搅拌对顶头孢霉丝形态和头孢菌素C生物合成的影响

搅拌能充分混合物料,增强氧的传递,但搅拌强度过强会影响工业生产菌的菌丝形态和产物生成。在头孢菌素C的发酵生产过程中,菌丝形态与产素的关系密切,通过采用显微图像定量分析技术,计算菌丝总长度和菌丝平均生长单位,表明过高的搅拌速度会打断菌丝,造成机械损伤,明显降低产率。更换80m3生产罐搅拌桨之后,降低了剪切作用,大罐的发酵效价提高了33.3%,达到22926.8μg/m l。

利用神经网络预测头孢菌素C的生物合成

利用头孢菌素C发酵过程积累的数据,建立BP神经网络预估模型,实现以发酵前期的菌浓和pH对效价的预测,将此模型应用于生产实际,分别通过倒种和改变培养基中碳源组成的方法,使头孢菌素C的合成水平分别提高了11.8%和15.7%,表明模型具有较好的预测功能。

头孢菌素C发酵过程代谢特性

考察了头孢菌素C的发酵过程特征，对发酵过程的重要生理参数DO、CER、OUR、RQ等进行了在线检测和相关分析，并分析了比生长速率和比产物生成速率的变化规律。在发酵过程中0UR、CER最高分别达到了90．2 mol／（m^3·h）和69．8 mol／（m^3·h），表明头孢菌素C发酵代谢强度很大，对氧的需求量也非常大。比产物生成速率在发酵60～100h最高达到2．15U／（h·g）（细胞干重）。同时分析了头孢菌素C发酵过程中甲硫氨酸代谢规律，表明维持培养基中一定浓度的甲硫氨酸对头孢菌素C的合成有促进作用。通过对三级发酵和四级发酵的比较，表明在现有的设备和工艺条件下，三级发酵生产头孢菌素C要优于四级发酵，同时通过控制发酵前期菌丝浓度可获得最大产素水平。

聚-γ-谷氨酸对烟草种子萌发及苗期生长的影响

用不同浓度聚-γ-谷氨酸（γ-PGA）溶液对烟草种子进行不同时间浸种处理,通过种子发芽率、种子活力与种子酶活性的变化,筛选出γ-PGA浸种的最佳浓度和时间;还研究了不同浓度γ-PGA溶液灌根对烟草苗期生长的影响。结果表明,用0.10～0.30 g/L的γ-PGA溶液浸种1～3 d可以提高烟草种子的发芽率、种子活力,缩短出苗时间。处理后的种子淀粉酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性与对照相比均有不同程度的提高,以0.20g/L的γ-PGA溶液处理种子1 d效果最好。灌根试验表明,烟草苗期生长的最适γ-PGA浓度也为0.20 g/L。

绿僵菌分解昆虫外壳蛋白酶MAP-21的纯化与特性

以蝉蜕为底物诱导绿僵菌产生分解昆虫外壳蛋白酶。发酵液经超滤、UltrogelAcA54凝胶层析、制备IEF电泳 ,纯化了一种蛋白酶MAP - 2 1 ,SDS -PAGE电泳后经银染色呈单带。该酶的Mr为 2 7kD左右 ,pI为 7 6。它的特异识别氨基酸为Arg,其活性可被PMSF和TLCK抑制 ,表明其活性中心有Ser和His残基。它还可被胰蛋白酶的典型抑制剂Leu peptin、Antipain及STI等所抑制 ,而胰凝乳蛋白酶抑制剂TPCK和胰凝乳弹性蛋白酶抑制剂TEI对其活性无影响。专一底物和抑制剂特性试验结果表明MAP - 2 1是类胰蛋白酶。此外 ,该酶还可被EDTA所抑制 ,表明金属离子为其活性所必需。另外还研究了MAP - 2 1的最适作用温度和 pH ,以及温度耐受性等特性。

菌丝形态分化与头孢菌素C合成的关系

利用显微图像分析法对顶头孢霉菌的菌丝形态进行了定量研究,并统计分析了头孢菌素C发酵过程中的菌丝形态的变化规律,具体对菌丝长度、菌丝宽度和菌丝生长单位进行了定量分析,分析了菌丝形态分化与头孢菌素C合成的关系。研究表明头孢菌素C的合成是在细长菌丝分化成膨大菌丝片段后才启动的,头孢菌素C可能主要是在膨大菌丝分化成节孢子的过程中被合成。

溶氧对地衣芽孢杆菌DW2合成杆菌肽的影响

本文研究了3L发酵罐中不同供氧水平对地衣芽孢杆菌发酵杆菌肽的影响。结果表明,地衣芽孢杆菌DW2发酵杆菌肽的总效价和A组分比例随发酵搅拌转速或通风比的提高而增加;通过比较发酵溶氧水平分别为20%和5%的杆菌肽发酵过程,初步探讨了溶氧对杆菌肽发酵的影响机制。控制发酵液溶氧20%以上,发酵液中的丙酮酸,柠檬酸和α-酮戊二酸等有机酸浓度都高于5%溶氧水平的,说明高溶氧强化了菌体EMP途径和TCA循环;分析发酵液中的Glu、Asn、His、Ile、Lys和Asp等杆菌肽组成性氨基酸浓度,都高于5%溶氧水平的,说明高溶氧还通过促进氨基酸代谢提高杆菌肽效价。

高效液相色谱法测定烟叶中的总茄尼醇

为了简化烟叶样品前处理步骤,采用正己烷直接萃取烟叶样品得到烟叶的正己烷萃取液,利用KOH水溶液对正己烷萃取液直接进行油水两相皂化,再采用高效液相色谱法测定皂化后萃取液中的茄尼醇浓度。结果表明：①萃取温度65℃,萃取时间24 h,KOH水溶液浓度0.01 mol/L,皂化时间0.5 h时,萃取效率较好,皂化转化率较高;②茄尼醇的质量浓度范围为2.125-34.000 mg/L时,峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.99998;③平均回收率为97.6%,相对标准偏差（RSD）为2.7%（n=3）。表明该方法快速、简便、准确。

杀青工艺对杜仲绿茶活性成分的影响

探讨了杀青工艺对杜仲绿茶活性成分的影响,结果表明:1)杜仲鲜叶直接采用复干机杀青有利于减少活性成分的损失;2)低温短时杀青利于活性成分的保留,杀青条件以100℃、3min最佳。

绿僵菌降解寄主表皮的蛋白酶同工酶研究

研究了不同碳氮源对金龟子绿僵菌（ Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ） 产生与分解昆虫外壳相关的蛋白酶活性和同工酶谱带的影响． 结果表明：蝉蜕、虻虫壳、蝇蛆壳、蚕蛹壳、虾壳、胶体几丁质均可使金龟子绿僵菌产生蛋白酶，虾壳和胶体几丁质所产生的蛋白酶比活性最高，蝉蜕次之． 但蛋白酶总活性以蝉蜕最高，虻虫壳次之．样品经等电聚焦电泳后，印迹于Ｘ光片上，显示蛋白酶同工酶，蝉蜕和蚕蛹壳产生的蛋白酶同工酶谱带最丰富． 以蝉蜕为唯一碳氮源时，金龟子绿僵菌产生蛋白酶的最佳条件为２６℃、初始ｐＨ６．０ 、最终孢子浓度ｎ＝ １×１０７ｍＬ－１ ．

复合酶处理废次烟末制备烟草浸膏

对果胶酶、纤维素酶、α-淀粉酶和中性蛋白酶4种酶的复合酶处理废次烟末制备烟草浸膏的工艺进行了研究,对酶添加量、作用时间、作用温度和作用pH进行了优化。结果表明,优化条件果胶酶、纤维素酶、α-淀粉酶和中性蛋白酶的添加量分别为0.05%、0.15%、0.05%、0.05%,处理温度50℃,处理时间1 h,pH自然。与对照相比,酶法处理后制备的浸膏烟气浓度和劲头明显增加,烟气柔和细腻,有润感和甜感,喉部和鼻腔无刺激,烟香丰富,有烘烤香和果甜香。处理后的浸膏中还原糖含量增加了123%,氨基酸含量增加了74%,蛋白质含量变化不大。GC/MS分析表明,酶处理后对烟草香气有重要贡献的物质如茄酮、巨豆三烯酮、3-羟基-β-大马酮、紫罗兰醇以及紫罗兰酮等物质含量均有所增加,且非酶促棕色化反应产物5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮、3,5-二羟基-2-甲基-4(H)吡喃-4-酮、2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)吡喃-4-酮及2,6-二甲基-4-硫代呋喃酮等含量也明显提高。

不同品种烟叶碘值吸光度值与评吸质量的相关性分析

测定了72个烟叶样品的碘值吸光度值,并分析了不同品种、年份、产区烟叶的碘值吸光度值的差异,结果表明:不同产地烟叶样品的碘值吸光度值集中在4～12之间,且烟叶碘值吸光度值变异系数不大;烤烟和白肋烟不同品种烟叶的碘值吸光度值差异极显著,且烟叶等级越高,烟叶碘值吸光度值越高;2006～2008年不同产区间碘值吸光度值差异显著,且烟叶碘值吸光度值随陈化时间的延长呈现增加趋势;烟叶碘值吸光度值与香气质、浓度显著正相关,与香气量、劲头显著负相关。

杀青工艺对杜仲绿茶感官品质的影响

以不同的杀青方式,探讨了杀青工艺对杜仲绿茶感官品质的影响,结果表明:杜仲绿茶以鲜叶直接采用复干机杀青的感官品质最佳;杀青条件以125℃、3min的处理形成的杜仲绿茶感官品质最好。

高效液相色谱法直接测定谷物中亚油酸含量

建立了未衍生高效液相色谱法测定谷物中亚油酸 (LA)的方法 .采用C8反相柱 ,以乙腈∶四氢呋喃∶水 (含0 .4%HAC) =6 2∶3∶35为流动相 ,示差折光检测器检测 ,测定了同一批谷物中LA含量为 3.16 % ,标准偏差 0 .13,变异系数 4.13% ,回收率为 93.92 %～ 96 .2 2 % .方法快速。

杜仲茶开发现状

杜仲茶是我国特种茶的一种。本文介绍了杜仲茶的产品开发现状 ,生产现状以及发展前景。

微生物转化雄甾-4-烯-3,17-双酮的菌种筛选和转化条件的初步研究

雄甾-4-烯-3,17-双酮(简称4AD)是甾体药物的重要中间产物,其11α羟化产物可制成治疗心血管疾病的药物。通过对30株不同种属真菌转化4AD能力的筛选,获得球孢白僵菌(Beauveria bassiana)QY2A对4AD有高效C11α羟化能力,得到目标产物C11α-羟基雄甾-3,17-双酮(简称11α-OH-4AD)。另对该菌株的转化条件进行优化,结果表明:初始pH值6.0,温度28℃,转速180r/min,转化时间60h,助溶剂甲醇终浓度和底物浓度分别为2.5%和2.5g/L时,11α-OH-4AD的转化率为65%,比未优化的转化率提高了51.2%。

聚γ-谷氨酸高产菌的选育与培养基优化

利用合成培养基为筛选培养基,以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B6-1为出发菌株,经过三轮紫外线诱变和一轮硫酸二乙酯诱变得到了聚γ-谷氨酸高产突变株枯草芽孢杆菌W003,摇瓶液体发酵的聚γ-谷氨酸产量由出发菌株的10.9g/L提高到20.5g/L。单因素实验结果表明,该菌产聚γ-谷氨酸的合适碳源为葡萄糖,氮源为硫酸铵。通过正交实验得到了优化的培养基配方,经36h液体发酵,聚γ-谷氨酸产量可达到45.3g/L。

一株烟草青枯病生防菌的筛选鉴定及其发酵优化

以烟草青枯病原菌[茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)]为筛选指示菌,采用平板共培养初筛和发酵上清滤液复筛的方法,筛选到烟草青枯病拮抗菌株XLA03,其抑菌圈直径为13.74 mm;经16S rDNA鉴定,菌株XLA03为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。由单因素试验和正交试验优化得到了菌株XLA03生物量较高的摇瓶发酵培养基配方为玉米淀粉15.0 g/L、豆粕50.0 g/L、K2HPO4·3H2O 1.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.75 g/L、MnSO4·H2O 0.010 g/L;培养条件为起始pH 7.0,接种量1%,装液量20 mL/250 mL。

油菜秸秆纤维素降解菌的筛选及复合菌剂的降解特性

从土壤、腐烂的木桩和成品肥料中筛选高效降解油菜秸秆纤维素的菌株,并通过正交试验对菌种进行复配组合,筛选出一组高效降解油菜秸秆的复合菌剂,其羧甲基纤维素(CMC)酶活性为12 704.3U/g,滤纸(FP)酶活性为1 227.7 U/g,秸秆失重率为25.65%,初步鉴定该菌剂组成为地衣芽孢杆菌B4、链霉菌A8、米根霉M3和木霉X1。采用此复合菌剂以油菜秸秆粉为降解原料进行14 d的发酵,纤维素降解率为33.10%,半纤维素降解率为23.70%,相比于不加菌剂的对照组,自制菌剂的纤维素、半纤维素降解率分别提高了24.50%和15.60%。