松萝酸对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为及JNK/MAPK信号通路的影响

目的:探讨松萝酸对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并阐明其对c-Jun氨基末端激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的调节作用。方法:取对数生长期HSFBs分为对照组、10μmol·L^(-1)松萝酸组、20μmol·L^(-1)松萝酸组和50μmol·L^(-1)松萝酸组,除对照组外,其他各组细胞给予相应浓度松萝酸处理。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测各组细胞中磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果:MTT法和流式细胞术检测,与对照组比较,10、20和50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞存活率均降低(P<0.05),细胞凋亡率均升高(P<0.05);与10μmol·L^(-1)松萝酸组比较,20和50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞存活率均降低(P<0.05),细胞凋亡率均升高(P<0.05);与20μmol·L^(-1)松萝酸组比较,50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。Transwell小室实验检测,与对照组比较,10、20和50μmol·L^(-1)松萝酸组侵袭细胞数和迁移细胞数均减少(P<0.05);与10μmol·L^(-1)松萝酸组比较,20和50μmol·L^(-1)松萝酸组侵袭细胞数和迁移细胞数均减少(P<0.05);与20μmol·L^(-1)松萝酸组比较,50μmol·L^(-1)松萝酸组侵袭细胞数和迁移细胞数均减少(P<0.05)。Westernblotting法检测,与对照组比较,10、20和50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞中Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bax和p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05);与10μmol·L^(-1)松萝酸组比较,20和50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞中Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bax和p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05);与20μmol·L^(-1)松萝酸组比较,50μmol·L^(-1)松萝酸组细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax和p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论:松萝酸可抑制HSFBs增殖、侵袭和迁移,诱导HSFBs凋亡,并激活JNK/MAPK信号通路。

医院烧伤病房MRSA耐药现状及PVL基因检测研究

目的了解宁夏医科大学总医院医院烧伤病房临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药现状及杀白细胞素(PVL)基因携带情况。方法对宁夏医科大学总医院2012年10月至2013年8月烧伤病房患者送检的125株MRSA菌利用药敏纸片法(K-B法)进行20种常用抗菌药物敏感性检测;应用多聚酶链反应(PCR)进行PVL基因检测。结果 125株MRSA菌对青霉素及头孢类抗菌药物呈现100%耐药;万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素耐药率均为0;125株MRSA菌有21株携带PVL基因,其携带PVL基因菌株的检出率为16.8%。结论宁夏医科大学总医院烧伤病房的MRSA检出率高,携带PVL基因的MRSA菌对9种抗菌药物耐药率高于PVL阴性MRSA菌株,未发现对糖肽类抗菌药物耐药情况。

腹部封闭式延迟超薄皮瓣修复手指电烧伤创面16例疗效体会

目的探讨封闭式延迟超薄皮瓣对手指掌侧电烧伤创面的修复效果。方法手术分两期进行,第一次手术先行创面彻底扩创,依据患指情况于同侧腹部自上而下设计相应个数的矩形皮瓣,两两皮瓣间距在1.0~1.5 cm,沿设计切口三边切开,从远端自深筋膜层掀起皮瓣前2/3~1/2部分,皮瓣近蒂部两侧切口部分原位缝合,皮瓣远端适当修薄,最后将患指创面与皮瓣远端及供瓣区创基缝合,以彻底封闭创面。手术3周后皮瓣成活,行二期断蒂术,术中将皮瓣断蒂端修薄后覆盖创面。结果术后所有患指转移皮瓣成活,供瓣区仅遗留线状瘢痕,无明显挛缩。结论通过对既往传统术式的适当改良,对手指电烧伤患者实施腹部封闭式延迟超薄皮瓣分指修复创面,在最大限度保留患指功能的情况下,达到了减轻供瓣区创伤、缩短病程、降低感染率、改善皮瓣臃肿外观的效果。

应用纤维支气管镜肺灌洗治疗中重度吸入性损伤8例疗效分析

目的:观察纤维支气管镜肺灌洗治疗中重度吸入性损伤的疗效。方法:选取8例患者于休克期过后(伤后2～3天)患者病情稳定的情况下开始实施肺灌洗。隔天1次,严重者可每天1次。结果:通过治疗,8例患者通过早期肺灌洗治疗。镜下可见气道水肿、充血情况改善明显,定期复查血气分析提示氧分压指标逐步提高。与以往未行早期肺灌洗的患者相比,发生肺部感染的几率明显下降。结论:早期灌洗可清除肺泡内继发性致伤因素,可以减轻继发性炎症反应。同时清除了残余的致伤物质,中断其继续损伤作用,具有气道内清创意义。

腹股沟旋髂浅筋膜蒂皮瓣修复小儿阴阜部增生性瘢痕12例疗效体会

目的探讨采用腹股沟旋髂浅筋膜蒂皮瓣对小儿阴阜部增生性瘢痕的修复效果。方法术中完整切除阴阜部瘢痕并充分松解创面,根据创面位置,选择距离相对较近的一侧设计旋髂浅动脉皮瓣,采用逆向切开将皮瓣掀起,蒂部为筋膜组织蒂,筋膜蒂皮瓣可直接转移覆盖创面或于创面与蒂部之间正常皮肤深筋膜层形成暗道后转移至创面。供瓣区均直接拉拢缝合,蒂部皮肤原位缝合。结果术后12例皮瓣色泽红润,血运正常,均全部成活;术后3~15个月随访,11例患儿皮瓣未发生再次瘢痕增生挛缩,功能及外形均较满意。结论采用腹股沟旋髂浅筋膜蒂皮瓣修复小儿阴阜部增生性瘢痕,其外形及质感均较植皮效果更好,并且降低了再次挛缩而多次手术的情况,疗效满意。

一种改进的大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法

目的:改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法,从而获取高纯度星形胶质细胞用于神经科学研究。方法:新生大鼠(2~3日龄),75%酒精消毒后断头,于冰上取大脑皮质置于冰冷的D-Hanks液中,去除脑膜和血管,剪碎后用0.25%胰酶消化并分离细胞,以1×10~5/ml的密度接种于预铺0.015%多聚赖氨酸的细胞瓶中培养。细胞纯化采用"差速贴壁法"、"梯度血清法"和"十字手摇法",以获取高纯度星形胶质细胞。通过星形胶质细胞特异性表达蛋白即胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)行免疫细胞荧光染色来鉴定细胞纯度。结果:星形胶质细胞纯度大于98%,可多次传代,细胞增殖快,且生长良好。结论:改进的原代星形胶质细胞培养方法,操作简单,细胞纯度高,能满足各种神经科学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验要求,适宜推广。

31例严重烧伤患者血小板记数变化结果分析

为探讨严重烧伤患者早期血小板记数的变化及临床意义,收集2000年1月～2006年12月间本院烧伤科重症区住院病人中出现早期血小板记数明显下降的病例,并就其早期血小板记数及变化进行统计分析。结果,31例患者受伤当日血小板记数多为正常或高于正常值,血小板记数出现下降多在伤后2d,多数患者于受伤后7～9d血小板记数恢复正常。认为严重烧伤可以造成早期血小板记数明显下降,血小板记数明显降低及持续时间与烧伤面积无关。

大面积烧伤患儿自体皮与双亲皮混合移植术后疗效分析

目的探讨大面积烧伤患儿的手术治疗方法。方法对我院2002年7月-2010年7月收治的15例大面积烧伤患儿行自体皮与双亲皮混合移植术的临床资料进行回顾性分析。结果 15例大面积烧伤患儿手术1次成功率70%,二次手术成功率95%。结论自体皮与双亲皮在大面积烧伤患儿手术治疗中手术效果好,治愈率高,是抢救大面积重度烧伤患儿成功的关键,方法简单,易实施。

锌指蛋白146(RNF146)对吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用

目的评价锌指蛋白146(RNF146)对化疗药吡柔比星引起的GC-1小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用。方法采用1.0μg/m L吡柔比星处理的方法复制DNA损伤的小鼠GC-1精原细胞模型。构建小鼠rnf146慢病毒过表达载体p CDHrnf146并包装rnf146过表达慢病毒,感染GC-1细胞上调rnf146的表达,Western blot验证过表达效率。评价RNF146对吡柔比星引起的GC-1细胞增殖抑制、凋亡增多及DNA损伤的保护作用。结果成功构建了p CDH-rnf146重组质粒并包装具有良好感染效率的RNF146过表达慢病毒。溴脱氧尿苷(Brd U)掺入标记显示RNF146能够减轻吡柔比星引起的GC-1增殖抑制。原位末端转移酶标记技术(TUNEL)提示RNF146能够抑制吡柔比星诱导的GC-1细胞凋亡。彗星实验显示RNF146过表达能够有效保护吡柔比星作用下GC-1细胞DNA的完整性。结论 RNF146对化疗药吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞损伤具有保护作用。

小儿烧伤360例分析

目的:探讨小儿烧伤的特点,为临床救治提供经验和科学依据。方法:采用回顾性分析的方法,对360例小儿烧伤的病例资料进行汇总分析,探讨致伤因素及发病规律。结果:小儿烧伤占我科同期住院患者总数的45.1%,致伤因素以热液烫伤为主,占83.1%。结论:小儿烧伤仍是当前及今后烧伤防治工作的重点,需重视并加强预防,减少发生率。

利用腹部皮瓣蒂分期修复手部多处高压电烧伤创面12例

在各类不同原因烧伤中，高压电烧伤常常对接触的肢体造成毁损性伤害，手是其中最常见的受损部位，且创面多呈“跳跃式”、散在分布。对于手部多处高压电烧伤创面，临床上常选择多次采用腹部带蒂皮瓣进行修复。为缩短患者整体治疗时间，2013年1月-2015年5月，笔者设计利用腹部皮瓣的蒂部，分期修复12例患者手部多处高压电烧伤创面，取得预期效果。

多种皮瓣修复足跟部低温烫伤15例

1临床资料 2013年1月-2016年12月，笔者单位收治足跟部低温烫伤患者15例，其中男9例、女6例，年龄18～62岁。麻醉术后或醉酒后热水袋烫伤8例，下肢瘫痪后热疗仪烫伤4例，一氧化碳中毒后热炕烫伤3例。

修复严重臀部皮肤撕脱伤创面11例

随着工业及交通工具的迅速发展，皮肤撕脱伤患者数量与日俱增，既往这类患者多入骨科及普外科进行治疗。近年来，由于烧伤外科在创面修复方面更具有专业性，在治疗这类患者中体现了明显的优势。臀部撕脱伤患者数量相对较少，但该部位毗邻会阴、盆腔，位置相对特殊，治疗难度较大。2014年1月—2017年1月，笔者单位收治严重臀部皮肤撕脱伤患者11例，取得了较好的治疗效果，并积累了一些经验，现介绍如下。

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌基因分型及耐药现状研究

目的 研究烧伤病房分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）的葡萄球菌盒式染色体mec（SCCmec）基因分型及耐药现状. 方法 2012年9月-2013年9月,从笔者单位烧伤整形科ICU及普通病房送检的患者创面分泌物、血液及痰液标本r中,检出非重复金黄色葡萄球菌179株（ICU来源68株、普通病房来源111株）.采月头孢西丁K-B纸片扩散法检测金黄色葡萄球菌MRSA表型,对ICU和普通病房中MRSA检出率进行比较.采用PCR法对MRSA进行SCCmec.分型,经检测甲氧西林耐药决定子mecA基因对前述MRSA鉴定结果进行验证 . 采用用 K-B纸片扩散法检测MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对23种临床常用抗菌药物的耐药情况 除去MRSA对其耐药率为100.0％或0的抗菌药物,将SCCmecⅢ型MRSA与非SCCmecⅢ型MRSA 对剩余抗菌药物的耐药率进行比较对数据行Pearsonx2检验或校正x2检验. 结果 179株金黄色葡萄球菌中148株鉴定为MRSA占82.7％,其中ICU来源62株、普通病房来源86株;其余31株为MSSA占 17.3％.ICU中 MRSA在该病区内检出金黄色葡萄球菌中所占百分比为91.2％（62/68）,显著高于普通病房中的77.5％（86/111）,x2=5.526,P=0.019. PCR检测显示148株MRSA均携带mecA基因,其中106株为SCCmecⅢ型阳性占71.6％;ICU与普通病房中 SCCmecⅢ型MRSA占各自病区内检出MRSA的百分比分别为72.6％ （45/62）和70.9％ （61/86）,差异无统计学意义（x2=0.048,P=0.826）.148株MRSA对青霉素及头孢类抗生素共8种抗菌药物100.0％耐药,对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素、呋喃妥因及奎奴普丁/达隔普汀的耐药率均为0除2种菌对其耐药率为0的6种抗菌药物外,MRSA对剩余17种抗菌药物的耐药率均显著高于MSSA（x2值为4.091 ～138.546,P＜0.05或P＜0.01） 106株SCCmecⅢ型MRSA对左氧氟沙星、环丙沙星、利福平、四环素、红霉素、林可霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率分别为56.6％（60/106）、85.8％ （91/106）、89.6％ （95/106） 、86.8％（92/106）、84.9％ （90/106）、78.3％（83/106）、92.5％ （98/106）、74.5％ （79/106）,均显著高于42株非SCCmecⅢ型MRSA的33.3％ （14/42）、61.9％（26/42） 、71.4％ （30/42）、66.7％ （28/42） 、69.0％（29/42）、57.1％（24/42）、71.4％（30/42）、52.4％ （22/42）,x2值为4.801 ～11.377,P＜0.05或P＜0.01. 结论 笔者单位烧伤病房的MRSA检出率高且耐药现状十分严峻,流行情况以SCCmec.Ⅲ型为主,未见对糖肽类抗生素耐药情况.

手部烧伤结局评估工具的汉化和跨文化调试及信效度检验

目的将手部烧伤结局评估工具(BHOT)引入中国,对其进行汉化、跨文化调试和信效度检验,为手部烧伤患者治疗效果的评估和医疗决策的制订提供参考依据。方法采用横断面调查研究方法。征得原作者授权后采用Brislin翻译模式对BHOT进行直译、合成、回译和专家审核,形成中文版BHOT(C-BHOT)2。采用目的抽样法邀请10名从事烧伤救治工作的专家进行跨文化调试,形成C-BHOT 3。采用偶然抽样法,选择2020年1—3月在宁夏医科大学总医院治疗的21例符合入选标准的手部烧伤患者行预测试,完善后形成最终版C-BHOT 4。采用偶然抽样多地点跨区调查法于2020年5月—2021年3月,选择宁夏医科大学总医院、空军军医大学第一附属医院、陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院和南昌大学第一附属医院的符合入选标准的住院患者。采用一般资料调查表和C-BHOT 4进行调查,采用临界比法和相关系数法进行项目分析,采用克龙巴赫α系数检验内部一致性,采用重测信度判断稳定性,采用内容效度指数分析内容效度,采用探索性因子分析进行结构效度检验。对数据行独立样本t检验、Pearson相关分析。结果经汉化、跨文化调试、预测试后形成共20个条目的C-BHOT 4,所有条目调整为正向计分,在原工具的基础上修改7处。正式调查共发放问卷353份,回收有效问卷344份,有效回收率97.45%。344例患者中男性(297例)明显多于女性(47例),年龄为23~57岁。项目分析中各条目的临界比为5.48~12.59(P<0.05),高分组和低分组每个条目得分比较差异明显(t=-10.72~-2.84,P<0.05或P<0.01),各条目得分间、各条目得分与工具总分间均呈明显正相关(r=0.68~0.71、0.47~0.63,P<0.05或P<0.01)。信度检验中,整个工具的克龙巴赫α系数为0.837,重测信度为0.702~0.793。效度检验中,整个工具的内容效度指数为0.923,探索性因子分析共提取出3个公因子,累计方差贡献率为76.162%,验证性因子分析中的比较拟合指数为0.924。结论引进的BHOT经汉化、跨文化调试、预测试和信效度检验后,验证出C-BHOT 4在中国手部烧伤患者结局评估中具有良好的信效度,可作为一种有效的测评工具进行应用。

松萝酸通过PI3K/Akt通路对大鼠皮肤创面愈合及瘢痕增生的作用

目的基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路探讨松萝酸对大鼠皮肤创面愈合及瘢痕增生的作用。方法70只SD雄性大鼠取15只为正常组,另48只背部皮肤创伤模型大鼠随机分为模型组、阳性药物组、松萝酸组,各16只。观察大鼠不同时间皮肤创面愈合率,记录创面完全愈合时间、瘢痕厚度;酶联免疫吸附(ELISA)法检测创面组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)、ɑ平滑肌肌动蛋白(αSMA)累积光密度;苏木精-伊红(HE)染色法观察创面组织病理学形态;蛋白质印迹法检测磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白相对表达量。结果与模型组比较,阳性药物组、松萝酸组各时段创面愈合率升高,创面完全愈合时间缩短,瘢痕厚度降低(P<0.05);与正常组比较,模型组、阳性药物组、松萝酸组各时段IL-6、TNF-α水平升高,而阳性药物组、松萝酸组低于模型组(P<0.05);与模型组比较,阳性药物组、松萝酸组各时段VEGF、αSMA累积光密度升高(P<0.05);与正常组比较,模型组、阳性药物组、松萝酸组不同时段p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量降低,模型组低于阳性药物组、松萝酸组(P<0.05)。结论松萝酸可促进皮肤创伤大鼠创面愈合,控制创面瘢痕过度增生,作用机制可能与调节PI3K/Akt通路有关。

腹部多个小皮瓣分别半包埋法治疗多指手外伤

自2003年以来，我们应用腹部多个小皮瓣分别半包埋法治疗多指手外伤8例29指，获得良好效果。