目的探究LncRNA ZFAS1是否通过调节miR-34b-5p促进弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)细胞增殖并抑制细胞凋亡。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测30例DLBCL患者肿瘤组织及DLBCL细胞株中LncRNA ZFAS1和miR-34b-5p转录...目的探究LncRNA ZFAS1是否通过调节miR-34b-5p促进弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)细胞增殖并抑制细胞凋亡。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测30例DLBCL患者肿瘤组织及DLBCL细胞株中LncRNA ZFAS1和miR-34b-5p转录水平。将含有敲低ZFAS1序列的载体和抑制或过表达miR-34b-5p的序列使用Lipofectamine 2000试剂转染到SU-DHL-4细胞,RT-qPCR检测敲低和过表达效率,双荧光素酶报告基因实验分析ZFAS1和miR-34b-5p的靶向关系。最后SU-DHL-4细胞随机分组为对照组、sh-ZFAS1组、miR-34b-5p inhibitor组和shRNA-ZFAS1+miR-34b-5p inhibitor组,克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果在DLBCL患者和细胞系中ZFAS1的表达量增加,而miR-34b-5p的表达量减少,同时ZFAS1靶向负调节miR-34b-5p的表达。与对照组相比较,sh-ZFAS1组miR-34b-5p的表达量增加,miR-34b-5p inhibitor组miR-34b-5p的表达量减少。与miR-34b-5p inhibitor组相比较,sh-ZFAS1和miR-34b-5p inhibitor共转染组中miR-34b-5p的表达量增加。敲低ZFAS1的表达抑制SU-DHL-4细胞增殖,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,同时升高Bax/Bcl-2和cleaved caspase-3/caspase-3比值。结论LncRNA ZFAS1通过下调miR-34b-5p促进SU-DHL-4细胞增殖并抑制细胞凋亡。展开更多
目的:观察天麻钩藤饮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:制备大鼠天麻钩藤饮含药血清。采用酶消化法体外培养HUVECs,利用Human von Willebrand factor免疫细胞化学法鉴定,随机分为3组:对照组,AngⅡ...目的:观察天麻钩藤饮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:制备大鼠天麻钩藤饮含药血清。采用酶消化法体外培养HUVECs,利用Human von Willebrand factor免疫细胞化学法鉴定,随机分为3组:对照组,AngⅡ组,AngⅡ+天麻钩藤饮组。倒置显微镜下观察细胞形态、密度,酶联免疫法测定细胞上清TNF-α含量,RT-PCR法测定细胞PPAR-γmRNA的表达。结果:与对照组比较,AngⅡ(10-6mol/L)可引起内皮细胞密度降低,细胞分泌TNF-α增加,PPAR-γmRNA表达水平降低。天麻钩藤饮含药血清可抑制AngⅡ导致的细胞损伤,减少TNF-α的分泌,升高PPAR-γmRNA的表达。结论:天麻钩藤饮可对抗AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。展开更多
文摘目的:观察天麻钩藤饮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:制备大鼠天麻钩藤饮含药血清。采用酶消化法体外培养HUVECs,利用Human von Willebrand factor免疫细胞化学法鉴定,随机分为3组:对照组,AngⅡ组,AngⅡ+天麻钩藤饮组。倒置显微镜下观察细胞形态、密度,酶联免疫法测定细胞上清TNF-α含量,RT-PCR法测定细胞PPAR-γmRNA的表达。结果:与对照组比较,AngⅡ(10-6mol/L)可引起内皮细胞密度降低,细胞分泌TNF-α增加,PPAR-γmRNA表达水平降低。天麻钩藤饮含药血清可抑制AngⅡ导致的细胞损伤,减少TNF-α的分泌,升高PPAR-γmRNA的表达。结论:天麻钩藤饮可对抗AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能。