不同氮含量对大球盖菇菌丝生长和碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响

通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量为0.6%时,菌丝生长速度最快。在实验范围内,对照(氮含量为0)的亚硝酸盐还原酶活性较高,1.2%氮含量的天冬酰胺合成酶活性较高,0.6%氮含量的谷氨酸合酶活性最高;0.6%氮含量的内切β-1,4-葡聚糖酶活性最高,β-1,3-葡聚糖酶活性较高;0.6%氮含量的谷氨酸合酶基因表达量最高,1.2%氮含量的谷氨酸脱氢酶基因表达量较高;对照的β-1,3-葡聚糖酶基因和半纤维素酶基因表达量均最高。研究结果可为大球盖菇液体菌种开发和应用提供参考。

浸提叶面分泌物对烤烟品质的影响

为了研究叶面分泌物对烤烟品质的贡献,以K326为材料,采用半叶法,对成熟期烤烟进行叶面分泌物的浸提,并进行外观品质、中性香味成分分析和评吸验证。结果表明,叶面分泌物的缺失对烤烟外观品质产生了负面影响。浸提后样品中的中性香味成分含量与对照相比都有不程度的降低,但甲苯、糠醛和糠醇3种成分的含量却有所增加。此外,浸提样的香气质、香气量、浓度、杂气和余味等指标不及对照,将浸提物还原到被浸提烟样叶面,香味并不能完全恢复。

临沧市双江县植烟区域气候特征分析及风险评价

为揭示双江县烤烟生产的气候特征和风险度,以1990─2014年气象数据为材料,分析了云南临沧双江县近25年的气候变化趋势,并对气候因子在烟草生产中的风险度进行了评估。结果表明:双江县大田期降雨量和相对湿度呈平稳下降的趋势,烤烟伸根期、旺长期和成熟期的日照时数,以及≥10℃有效积温、平均气温和可用时间则呈缓慢上升趋势。大田期降雨量和相对湿度平均值分别为783.0 mm和77.1%,烤烟伸根期、旺长期和成熟期的日照时数平均值分别为188.5 h、122.6 h和275.7 h,大田期≥10℃有效积温、气温和可用时间平均值分别为2 953.1℃、23.0℃和226.4 d。旺长期降雨量、大田期日照时数风险度和气候总风险度较高,年份间波动较大,并呈缓慢降低的趋势。双江县烤烟生长的重要时期为旺长期和成熟期,其主要的气候限制因子是降雨量和日照时数。不同区域的烟草旺长期降雨量、大田期日照时数风险度和气候总风险度差异较大,邦丙乡的气候总风险度主要受降雨量影响,大文乡和忙糯乡主要受日照时数和降雨量的共同影响。

不同移栽期对临沧烤烟品质的影响

为了确定临沧市双江县烟区适宜的烤烟移栽期,提升烟叶品质,在临沧市双江县进行了不同移栽期(5月1日前后2 d、5月7日前后2 d、5月15日前后2 d)对烤烟生长发育、经济性状和品质的影响研究。结果表明:随移栽期推后,烤烟封顶后烟株农艺性状、经济性状与烟叶品质均下降,表现为株高降低,平均叶面积变小,上等烟比例和均价下降;烟叶常规化学成分的综合评价指数变化不明显,上、中、下各部位烟叶感官质量下降。结合当地的生产实际综合分析,在5月1日前后移栽,烟叶产量较高,品质最优。

景东烟区生态因素与烤烟质量特点分析

为了探讨景东烟区生态因素与烤烟质量之间的关系,主要对云南景东烟区的植烟气候因素、土壤养分状况以及所产烤烟的质量特点进行了分析。结果表明:景东烟区具有无霜期长,大田期气温适宜,光照充足,降雨充沛,雨热同步等特点;植烟土壤pH值适宜,有机质含量较丰富,具有较强的保肥能力,土壤碱解氮含量高,速效磷、钾含量适中;交换镁含量较高,速效锌、硼含量缺乏。烤烟外观质量较好,香气量较足、香气质较好,燃烧性强,但在化学成分间的协调性方面不及津巴布韦烤烟。

二次分选对湖南烤烟可用性的影响

为分析二次分选对烤烟等级合格率和烟叶质量的影响,在复烤前对采购的湖南产区3个等级烟叶进行二次分选,并对分选前后的烟叶等级合格率、杂物、化学成分和感官质量进行了对比分析。结果表明:二次分选可显著提高烟叶的等级合格率,3个等级合格率分别提高了22.0%、19.8%和20.2%;杂物含量则明显降低,3个等级分别降低了90.72%、91.35%和91.42%;二次分选使烟叶的化学成分更趋协调,感官质量有不同程度提高。由此得出,二次分选可以提高烟叶的工业可用性。

不同生态区烟草叶片蛋白质组学的比较

为探讨不同生态区烟叶香气风格形成的机理,应用蛋白质双向电泳联用质谱技术,对河南平顶山(浓香型烟叶的典型生态区)和福建龙岩(清香型烟叶的典型生态区)的烟草(Nicotina tobaccum L.cv.K326)叶片蛋白质组成进行了比较研究。结果发现,51个蛋白质在两个生态区发生了差异表达,其中在河南表达量上升的有15个,在福建表达量上升的有25个。另外,还分别有2个和9个蛋白点为在河南和在福建样品中特异表达。采用MALDI-TOF/MS进行肽质量指纹图谱分析,经MSDB、NCBInr和SwissPort数据库查询,共鉴定出25种蛋白质,其中参与叶绿体发育、色素代谢、光合作用相关的蛋白在福建烟区高表达,与糖酵解途径相关的蛋白质在河南烟区中高表达。另外,在两生态区烟叶中都发现有相当数量的特异表达的抗逆和防御蛋白。首次在蛋白质组学水平对不同香气风格烟叶的形成机理进行了探讨。

水分胁迫对烤烟腺毛超微结构的影响

采用透射电子显微镜技术,研究了水分胁迫下烤烟叶片腺毛腺头细胞超微结构的变化。正常灌水条件下,腺头细胞细胞器丰富,细胞质浓厚,液泡中存在电子致密度高的黑色嗜锇颗粒;轻度干旱情况下,腺头细胞中细胞器含量较少,液泡也相应增大,电子致密度高的黑色嗜锇物质有增多趋势;干旱情况下,腺头细胞中细胞器极少,细胞质极少或无,电子致密度高的黑色嗜锇物质较多,有些腺头细胞内部已基本降解。结果表明水分丰缺对腺毛的超微结构有较大影响。

施肥对烟草腺毛叶绿体形态结构的影响

以烤烟K326为材料,在盆栽条件下分别施用纯有机肥和无机肥,在烟株旺长期和成熟期对叶面腺毛进行显微和超微结构观察,以明确肥料对烟草叶面腺毛生长发育的影响,结果显示:移栽后50d,荧光下观察有机肥处理下腺头细胞叶绿素荧光强度较无机肥强烈,腺头细胞内叶绿体结构完整,类囊体基粒片层发达,嗜锇颗粒大而多;无机肥处理的细胞内叶绿体少,嗜锇颗粒较小,数量也较少.移栽后70d,有机肥处理腺毛头细胞叶绿体双层膜结构依然完整,但类囊体基粒片层结构已经解体,其中积累大量黑色嗜锇颗粒;此时无机肥处理腺毛头细胞叶绿体结构完整,仍可清晰看到类囊体基粒片层仅含少量嗜锇颗粒.推测有机肥处理在初期促进了烟草腺毛细胞叶绿体的发育和叶绿素的合成、积累,在后期,促进叶绿素及内膜系统的降解,并有利于亲脂类物质的合成和积累,从而对腺毛分泌物积累和烟叶香气品质形成具有积极影响.

不同生态区烟草的叶面腺毛基因表达

利用cDNA芯片技术,对同一烟草品种(Nicotina tabacum L cv.K326)、不同生态区(典型的浓香型烟区-河南平顶山,典型的清香型烟区-云南玉溪)、同一叶位(中部叶)、相同叶龄(60 d)的叶片腺毛基因表达谱进行了比较研究,共发现有效差异表达基因445个。其中,与光合色素代谢、光合作用以及类萜生物合成相关基因在河南烟叶腺毛中高表达,与碳水化合物、蛋白质分解代谢过程相关的基因在云南烟叶腺毛中高表达;防御过程相关基因在两生态区均有高表达。该结果表明,烟草叶面腺毛的基因表达水平受到生态因素的调控,生态因素有可能通过影响腺毛的物质代谢和分泌,从而对烟叶风格形成产生一定的影响。

云南新烟区烟叶主要化学成分特征及其与评吸质量的关系

【目的】分析评价云南新烟区烟叶的主要化学成分特征,为掌握当地烟叶质量特点及提高工业可用性提供参考。【方法】采集2011—2018年文山广南、普洱景东和临沧双江3个县区上、中、下3个部位烟叶B2F、C3F、X2F样品288份,测定烟叶中的主要化学成分,并对其与卷烟质量的关系进行分析。【结果】2011—2018年文山广南、普洱景东和临沧双江3个县区上、中、下3个部位烟叶的氯含量总体偏低,有41.92%的中部样品还原糖含量超过26%,有33.33%的上部样品烟碱含量超过3.5%,中部烟叶样品还原糖含量偏高、上部烟叶烟碱含量偏高是影响新烟区3个植烟县化学成分协调性的主要因素。2011—2018年3个植烟县烟叶的钾含量和氯含量相对稳定。2013年以来,中、上部烟叶总糖和还原糖含量主要表现为上升趋势,增幅最大达到16.02%,烟碱和总氮含量则总体呈下降趋势,降幅最大达到22.07%。灰色关联分析结果表明,在试验范围内对烟叶感官评吸质量总分影响最大的化学成分指标为总氮和还原糖含量。【结论】云南新烟区3个植烟县烟叶主要化学成分特征差异明显,在双江地区控制烟叶还原糖含量、适当提高总氮含量有助于提高烟叶品质,在广南地区则应从控制烟叶总氮和烟碱含量方面改善烟叶化学成分协调性。

烟草腺毛发育过程中叶绿体形态学研究

应用荧光显微技术和电镜技术,对不同发育时期烟草叶面腺毛的叶绿素荧光和叶绿体结构进行了比较研究.结果发现,在腺毛发育初期,腺头细胞叶绿素荧光明显,叶绿体类囊体结构清晰;随着腺头细胞的分裂和生长,叶绿素荧光逐渐增强,叶绿体数目逐渐增多,类囊体发达,嗜锇颗粒产生;在腺毛发育成熟以后,叶绿素荧光减弱,类囊体膜降解,嗜锇颗粒增多;随着腺毛的分泌活动增强,叶绿体完全降解,磷脂双层膜消失,嗜锇颗粒扩散到细胞质中,并最终聚集在细胞质膜附近.

烟草腺毛全长cDNA文库的构建

冻刷法收集烟草品种K326腺毛组织。Trizol法提取总RNA，采用SMART技术构建了烟草腺毛的全长cDNA文库．经鉴定表明，文库滴度为1．01×10^4pfu／mL。重组率为99．5％．随机选择24个阳性克隆进行插入片段测序，结果显示，插入片段长度在800～1000bp之间。将测得的序列进行Unigene归并和序列全长分析，得到了23条Unigene。21条序列有相关同源信息，其中14条为全长，完整性比率达到66．7％．结果表明，文库质量较好，可用于下一步基因克隆及基因表达谱的研究．

烟草腺毛发育的形态学研究

采用显微技术,对不同发育时期烟草叶面腺毛的形态变化和超微结构进行了观察,将腺毛发育过程划分为生长期、成熟期和分泌期3个阶段。生长期腺毛进行旺盛的细胞生长和分裂活动,细胞质浓厚,线粒体叶绿体丰富,基粒片层清晰;成熟期腺毛形态发育完成,细胞数目稳定,叶绿体内基粒片层消失,嗜锇颗粒逐渐增多、增大,表明细胞开始进行活跃的物质合成和转化;分泌期腺毛细胞黏性增大,叶绿体降解,嗜锇颗粒进入细胞质并转运至液泡中积累,细胞开始降解,细胞质稀薄,大量嗜锇物质聚集在质膜附近。

烟草水肥耦合的研究进展

综述了烟田水肥效应关系,水肥对烟草生长发育、生理特性、产量的影响,不同水肥条件对作物水分利用效率(WUE)的影响,水肥对烟田生态环境和土壤养分时空变异的影响以及水肥耦合模型等研究进展情况,指出今后烟草水肥耦合研究方向和重点。

不同烤烟品种在云南景东的适应性研究

为筛选出适宜云南景东烟区种植的烤烟品种,将4个品种‘云烟85’、‘云烟87’、‘云烟97’、KRK26,以当地主栽品种K326为对照进行同田对比试验。结果表明:(1)KRK26总体表现为苗期、大田期长势较强,经济性状较好,钾含量较,植株较高、节距较稀、叶片较宽、现蕾较晚、大田生育期较长、抗倒伏和抗黑胫病的能力较弱、原烟叶片偏薄等特点。(2)‘云烟87’综合经济性状最好,产量、产值最高,级指、均价、上等烟比例较高。

云南罗平烤烟主要香气物质的区域差异分析

对罗平C3F等级烟叶的主要香气物质进行了研究。结果表明,中性香气物质南部烟区总量最高,超过北部和中部烟区及罗平县的平均值,北部烟区中性香气物质总量最少。3个烟区有机酸总量差异不大。北部烟区和南部烟区的多酚总量要高于中部烟区,北部烟区和南部烟区差别不大。经过对比,在所检测到的6类24种香气物质中,罗平C3F等级烟叶的多数香气物质含量明显高于云南和津巴布韦烟叶平均值。

4个烤烟品种的比较试验

对烤烟品种云烟87、云烟97、K326和中烟104进行比较试验。结果表明,云烟87表现最好,既有较高的产量和产值,也有最好的烟叶品质;K326具有较好的化学成分协调性和吸食品质,上等烟比例较高,中上部烟叶含梗率相对较低;中烟104虽外观质量较好,产量产值较高,烟叶含梗率较低,但上等烟比例较低,上部烟叶总植物碱超标严重,烟叶吸食品质相对较差;云烟97综合表现最差,烟叶产量产值较低,化学成分协调性较差,烟叶吸食品质相对较差。

水分胁迫对烤烟腺毛形态发育及基因表达的影响

以盆栽烤烟K326为材料,研究了在不同灌水条件下,烟叶生长发育过程中腺毛腺头形态发育的变化,以及土壤水分对成熟期烟草腺毛基因表达的影响。采用荧光电子显微镜观察腺毛发现:水分胁迫使得腺头细胞正常的生长-成熟-分泌周期缩短。表达谱基因芯片杂交结果:共发现有效差异表达(ratio值≥2或≤0.5)的基因75个,其中上调差异基因47个,主要集中在抗性相关基因15个,碳代谢相关基因7个,功能未知基因10个;下调差异基因28个,主要集中在次生代谢相关基因6个,碳代谢相关基因4个,功能未知基因11个。

临沧双江高中海拔地区烤烟追肥方案的优选

为探明临沧双江高、中海拔地区烤烟生产最佳追肥方案,采用田间小区试验,研究了不同追肥次数、时间和追肥比例对高、中海拔地区烤烟农艺性状、经济性状、化学成分和感官质量的影响。结果表明,2次追肥,追肥结束期早(栽后15 d)有利于烟株生长前期早生快发,追肥结束期晚(栽后25 d)或增加追肥次数能提高烟叶上等烟比例、产量、产值和烟叶抽吸品质。Ta3处理,即2次追肥,分别在移栽后7 d,移栽后25 d施用,追肥比例为3∶7,为临沧双江高海拔地区最佳追肥方案;Tb4处理,即3次追肥,分别在移栽后7 d,移栽后15 d,揭膜当天施用,追肥比例为2∶6∶2,为临沧双江中海拔地区最佳追肥方案。