紫象草原花青素的大孔吸附树脂纯化、平均聚合度及体外抗氧化活性测定

试验旨在利用大孔吸附树脂获得紫象草原花青素粗提物的纯化条件,并探究在此条件下获得纯化物的平均聚合度和体外抗氧化活性。试验采用单因素试验设计,通过比较3种大孔吸附树脂D101、HP-20、ADS-17的吸附与解吸特性,选择最优吸附树脂类型,对紫象草原花青素粗提物进行洗脱浓度、上样体积和洗脱体积的筛选,之后利用静态和动态吸附与解吸试验确定纯化条件,制备紫象草原花青素纯化物;采用盐酸-香草醛法测定纯化物原花青素的平均聚合度及其对1,1-二苯基-2三硝基肼(DPPH·)和羟自由基(·OH)的体外清除率。结果表明:采用φ2.6 cm×30.0 cm玻璃层析柱,选择D101型大孔吸附树脂、90%(V/V)浓度乙醇为洗脱剂,上样体积480 mL,洗脱体积155 mL时纯化效果较好,纯化后原花青素B2含量由纯化前10.01 mg/g提升至13.82 mg/g,提升了36.06%;紫象草原花青素粗提物经乙酸乙酯萃取后,获得水相和乙酸乙酯相的平均聚合度分别为26.87、13.63,纯化物的平均聚合度为14.67。当紫象草原花青素纯化物质量浓度为100 mg/mL时,DPPH·、·OH清除能力分别为99.55%、97.72%,相当于1 mg/mL维生素C,并且紫象草原花青素纯化物体外抗氧化活性显著高于粗提物(P<0.05)。综上所述,试验获得了大孔吸附树脂纯化紫象草原花青素的条件,纯化处理基本不影响原花青素提取物的平均聚合度,并发现原花青素纯化物具有良好的体外抗氧化活性。

紫象草原花青素提取物的制备条件优化和体外抗氧化活性研究

本试验旨在探究紫象草原花青素提取物的最佳制备条件,建立快速灵敏测定提取物含量的方法,并研究其体外抗氧化活性。首先建立对-(二甲基氨基)肉桂醛(DMAC)测定紫象草原花青素提取物含量的方法,在此基础上进行提取条件的单因素筛选试验,并对料液比、提取温度、提取时间3个因素进行响应面优化,探究最优参数。按照最优参数制备紫象草原花青素提取物并测定其对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)的体外清除率。结果表明:紫象草原花青素提取物的最优制备条件参数为料液比1∶110 (g/mL)、提取温度55℃、提取时间60 min,提取得到原花青素B2含量为5.06 mg/g。紫象草原花青素提取物浓度为200 mg/mL时对ABTS·、DPPH·清除率分别为95.69%、96.79%,浓度为25 mg/mL时,对OH·清除率为90.04%。综上所述,本试验建立了一种实验室快速、灵敏测定紫象草原花青素提取物含量的方法,通过响应面法优化提取条件制备的原花青素提取物具有较好的体外抗氧化活性。