体外培养bFGF,PDGF,TGF-β对兔MSC的ALP活性和增殖的影响

目的 在正常生理与病理状态下成纤维细胞生长因子 (FGF)、血小板源性生长因子 (PDGF) ,转化生长因子 β (TGF - β)三种生长因子调节骨的生长发育 ,影响骨折的愈合过程 ,本研究探索在体外培养条件下该三种因子对新西兰白兔骨髓基质细胞增殖与分化的影响 ,为下一步观察这些因子与其它因子联合应用提供基础研究资料。方法 抽取新西兰白兔股骨上穿刺点骨髓进行体外原代培养 ,分离骨髓基质细胞 (Marrowstromalcells,MSC) ,于第 12d行传代培养 ,以 2× 10 3 个细胞 /孔 ,定量接种于 96孔板中 ,同时按照不同剂量加入上述三种因子 ,分别在培养第 10d时用酶动力法检测碱性磷酸酶活性 ,在培养第 5d细胞近于汇合时用MTT法检测细胞的增殖情况。结果 ①随着bFGF剂量增加 ,MSCALP活性呈下降趋势 ,当bFGF浓度超过 10 0ng/ml后OD值波动在 0 0 2 0～ 0 0 0 5之间 ,仅是对照组的 1/ 3弱 (P <0 0 1) ,表明MSCALP活性受到了明显的抑制。MTT结果显示 ,OD值随着bFGF的剂量增加而明显上升 ,最高值 (浓度为 6 0 0ng/ml时 )比对照组高出近一倍 ,表明bFGF明显促进MSC增殖 ,有剂量依赖性 (dose -dependent)但当浓度高于 80 0ng/ml时 ,OD值不高于对照组 ,甚至低于对照组 ,表明较高浓度的bFGF抑制MSC增殖 ;

体外状态下新西兰白兔骨髓中CFU-F集落及成骨性CFU-F集落数量观察

目的 观察体外状态下新西兰白兔骨髓中成纤维细胞集落形成单位 (CFU F)及成骨性的CFU F集落数量 ,为探讨骨髓的成骨能力提供实验依据。方法 将实验动物分为幼年组 (6个月～ 1岁 )、壮年组 (2 5～ 3 2岁 )两组 ,在无菌状态下 ,在每只动物的股骨上穿刺点抽取骨髓 0 8ml,每个培养瓶 (2 5ml)接种含 8× 10 5个有核细胞的骨髓量 ,在体外培养 12d时计数CFU F集落数量。计数后将培养瓶中CFU F集落进行ALP染色 ,在肉眼下计数着色的CFU F集落 (即成骨性CFU F集落 )数量。结果 按照集落着色的深浅 ,本研究把CFU F集落分为 3种 :①强阳性集落 ;②弱阳性集落 ;③阴性集落。两组成骨性CFU F集落数量约占CFU F集落总数的 1 4 ,主要为弱阳性集落 ,占成骨性CFU F集落的 70 %～ 80 % ;幼年组与壮年组强阳性集落分别占CFU F集落总数的 1 13和 1 17,幼年组明显高于壮年组 ,两组差异有显著性 (P <0 0 5 )。由于每个CFU F集落均来源于一个骨髓基质干细胞 ,通过集落形成率可推算出新西兰白兔骨髓中每 110 0 0～ 130 0 0个有核细胞中有一个骨髓基质干细胞 ,后者仅占骨髓细胞的百万分之一。结论 骨髓中骨髓基质干细胞数量极少 ,成骨性骨髓基质干细胞就更少了 ,但就骨髓细胞总量来说骨髓中骨髓基质干细胞也是相当可观的。

体外培养状态下新西兰白兔MSC的传代增殖特性

目的 观察体外状态下新西兰白兔骨髓基质细胞 (MSC)的传代增殖特性 ,评价其体外生存能力。方法抽取新西兰白兔股骨骨髓行 1 2天原代培养后再行传代培养 8代 ,用细胞计数法测定传第 1代、第 4代、第 8代MSC的增殖情况 ,绘制生长曲线。本研究还检测了传 1代的MSC的分裂指数和细胞贴壁率。结果 传 1代MSC的生长曲线与传 4代、传 8代MSC的生长曲线基本一致 ,其生长曲线显示在接种后的第 2个～第 5个 2 4h (共 4天 )细胞增殖是呈对数生长状态 ,此时的群体倍增时间是 30 87h。培养第 7天以后细胞基本停止生长。细胞的分裂指数在传代的第 2个、第 3个 2 4h增长最快 ,第 4个 2 4h达到高峰 (2 3 8% ) ,在第 9个 2 4h细胞已处于汇合状态 ,基本停止分裂。传 1代MSC细胞贴壁率在传代后第 2h、第 8h、第 1 0h分别为 2 8 5 %、 85 0 %、92 5 % ,此后贴壁率上升趋于停止 ,表明细胞贴壁主要发生在传代后 1 0h以内。结论 新西兰白兔MSC是一种在体外状态下生长旺盛 ,生存能力较强 。

多节段颈椎间盘脱出的脊髓型颈椎病治疗的回顾性分析

目的 研究多节段颈间盘脱出症术式选择、减压范围及植骨的处理。方法 对 48例患者的发病因素、病程及影像学表现特征进行分析。本组均采用颈椎前路减压自体髂骨植骨融合术 ,术后随访最平均 4 7年。结果 治疗效果优 :2 8例 (5 8 3% )。良 :11例 (2 2。 9% )。可 :6例 (12 5 % )。差 :3例 (6 3% )。结论 多节段颈间盘脱出症减压手术应首先考虑前路手术。如临床症状不缓解 ,可待植骨愈合后再行后路减压手术。一般两个节段的间盘摘除基本可以解决多间盘脱出的颈椎病。植骨的原则是务必保持椎间高度。

外固定器在膝关节复杂骨折中的应用

目的 探讨外固定器在膝关节附近复杂骨折中应用的疗效。方法 通过对 1997～ 1999年间采用外固定器在膝关节附近复杂骨折中应用的 11例患者研究 ,观察了骨折愈合和膝关节功能情况。结果 所有病人被随访 ,术后疗效满意。应用外固定器治疗膝关节附近复杂骨折固定可靠。结论 外固定器在膝关节附近复杂骨折中应用具有操作简便 ,固定牢靠 ,有利于早期活动 ,目前是一种较好的骨折固定器材。

腰椎间盘突出症再手术临床分析

腰椎间盘突出症是绝大多数腰痛或伴发坐骨神经痛的主要病因。手术方式的多种选择，使其疗效有所差异。通过我院１９８４～１９９５年间１８９手术病例，其中因术后疗效不佳或再次出现症状而需行再次手术。为此我们就有关问题进行分析与讨论。１一般资料１８９例患者中男１...

腰椎间盘突出症再手术原因的探讨

我院１９８４～１９９５年间１８９手术病例，共手术２０６次，随访１５４例，占８１．５％，因术后疗效不佳或再次出现症状而需行再次手术８例。在椎板开窗术８７病例中再手术４例（４．５％）；部分椎板切除术３３例，再手术２例（６．１％）；全椎板切除术６９例，再手术２例（２．９％）。再手术时间１～２０年，再手术术后效果令人满意。分析与讨论了再手术的病因，如何避免术后复发再手术的可能性，术中要求减压彻底，应以解除神经根压迫为目的，以估计神经根不会再次受到压迫为标准；术后强调早期锻炼以及再手术存在着的困难。认为腰椎间盘突出症再手术的效果与其病理变化密切相关。