玉米地方品种B染色体鉴定及其核型分析

以四川省、云南省、贵州省和重庆市的50个玉米地方品种为试验材料,采用根尖染色体压片技术,分析玉米地方品种的主要核型参数及B染色体的形态特征。结果表明,在50个玉米地方品种中,有16个有B染色体,占供试材料的32%。在50×30×5个分裂相(指50个品种,每个品种取30张装片,每张装片设5个镜像)细胞中,发现185个细胞含有B染色体,占观察细胞总数的2. 47%。玉米地方品种的B染色体较常染色体短,平均长度为2. 56μm。核型分析结果表明,没有B染色体和有B染色体的玉米地方品种1～10号染色体相对长度均依次为14%、12%、11%、11%、10%、9%、9%、8%、8%、7%。对没有B染色体和有B染色体的玉米地方品种的10对染色体相对长度分别进行t检验,检验结果均不显著,说明B染色体的存在对常染色体核型无明显影响。

玉米B染色体显微分离技术

染色体分离是连接细胞遗传学和分子生物学的桥梁技术。本研究以含B染色体的玉米地方品种‘DP11’和自交系‘B73’为材料,通过滴片技术制作染色体制片,采用微玻璃针法显微分离制片中的玉米B染色体。结果表明,采用笑气处理时间2 h、冰乙酸固定时间2 h、酶解时间6 h和滴片距离35 cm的处理技术可制备染色体重叠率低、分散性好且适于染色体分离的玉米B染色体制片。基于单细胞染色体数目、目标染色体的形态大小,在光学显微镜下可对玉米B染色体正确地识别。借助显微操作系统,使用针尖直径为1～5μm的微玻璃针,载物台与微玻璃针针尖呈15°和45°的角度,均可实现玉米B染色体的成功分离。分离玉米B染色体为深化其分子生物学及起源进化研究提供了物质技术依据。