固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定牛奶中辛基酚和正辛基酚

建立了牛奶中辛基酚和正辛基酚的液相色谱-串联三重四极杆质谱测定方法。样品经氨水乙腈(1∶9,体积比)溶解,超声提取,PRiME HLB固相萃取柱净化后,经安捷伦Poroshell 120 PFP色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm)分离,采用多反应监测负离子模式监测,内标法定量。在该优化条件下,牛奶中辛基酚和正辛基酚定量限均为2.0μg/kg,在2.0,4.0,10.0μg/kg 3个加标水平下,平均方法回收率在88.1%~100.4%之间,平均相对标准偏差范围为3.48%~7.29%(n=6)。此方法的准确性和重复性良好,适用于牛奶中辛基酚和正辛基酚残留的检测。

中国乙肝病毒核酸检测试剂盒现状

我国是乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)的高发区,应用核酸扩增技术对HBV核酸生物标志物进行定量检测是HBV诊断和治疗监测中的重要方法。然而,目前我国市场上的商业化HBV核酸检测的试剂盒很多,有必要对不同厂商生产的乙肝病毒核酸检测试剂盒进行评价和分析。本文对乙肝病毒核酸检测方法、乙肝病毒核酸检测试剂盒现状和比较分析等方面作一介绍,以供试剂盒使用者和研发者参考。

固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶中双酚A、双酚F和双酚S

为建立同时测定牛奶中双酚A、双酚F和双酚S含量的液相色谱-串联三重四极杆质谱联用方法,将样品用氨水∶乙腈溶液(1∶9,体积比)溶解,超声提取,PRiME HLB固相萃取柱净化,用安捷伦Poroshell 120 PFP色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm)分离,采用负离子多反应监测模式监测,内标法定量。在此优化条件下,牛奶中双酚A、双酚F和双酚S的定量限均为2.0μg/kg,平均方法回收率在90.4%~103.1%范围,平均相对标准偏差为2.76%~7.34%(n=6)。此方法的准确性和重复性良好,适用于牛奶中双酚A、双酚F和双酚S含量的检测。

实时荧光PCR鉴定婴幼儿配方食品中克罗诺杆菌的研究

目的建立一种能够快速准确鉴定克罗诺杆菌的实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,并对食品样品和人工污染样品进行克罗诺杆菌检验。方法根据克罗诺杆菌DNA旋转酶B亚基(gyrB)基因保守区序列设计引物和探针。通过特异性试验、绝对灵敏度、相对灵敏性试验、抗干扰试验对所建立方法进行方法学验证。采用人工污染样品增菌液进行方法灵敏度试验。结果本研究建立的方法能够特异性扩增7种克罗诺杆菌,但对与其亲缘关系较近的其他肠杆菌及食品中较为常见的其他致病菌均无扩增,表明本研究建立的方法具有很好的特异性和抗干扰能力。采用阪崎克罗诺杆菌验证绝对灵敏度达1~10 pg,相对灵敏度可以达到10^(3)CFU/mL。在基因组水平和培养物水平均具有很好的抗干扰能力。人工污染样品在36℃增菌24 h后检测灵敏度可以达到10^(0)CFU/mL。结论本研究所建立的实时荧光PCR方法对婴幼儿配方食品样品中的克罗诺杆菌的检测具有快速、特异、灵敏和稳定的特点,可以为传统婴幼儿配方食品中的克罗诺杆菌的检验提供技术参考。

利用Real-time PCR技术分离鉴定酸乳中的乳双歧杆菌(Bifidobacterium Animalis Subsp.Lactis)

目的:利用Real-time PCR建立酸乳中乳双歧杆菌的快速精准鉴定方法。方法:选取乳双歧杆菌atpD基因,利用Primer Express 3.0.1设计引物探针,进而验证引物探针的特异性、灵敏度和抗干扰能力,最后应用到17种酸乳样品的检测。结果:所设计的引物探针可以有效地扩增出乳双歧杆菌,而对于20种乳酸菌和18种常见的致病菌都不能扩增,具有良好的特异性;其灵敏度在DNA水平可以达到1 pg/μL,在菌浓度水平可以达到10^(3)cfu/mL;并且不受酸乳中的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的干扰,具有很好的抗干扰能力。利用RT-PCR技术能很好地鉴定17种酸乳中乳双歧杆菌。结论:该研究建立了酸乳中快速精准鉴定乳双歧杆菌的方法,对食品中双歧杆菌鉴定起到积极推动作用。