVB5核苷酸同源性最高.RT-PCR和巢式反转录PCR方法可快速、准确地鉴定肠道病毒引起的病毒性脑炎. 展开更多
关键词 病毒性脑炎 柯萨奇病毒B5 实时荧光定量聚合酶链反应 巢式反转录聚合酶链反应
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人miRNA let-7a2质粒的构建及其表达 被引量:1
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作者 关恒云 张菊 +5 位作者 张鹏举 陈蔚文 刘闻闻 于春晓 胡晓燕 姜安丽 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第2期1-5,9,共6页
目的构建人miRNA let-7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT-PCR扩增let-7a2的前体(pre-let7a2)序列,克隆至pSilencer4.1-CMVneo表达载体中,构建pSilencer4.1-let7a2重组质粒,转染A54... 目的构建人miRNA let-7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT-PCR扩增let-7a2的前体(pre-let7a2)序列,克隆至pSilencer4.1-CMVneo表达载体中,构建pSilencer4.1-let7a2重组质粒,转染A549细胞,采用RT-PCR法检测pre-let7a2的表达;构建let-7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T,与pSilencer4.1-let7a2质粒共转染A549细胞,测定相对荧光素酶活性,以检测成熟let7a2在A549细胞中的表达及作用;采用MTT比色法检测pSilencer4.1-let7a2转染对A549细胞增殖的影响。结果构建的人let-7a2真核表达质粒pSilencer4.1-let7a2和let7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T经酶切及测序鉴定正确;pSilencer4.1-let7a2质粒转染A549细胞后,RT-PCR检测pre-let7a2表达较对照组明显增强;MTT比色法显示let-7a2对A549细胞增殖有抑制作用。pSilencer4.1-let7a2质粒和pMIR-Report-let7a2T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测相对荧光素酶活性较对照组降低,显示let-7a2表达质粒转染A549细胞后,可有效表达let-7a2并转变为成熟的具有生物学活性的let-7a2。结论成功构建了人let-7a2真核表达质粒,并在肺腺癌细胞A549中有效表达。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因表达调控 MIRNA let-7a2
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利用时间质谱检出312例6月龄内健康婴儿鼻咽部微生态菌群的分布特征 被引量:1
13
作者 关恒云 刘岚铮 +6 位作者 姜慧钰 白爱英 刘辉 赵小冬 高尚 李娜 阮师漫 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2022年第10期49-56,共8页
目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术研究济南地区6月龄内健康婴儿鼻咽部微生态菌群分布特征,为鼻咽部微生态研究提供样本库信息。方法采集2019年11月至2020年4月济南地区312例6月龄内健康婴儿鼻咽拭子,增菌后... 目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术研究济南地区6月龄内健康婴儿鼻咽部微生态菌群分布特征,为鼻咽部微生态研究提供样本库信息。方法采集2019年11月至2020年4月济南地区312例6月龄内健康婴儿鼻咽拭子,增菌后,分离培养获得纯菌株;利用MALDI-TOF MS技术鉴定分离株到种置信水平;312例婴儿分为月龄≤2组、3月龄组、4月龄组和5月龄组,组间比较采用SPSS 22.0统计学软件,卡方或Fisher确切概率法统计分析。结果312例健康婴儿鼻咽拭子获得纯菌株741株,分属于25个属74种细菌。优势菌属为葡萄球菌属(31.6%)、棒杆菌属(30.8%)、链球菌属(18.9%)、莫拉菌属(8.6%)和狡诈球菌属(2.0%)。同时发现一些不常见菌种,例如缺陷乏氧菌、放射根瘤菌等。金黄色葡萄球菌检出率男婴(40.5%)高于女婴(26.4%),接近棒杆菌女婴(42.4%)高于男婴(27.4%)。4个年龄组中,假白喉棒杆菌检出率依次升高(10.8%、17.7%、18.9%、46.7%);肺炎链球菌检出率依次升高(2.2%、2.3%、4.1%、20.0%)。结论济南地区健康6月龄内婴儿鼻咽部微生态菌群以优势菌为主呈现多样化,MALDI-TOF MS是鉴定常见和不常见微生物菌种的快速、高通量技术手段。本研究可为济南地区儿童鼻咽部微生态研究提供有价值的样本库资料。 展开更多
关键词 鼻咽部 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 微生态 婴儿
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济南市2012~2017年手足口病4种优势肠道病毒阳性及VP1基因型分布 被引量:1
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作者 关恒云 王春荣 +7 位作者 刘岚铮 赵怀龙 白爱英 姜慧钰 董华 李娜 单晓英 成洪旗 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第5期60-67,共8页
目的阐明济南市手足口病优势肠道病毒感染类型及VP1基因型分布。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对2012~2017年济南市4 929份手足口病病例标本进行肠道病毒71型(EV-A71)、柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)、柯萨奇病毒A组6型... 目的阐明济南市手足口病优势肠道病毒感染类型及VP1基因型分布。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对2012~2017年济南市4 929份手足口病病例标本进行肠道病毒71型(EV-A71)、柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)、柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)和柯萨奇病毒A组10型(CV-A10)进行鉴定。按照不同年份回顾性收集手足口病病毒分离株65株,包括17株EV-A71、16株CV-A16、20株CV-A6和12株CV-A10。采用RT-PCR方法扩增肠道病毒VP1特异性基因并进行核苷酸序列测定;获得的目的基因序列进行核苷酸同源性分析并构建系统进化树。结果济南市手足口病优势肠道病毒类型为CV-A16(28.3%)、EV-A71(27.3%)、CV-A6(17.0%)、CV-A10(3.0%)。4种优势肠道病毒VP1基因目的片段长度分别为891 bp、1 015 bp、1 110 bp和993 bp。济南市EV-A71病毒株间核苷酸序列同源性为93.0%~98.1%,CV-A16为87.4%~100.0%,CV-A6为87.6%~99.7%,CV-A10为95.8%~99.4%。系统进化树分析显示,济南市EV-A71均为C4a亚型;CV-A16存在B1b型和B1a型两种基因亚型;CV-A6在系统进化树的C簇、E簇和F簇均有分布;CV-A10全部位于进化树E簇。结论 CV-A16、EV-A71、CV-A6和CV-A10为济南市2012~2017年手足口病的优势肠道病毒;长期动态监测肠道病毒VP1基因型分布,对于提高手足口病预警敏感性具有重要的公共卫生意义。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 VP1基因 系统进化分析
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济南市一起高中生流行性腮腺炎暴发的调查 被引量:1
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作者 关恒云 李新伟 +5 位作者 彭秀苗 潘荣建 潘晶 刘晓雪 崔亮亮 程海英 《中国公共卫生管理》 2013年第6期769-770,共2页
流行性腮腺炎(简称流腮)是儿童和青少年常见的呼吸道传染病,是国家法定报告丙类传染病。患者和隐性感染者均是本病的传染源;腮腺炎病毒可通过飞沫传播,传染性强,在幼儿园、小学和中学中时有暴发流行[1、2]。2011年11月26日-2012年1月29... 流行性腮腺炎(简称流腮)是儿童和青少年常见的呼吸道传染病,是国家法定报告丙类传染病。患者和隐性感染者均是本病的传染源;腮腺炎病毒可通过飞沫传播,传染性强,在幼儿园、小学和中学中时有暴发流行[1、2]。2011年11月26日-2012年1月29日,济南市某中学出现流行性腮腺炎的暴发。疫情迁延时间长,发病人数多。 展开更多
关键词 流行性腮腺炎 暴发 现场流行病学
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非EV-A71肠道病毒感染引起的手足口病患者细胞因子表达谱变化
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作者 关恒云 王春荣 +3 位作者 刘岚铮 赵怀龙 杨国樑 成洪旗 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2022年第5期557-563,共7页
目的阐明济南市非EV-A71肠道病毒(enterovirus A71,EV-A71)感染引起的手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)患者细胞因子表达谱变化,寻找特征性的细胞因子。方法收集济南市2014—2017年非EV-A71感染HFMD患者急性期和恢复期双份血... 目的阐明济南市非EV-A71肠道病毒(enterovirus A71,EV-A71)感染引起的手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)患者细胞因子表达谱变化,寻找特征性的细胞因子。方法收集济南市2014—2017年非EV-A71感染HFMD患者急性期和恢复期双份血清,同时收集健康人血清作为对照组。采用Bio-plex液相芯片平台高通量同时检测27种细胞因子,使用GraphPad Prism和SPSS 22.0进行描述和统计分析。结果非EV-A71感染患者较健康对照组22种血清细胞因子发生显著改变,包括11种白细胞介素(interleukin,IL)、5种趋化因子(chemokines)、2种生长因子(growth factors)、粒细胞-集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)。柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)感染者急性期和恢复期分别有21种(秩均值17.06~19.00 pg/ml,5.50~8.80 pg/ml,P<0.05)、20种(秩均值16.41~19.00 pg/ml,5.50~9.90 pg/ml,P<0.05)细胞因子表达较健康对照组升高,GM-CSF(秩均值9.65 pg/ml,21.40 pg/ml,9.59 pg/ml,21.50 pg/ml,P<0.05)均较健康对照组表达降低。CV-A6感染患者急性期和恢复期分别有19种(秩均值11.92~13.50 pg/ml,5.50~6.45 pg/ml,P<0.05)和21种(秩均值12.00~13.50 pg/ml,5.50~6.40 pg/ml,P<0.05)细胞因子表达较健康对照组升高,GM-CSF仅急性期(秩均值5.00 pg/ml,10.60 pg/ml,P<0.05)较健康对照组表达降低。双份血清分析显示:CV-A16感染患者恢复期IL-6(22.79pg/ml,35.88 pg/ml)和IFNγ诱导蛋白-10(interferon-induced protein 10,IP-10)(793.56 pg/ml,2157.32 pg/ml)表达较急性期降低;CV-A6感染患者恢复期IL-7(3.13 pg/ml,1.165 pg/ml)、IL-15(27.84 pg/ml,16.005 pg/ml)和正常T细胞表达和分泌调节活化因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)(22605.96 pg/ml,7040.90 pg/ml)较急性期表达反而升高。结论非EV-A71肠道病毒感染所致HFMD患者体内表现出广泛的细胞因子表达谱改变;不同病原体、不同临床病程具有不同的细胞因子表达特征,可为寻找与病程进展、临床诊断和以及免疫治疗有意义的指标提供科学数据。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 细胞因子 液相芯片
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济南市2009--2011年手足口病病原学及基因特征分析 被引量:22
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作者 刘岚铮 岑瑞琦 +5 位作者 王春荣 吕燕 赵红 杨国樑 张雯 关恒云 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期756-757,共2页
手足口病(HFMD)是由多种肠道病毒(EV)引起的一种急性传染病。2008年5月我国将其纳入法定报告丙类传染病管理,2009年卫生部进一步要求提高其病原学检测比例,2010年山东省开始进行全年监测。本研究采用RT-PCR对2009--2011年济南地... 手足口病(HFMD)是由多种肠道病毒(EV)引起的一种急性传染病。2008年5月我国将其纳入法定报告丙类传染病管理,2009年卫生部进一步要求提高其病原学检测比例,2010年山东省开始进行全年监测。本研究采用RT-PCR对2009--2011年济南地区发生的2066例HFMD患者标本进行分析,阐明重症病例其病原及基因特征。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A16型 基因特征
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济南地区2009—2013年手足口病分子流行病学特征 被引量:22
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作者 王春荣 关恒云 +3 位作者 杨国樑 吕燕 赵红 刘岚铮 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期53-56,共4页
目的对2009—2013年山东省济南地区手足口病(HFMD)的病原及流行特征进行分析,了解HFMD的发病特点及流行趋势,为HFMD防控提供科学依据。方法选取济南地区2009—2013年临床诊断为HFMD的病例为对象,收集各县(市、区)疾病预防控制中心对辖... 目的对2009—2013年山东省济南地区手足口病(HFMD)的病原及流行特征进行分析,了解HFMD的发病特点及流行趋势,为HFMD防控提供科学依据。方法选取济南地区2009—2013年临床诊断为HFMD的病例为对象,收集各县(市、区)疾病预防控制中心对辖区内发生的HFMD病例的流行病学调查资料,采集患者发病1周内的粪便、咽拭子等标本共计3 792例,采用肠道病毒通用(PE)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)特异性引物通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)进行病原学分析;采用SPSS 11.0统计软件对流行病学资料进行统计分析。结果 2009—2013年济南地区3 792例HFMD患者(包括138例重症)标本中,2 843例检测到肠道病毒,阳性率为74.97%;其中1 143例为EV71阳性(40.20%),955例为Cox A16阳性(33.59%),其他肠道病毒(EV)阳性737例(25.92%),EV71和Cox A16混合感染阳性8例(0.28%);138例重症患者的感染病原主要为EV71(86.36%);HFMD患者主要集中于<4岁儿童(82.15%),发病高峰集中于4—5月份(31.70%),肠道病毒阳性检出率与性别无关;5年间呈现出EV71和Cox A16交替流行的态势,病原构成比之间差异有统计学意义(χ2=116.38,P<0.05)。结论山东省济南地区2009—2013年HFM D病原以EV71和Cox A16为主,并交替流行;EV71是引起HFMD重症及死亡病例的主要毒株类型。 展开更多
关键词 手足口病(HFMD) 肠道病毒71型(EV71) 柯萨奇病毒A组16型(CoxA16) 逆转录聚合酶链式反 应(RT-PCR)
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2009-2013年济南地区重症手足口病病原学及流行病学分析 被引量:18
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作者 王春荣 关恒云 +3 位作者 韩秀云 赵红 吕燕 刘岚铮 《实用预防医学》 CAS 2015年第1期60-62,共3页
目的了解2009-2013年济南地区重症手足口病(HFMD)病原及流行特征,为防控提供科学依据。方法对辖区哨点医院送检的138例重症HFMD病例标本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)、非EV71和CVA16的其它肠道病毒... 目的了解2009-2013年济南地区重症手足口病(HFMD)病原及流行特征,为防控提供科学依据。方法对辖区哨点医院送检的138例重症HFMD病例标本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)、非EV71和CVA16的其它肠道病毒(EV);并采用描述流行病学方法对重症HFMD病例进行流行病学分析。结果 138例重症HFMD病例中,有132例感染了肠道病毒,阳性率为95.65%。其中感染EV71的有114例,占阳性病例的86.36%;感染CVA16的有9例(6.52%),感染其他EV的9例(6.52%)。HFMD重症病例呈散发,主要集中于5-8月份(74.64%),病例人群男性明显高于女性(χ2=48.75,P<0.01),其中3岁以下幼儿是重症病例发生主要年龄段(84.06%)。结论重症HFMD具有明显的人群特征,EV71是重症及死亡病例的主要病毒类型;应关注高危人群,早期识别重症并及时干预治疗是降低病死率的关键。 展开更多
关键词 手足口病 重症 分析 济南
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2010-2013年济南地区肠道病毒71型感染手足口病流行病学分析 被引量:8
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作者 王春荣 关恒云 +3 位作者 杨国樑 赵红 吕燕 刘岚铮 《疾病监测》 CAS 2015年第3期194-197,共4页
目的分析2010—2013年济南地区肠道病毒71型(EV71)感染手足口病的流行病学特征,为手足口病防控提供参考依据。方法选取济南地区2010—2013年临床诊断为手足口病的病例为对象,采集患者发病1周内的粪便、咽拭子等标本,采用肠道病毒... 目的分析2010—2013年济南地区肠道病毒71型(EV71)感染手足口病的流行病学特征,为手足口病防控提供参考依据。方法选取济南地区2010—2013年临床诊断为手足口病的病例为对象,采集患者发病1周内的粪便、咽拭子等标本,采用肠道病毒通用(PE)、EV71和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)特异性引物通过反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)进行病原学鉴定。结果2010—2013年接受病原学检测的手足口病患儿共3351例(包括114例重症病例),2548例检测到肠道病毒(76.04%);其中EV71阳性1001例,占阳性病例的39.29%(1001/2548)。2010—2013年EV71阳性率分别为23.51%(190/808)、39.95%(334/836)、22.12%(190/859)和33.84%(287/848);重症病例EV71阳性率为80.70%(92/114),普通病例Ev71阳性率为28.08%(909/3237),两者之间差异有统计学意义(X2=131.9135,P〈0.01);重症病例中E71阳性率显著高于其他病毒类型(x^2=245.24,P〈0.01)。1001例感染EV71的手足口病患儿中,男女性别比为1.60:1;病例年龄主要集中于4岁以下儿童(84.42%),尤其是1—3岁年龄组(48.65%);重症病例男女比例更高(2.83:1),年龄以3岁以下幼童为主(89.13%),其中2例死亡病例均不到1岁。结论济南地区不同年度EV71流行强度与趋势不同,EV71是重症及死亡病例的主要病原。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 手足口病 流行病学 儿童 济南
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