B亚型新等位基因803delC的分子生物学研究

目的分析研究1例新的B亚型等位基因血清学特点和分子生物学机制。方法应用血清学方法检测患者ABO血型。应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)检测ABO血型基因。应用Sanger基因序列分析检测ABO基因1~7外显子编码区域,确定基因突变位点。结果血清学鉴定患者正定型为O型,反定型为B型。PCR-SSP基因分型结果为A/O型,存在A基因,与血清学结果不符。进一步Sanger双链测序结果显示该标本在ABO^(*)B.01/ABO^(*)O.01.01的基础上,第7外显子803位置缺失C碱基。该突变最终导致多肽链上发生p.Ala268Gly和p.Phe269Ser的氨基酸替换,并且从269位置开始产生新的开放阅读框,新的开放阅读框第20号氨基酸为终止密码子,导致B基因表达终止。进一步ABO基因克隆测序证明该突变点位于ABO*B.01基因上,该突变已提交NCBI数据库,收录编号为OR343908。结论在中国人群中发现1种新的导致B变异型的ABO等位基因,基因检测方法可辅助鉴定血清学正、反定型不符的疑难血型。

潍坊地区患者ABO血型鉴定困难原因分析

目的:探讨分析潍坊地区患者ABO血型鉴定困难原因,解决疑难输血问题。方法:应用全自动血型分析仪对2020年12月-2023年10月潍坊地区239388例患者血型标本进行ABO血型初检,正反定型不符的标本加做试管法+镜检、不规则抗体筛查等实验,仍无法确定血型的,应用PCR-SSP法检测ABO血型基因,SSP荧光PCR染料法鉴定血型亚型,必要时进行Sanger基因序列分析。结果:239388份标本检出正反不符标本248份,研究分析结果为:①ABO亚型所致95例(4.0/万),其中B基因发生突变频率(65/95)明显高于A基因(28/95);②抗原减弱所致94例(3.9/万),其中B抗原表达减弱(62/94)比A抗原减弱(29/94)更常见;③不规则抗体阳性所致34例(1.4/万),其中抗M抗体(25/34)检出率最高;④反定型抗体减弱/缺失所致25例(1.0/万),其中抗B抗体减弱或缺失(22/25)最常见。结论:血清学与分子生物学结合可以准确鉴定患者血型,有效解决患者血型鉴定困难导致的疑难输血问题。

自身免疫性溶血性贫血患者IgG亚类与血细胞参数的相关性研究

目的:探讨自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者IgG亚类与血细胞参数的相关性。方法:选择本院2010年12月至2016年8月诊断为温抗体型AIHA(排除单纯C3d型)34例免疫复合型(IgG+C3d)和单IgG型的患者。其中原发性26例,继发性8例;男11例,女23例;平均年龄37.8(0.5-79)岁。健康对照者30名,男15名,女15名,平均年龄42.8(18-55)岁。采用酶联免疫的方法(双抗体夹心法),对30例健康对照者、34例AIHA患者及其中的32例患者红细胞放散液进行IgG亚类检测。结合患者血细胞部分参数,分析患者IgG亚类水平与血细胞部分参数的关系。2组间比较采用独立样本t检测,相关分析采用Spearman方法。结果:34例AIHA患者IgG1-4平均值高于30例健康对照者,2组比较差异有统计学意义(IgG1:t=-4.88,P<0.01;IgG2:t=-3.06,P<0.01;IgG3:t=-5.39,P<0.01;IgG4:t=-3.16,P<0.01)。而2组各亚类所占IgG的百分比比较显示,除IgG4外,其余3个亚类所占IgG的百分比均有统计学差异(IgG1:t=-4.03,P<0.01;IgG2:t=7.38, P<0.01;IgG3:t=-3.03,P<0.01;IgG4:t=1.73,P>0.05)。对34例AIHA患者血浆中IgG亚类与部分血细胞参数采用Spearman相关分析显示,IgG1与Hb、RBC、HCT呈正相关(Hb:r=0.358,P<0.05;RBC:r=0.426,P<0.05;HCT:r=0.363,P<0.05),IgG1、IgG2与WBC计数呈负相关(IgG1:r=-0.437,P<0.05;IgG2:r=-0.487,P<0.01),IgG2与PLT计数呈负相关(r=-0.436,P<0.05)。患者血浆和放散液中各亚类所占百分比比较显示,除IgG2无统计学意义外,其余3个亚类的百分比均有统计学差异(IgG1:t=6.528,P <0.01;Ig G2:t=1.544,P>0.05;Ig G3:t=-8.488,P<0.01;Ig G4:t=-9.434,P<0.05)。结论:AIHA与Ig G1和Ig G3相关,IgG亚类检测对研究AIHA的诊断、治疗及发病机理有一定意义。

淋巴细胞输注治疗不明原因复发性流产的临床应用研究

目的探讨淋巴细胞输注对不明原因复发性流产(URSA)临床应用价值。方法应用供者淋巴细胞皮下输注治疗URSA患者229例;采用微量淋巴细胞毒和ELISA技术检测治疗前后受者(妻子)血清中白细胞抗原(HLA)抗体。结果治疗后再次妊娠分娩178例,占77.73%(178/229);180名孕妇中,抗-HLA阳性率46.11%(83/180例);83例抗-HLA阳性者中分娩63例,占78.33%(63/83),97例抗-HLA阴性者中分娩78例,占80.41%(78/97)。结论淋巴细胞输注对URSA具有较好治疗效果,抗-HLA不适合作为治疗效果的评价指标。

低聚壳聚糖喷雾联合碘伏对预防导管相关性尿路感染的效果研究

目的:观察低聚壳聚糖喷雾与碘伏联合应用对预防留置尿管相关性尿路感染的效果。方法:选取2014年1-11月潍坊市某三甲医院神经内科收治的脑血管意外且需要留置导尿管的患者共60例,按照患者入院顺序分为试验组和对照组,每组30例。对照组使用0.5%碘伏消毒液棉球进行尿道外口及其周围皮肤常规消毒,试验组将低聚壳聚糖喷雾与0.5%碘伏联合应用在上述部位的护理中。比较两组留置导尿管第3、7、14天中段尿的尿常规、细菌培养阳性率及尿道外口样本细菌定植量。结果:两组患者留置导尿管第3、7天中段尿的尿常规阳性率、细菌培养阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者留置导尿管第14天中段尿的尿常规阳性率、细菌培养阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组留置导尿管第3、7天尿道外口细菌定植量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组留置导尿管第14天尿道外口细菌定植量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用低聚壳聚糖喷雾与碘伏联合进行会阴护理的方法,能降低需长期(不少于14 d)留置导尿管患者中段尿的尿常规、细菌培养阳性率及尿道外口细菌定植量,从而降低导尿管相关尿路感染的发生率。

Rh新生儿溶血病治疗不彻底致患儿晚期严重贫血1例

病例简介 产妇，韩某，农民，28岁。第一孕50d左右自然流产，现第二孕，足月产一女婴，产前未做血型抗体检查。女婴出生时阿氏评分1分钟10分，体重3．3kg。生后当日排小便1次，排大便4次，为墨绿色稀便，吃奶约60ml。女婴出生约12h发现皮肤黄染，并进行性加重。

手术患者红细胞输注计划与实施符合性评价研究与应用

目的分析手术患者术前用血计划与术中实际输血量符合率,为术前制订科学合理有效的用血计划提供理论依据。方法通过对2011年1月1日-2013年12月30日本院手术患者围手术期输血情况进行回顾性调查,统计3年间用血量比较大的手术用血情况,以全髋关节置换术为例统计计划量与实际用血量的差异,采用t检验方法分析评价其符合性。结果 1)手术输血患者占手术患者比例逐年降低,手术患者人均红细胞输注量逐年降低。2)用血比例较大的几类手术3年间手术中红细胞输注量差异不具统计学意义(P>0.05)。3)超计划输血占总手术用血人次的16.3%,超计划用血患者计划血量与实际用血量差异具统计学意义(P<0.05)。4)股骨头缺血性坏死、股骨颈骨折、其他髋关节病变所致全髋关节置换术患者红细胞术前计划量与术中实际用血量分别为:2.97±1.01 U,4.77±2.33 U;3.26±0.99 U,5.42±3.91 U;3.16±1.07 U,6.08±4.80 U,计划量与实际输注量差异均具统计学意义(P<0.05)。结论术前制订有效的用血计划非常必要,对保障输血安全、手术安全意义重大,应尽量避免超计划用血,杜绝无计划用血,在综合评估患者个体情况下,术前红细胞用血计划可参考该类手术最近3年平均用血量。

循证医学在指导制订全髋关节置换术红细胞用血计划中的应用

目的：用循证医学方法为临床科学制订全髋关节置换术红细胞用血计划提供实验室依据.方法：统计2011年~2013年本院全髋关节置换术红细胞计划用量和术中实际用量及两者差异,计算每年全髋关节置换术红细胞用量及年间差异.结果：股骨头缺血性坏死、 股骨颈骨折、 其他髋关节病变致全髋关节置换术前红细胞计划用量（U）分别为2.97±1.01、3.26±0.99、3.16±1.07,术中实际用量（U）分别为4.77±2.33、5.42±3.91、6.08±4.80,计划量与实际使用量比较P值分别为0.00、0.02、0.0,差异有统计学意义;2011年~2013年三年间全髋关节置换术中实际红细胞用量（U）分别为5.22±3.01、5.11±3.90、5.00±3.80,每年略有下降,但P值为0.96,差异无统计学意义,三年平均用量（U）为5.11±3.57.结论：循证医学方法具有客观性,分析术中实际用血量从而指导制订同类手术用血计划具有实际意义,用血计划影响血液库存量.

原因不明习惯性流产主动免疫治疗后血清表皮生长因子水平变化

目的:检测原因不明习惯性流产(UHA)患者免疫治疗前后血清中表皮生长因子(EGF)水平变化,探讨其变化在UHA发病及治疗中的作用。方法:采用皮下注射丈夫淋巴细胞的方法治疗UHA患者;应用ELISA法检测正常非孕妇女30例和UHA妇女30例免疫治疗前后血清EGF水平变化(Pg/mL)。结果:UHA患者血清中EGF水平(107.5±47.9)明显低于正常非孕妇女(169.1±56.6),P<0.01;免疫治疗后EGF水平(152.3±63.9),比治疗前明显升高,P<0.01。结论:血清EGF水平降低可能与UHA的发生相关,免疫治疗可上调UHA患者血清中EGF水平,利于胎盘胎儿生长,使妊娠成功。