墨江蜈蚣与少棘蜈蚣的比较研究──Ⅱ．药效和毒理

本文比较了墨江蜈蚣与少棘蜈蚣的药效学和毒理学作用，实验包括抗惊厥试验、对致病性真菌和细菌体外生长的影响、急性毒性试验和染色体畸变实验等。结果两种蜈蚣的３％醋酸提取液对所试的真菌有抑制作用但无杀真菌作用，而对细菌无抑制作用。两种蜈蚣的毒性很低，在给小鼠５０ｇ／ｋｇ的剂量下都无法测出ＬＤ５０。在２０５ｍｇ／ｋｇ条件下的致突变率与未给药的突变率接近，表明两者都无遗传毒性。

墨江蜈蚣与少棘蜈蚣的比较研究──Ⅰ．化学组成

本文对墨江蜈蚣（ＳｃｏｌｏｐｅｎｄｒａｍｏｊａｎｇｉｃａＺｈａｎｇｅｔＣｈｉ）与少棘蜈蚣（ＳｃｏｔｏｐｅｎｄｒａｓｕｂｓｐｉｎｉｐｅｓｍｕｔｉｌａｎｓＬ．Ｋｏｃｈ）的水分、灼烧残渣、蛋白质、游离氨基酸、微量元素和挥发性脂肪酸的含量进行了系统的测定并比较了两者间的异同性。实验结果表明：墨江蜈蚣的蛋白质、灼烧残渣、水分的含量分别为６７．２％、３．９５％和３．５９％，而少棘蜈蚣分别为６８．８％、４．８０％和３．６５％，它们的含量基本相同。游离氨基酸、挥发性脂肪酸和微量元素的相对含量也很接近，但脂类和总糖的含量差异较大。

湖南产尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素性质和溶液构象的研究

经sephadex G-75凝胶过滤、QAE-Sephadex A-50和CM-Sephadex C-25离子交换步骤,从湖南产尖吻蝮（Deinagkistrodon acutus）蛇毒中纯化出两个出血毒素,被命名为HaHT-1和HaHT-2。用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定呈单一的蛋白染色带。两个出血毒素的分子量相同,均为 23.5kDa。等电聚焦电泳测定它们的等电点分别为5.6和5.2。HaHT-1和HaHT-2均具有较强的出血活性（MHD分别为0.5和0.8μg）,都有酪蛋白水解活力,无精氨酸酯酶、胆碱酯酶和磷脂酶A_2活力。用CD谱测定HaHT-l和HaHT-2的溶液构象,HaHT-1的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为36.9％、35.5％和27.6％,而HaHT-2的α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别为23.4％、31.3％和45.3％。pH的变化对它们构象有影响,在pH2-11范围内,酸性比碱性大。随着酸性或碱性的增加其α-螺旋含量减少,无规卷曲增加,β-折叠结构变化不大。

福建产圆斑蝰蛇(Vipera russelli siamensis)蛇毒磷酯酶A的分离纯化及部分性质研究

采用羧甲基葡聚糖C-50柱层析、葡聚糖G-75凝胶过滤和二乙氨基乙基葡聚糖A-50柱层析三步分离程序,获得了一个聚丙烯酰胺凝胶盘电泳纯的毒性磷酯酶A。用葡聚糖凝胶过滤法测得分子量为18,000,用SDS-平板聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法测得分子量为15,000,用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测得等电点为7.6。纯化的毒性磷酯酶A对昆明品系小白鼠的LD;(腹腔注射)是2微克/每克体重。磷酯酶A的比活性为24微克分子/分/毫克。纯化成分的产率是1—1.2%。

大蹼铃蟾皮肤分泌液中抗菌活性肽的分离纯化及其性质

通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５、Ｇ－５０和Ｇ－２５洗脱等步骤，从云南产大蹼铃蟾（Ｂｏｍｂｉｎａｍａｘｉｍａ）皮肤分泌液中分离得到了一种有广泛抗菌活性的多肽，被命名为ＭＳＰ－Ⅶ。用快原子轰击质谱（ｆ．ａ．ｂ．ｍ．ｓ）分析其Ｍ＋／Ｚ＝２６４８，即此活性肽的分子量为２６４７Ｄ。用自动氨基酸分析仪分析，含有２６个氨基酸。抗菌实验结果表明，此多肽对格兰氏阴性和格兰氏阳性细菌以及真菌都有较强的抗菌活性。溶血实验表明此活性肽有很轻微的溶血活性。此外，ＭＳＰ－Ⅶ也可以促进平滑肌收缩和增加微血管的渗透性。

浙江产蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒纤溶组份对凝血系统的作用

用二乙氨基乙基葡聚糖A-50两次柱层析及葡聚糖凝胶过滤,从浙江产蝮蛇毒中得到一个纤溶组份。体内外试验研究表明,这一纤溶组份对纤维蛋白和纤维蛋白原均有显著的溶解作用,它也作用于第Ⅷ凝血因子和第V凝血因子。浙江产蝮蛇毒纤溶组份的这些性质与血浆素(纤维蛋白溶酶)相似,因而是一种血浆素样物质。

少棘巨蜈蚣的化学组成

在我国蜈蚣作为药用已有数百年历史,在《本草纲目》等古代及现代医药书籍中多有描述。使用者多为少棘蜈蚣。蜈蚣具有熄风解痉、消肿解毒等功效。动物实验表明对一些鼠类移植性肿瘤有抑制作用(中药研究所,1978),临床上与其它中药配伍治疗胃癌等亦收到良好效果(昌潍地区医院,1971;姜廷良,1977),对致病性皮肤真菌和结核杆菌等有很强抑制作用(周显章,1960;1957),是一种值得进一步研究的药用动物。中药的功效基于其特有的化学组成,刘应泉等(1983)曾对蜈蚣油脂的挥发成份进行分析,其它方面的组成分析尚未见正式报道。目前引用的蜈蚣化学组成数据多源于国外一些近缘种及亚种研究结果的报道,与我国少棘蜈蚣有一定差异,因此我们较系统地分析了国产少棘蜈蚣的化学组成,以期对分析其药理作用有所帮助。

尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素DaHT-3的纯化与性质

被尖吻蝮蛇咬伤会引起严重的出血,对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物的筛选.通过SephadexG-75,DEAE-SephadexA-50,SephadexG-200和两次PBE聚焦层析,从尖吻蝮蛇(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化到一个分子量为56000的出血毒素(DaHT-3),经氨基酸组成测定计算,由487个氨基酸残基组成.此成分在SDS-PAGE上显示出一条均一的蛋白染色带,用等电聚焦电泳测定,其pI为5.50.该出血成分的最小出血剂量是2.6μg,具有蛋白水解酶活力,其活力为3.68,但没有精氨酸酯酶和磷脂酶A2活力.用红外光谱仪研究DaHT-3在溶液中酰胺I带的吸收谱,该毒素含有31.8%的α螺旋、56.1%的β折叠和12.1%的转角;当加入EDTA螯合剂去除金属离子后,它们的α螺旋、β折叠、转角和无规卷曲分别变为11%、26.4%、46.2%和16.5%,而出血活力和蛋白水解酶活力均丧失。

蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch)毒的化学组成和生物活性

系统分析少棘蜈蚣粗毒的化学组成,蛋白质含量86.23％、水不溶物质0.24％、还原糖0.23％、水份2.1％,仅含Ser、Pro、Arg等三种游离氨基酸,鉴定了11种微量元素,碱性凝胶电泳显示20条蛋白质谱带。分析了10种酶的活性、出血毒性及对血小板聚集的影响,其中精氨酸酯酶活力最高,不存在类凝血酶、淀粉酶活性及出血毒性,蜈蚣毒的浓度为0.3μg/μL时强烈诱导血小板的聚集。

蝮蛇Agkistrodon halys Pallas蛇毒纤溶酶对纤维蛋白质的作用

应用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法证明蝮蛇毒纤溶酶对人体纤维蛋白原的α(A)链和β(B)链都有作用。借助酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳观察到人纤维蛋白原经蝮蛇毒纤溶酶水解后,产生一系列分子量大小不等的碎片X′、Y′、D′和E′。

墨江蜈蚣与少棘蜈蚣对致病真菌和细菌体外生长的影响

本文分析了少棘和墨江蜈蚣对8种致病真菌和7种细菌体外生长的影响。两种蜈蚣的2％NaHCO_3和蒸馏水提取液以及油脂对真菌影响极小;3％CH_3COOH 提取液强烈抑制真菌生长,但无杀菌作用,测定了相应的最小抑菌浓度(MIC)。各提取物对细菌均无抑制作用。

浙江产蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒抗凝血活酶组份对凝血系统的作用

通过二乙氨基乙基葡聚糖A-50柱层析,从浙江产蝮蛇毒中得到一个抗凝血活酶组份。这一组份在体外显著地延长血浆复钙时间和凝血酶原时间,但不延长凝血酶时间,对纤维蛋白也无溶解作用。低浓度的抗凝组份就能干扰血液凝血活酶生成和抗组织凝血活酶。家兔静脉注射抗凝组份,全血凝固时间、血浆复钙时间、凝血酶原时间和凝血酶时间均显著而短暂地延长,纤维蛋白原浓度也会突然下降至原来的20%,而优球蛋白溶解时间始终大于24小时,没有缩短现象。

五步蛇蛇毒磷脂酶A_2的纯化及部分性质

经Sephadex G-75和QAE-Sephadex A-50离子交换层析等方法,从湖南产五步蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒中纯化一种均一的酸性磷脂酶A_2。SDS-PAGE测得分子量为15.8kD,按氨基酸残基计算其分子量为14.352kD,IEF-PAGE测得等电点为5.32。氨基酸组份分析表明磷脂酶A_2分子由128个氨基酸残基组成,富含Asp和Glu,不含中性糖。PLA_2酶活性的最适温度为45℃,最适pH为8.5左右,没有抗胰蛋白酶的活性,具一定的热稳定性。K^+、Ca^(++)和Na^+离子激活,而Cd^(++)、Sn^(++)、Cu^(++)、Li^+、Hg(++)、Zn^(++)、Fe^(++)和Co^(++)离子可抑制或完全丧失酶活力。手工微量顺序分析测得PLA_2分子N-末端氨基酸为Leu。此酶对小白鼠的LD_(50)至少大于10mg/kg(ip)。

湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤，ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５离子交换层析的步骤，从湖南产尖吻蝮（Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）蛇毒中纯化出两个出血毒素（ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量均为２３．５ｋＤ，ＩＥＦ－ＰＡＧＥ测得等电点分别为５．６和５．２，两者具有相似的氨基酸组成，其中酸性氨基酸（Ａｓｘ，Ｇｌｘ）分别占２３％和２４％，ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最小出血剂量（ＭＨＤ）分别为０．５μｇ和０．８μｇ。都具蛋白水解酶活性，无对ＴＡＭＥ，ＢＡＥＥ的水解活性和ＰＬＡ２酶活性．两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关．ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最适温度分别为３５℃和４０℃，最适ｐＨ为６－９，对热均不稳定，温度高于６０℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含０．５ｍｏｌ的Ｚｎ，１ｍｏｌ的Ｃａ，较多的Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ，不含Ｃｏ。

铃蟾肽

铃蟾肽赖仞冉永禄（中国科学院昆明动物研究所，昆明６５０２２３）关键词铃蟾肽两栖类动物皮肤中富含多种与哺乳类动物调节有关的活性肽，是获取多肽的巨大储存库。铃蟾肽（Ｂｏｍｂｅｓｉｎ，ＢＮ）是１９７１年由Ｅｒｓｐａｍｅｒ和Ａｎａｓｔａｓｉ等从欧洲铃蟾Ｂ．ｂ...

湖南尖吻蝮蛇毒出血毒素的圆二色性和化学修饰

用远紫外ＣＤ谱研究了湖南产尖吻蝮蛇毒的两个出血毒素（ＤａＨＴ－１、ＤａＨＴ－２）的溶液构象，计算得ＤａＨＴ－１的α螺旋、β折叠、无规卷曲的含量分别为３６．９％、３５．５％、２７．６％；ＤａＨＴ－２的α螺旋、β折叠、无规卷曲分别为２３．４％、３１．３％、４５．３％。随ｐＨ的增大或减小，峰位蓝移，酸性条件下的变化比碱性条件下的变化大。构象单元含量计算表明：α螺旋减少，无规卷曲增多，β折叠基本未变。温度和ｐＨ对ＣＤ谱的影响相似，５０℃时峰位蓝移，α螺旋减少，无规卷曲增多．ＥＤＴＡ对ＣＤ谱影响显著，０．０２ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ便导致两个出血毒素呈极度的无序状态。ＥＤＴＡ完全抑制，半胱氨酸部分抑制，胰蛋白酶不影响它们的出血活性。

两栖类皮肤活性肽与活性生物胺

两栖类皮肤中分布了种类繁多、功能复杂的活性物质，是一巨大的活性生物分子资源库和药物资源库。本文介绍了分布于两栖类皮肤分泌液中的活性多肽和活性生物胺的种类、部分性质、它们在哺乳类中的对应物以及它们的生理和药理功能，最后介绍了它们在临床方面的应用。

尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素的纯化与部分性质

目的 被尖吻蝮蛇 （ Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎ ａｃｕｔｕｓ） 咬伤会引起严重的出血， 对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物筛选。 方法 采用 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５， Ｄ Ｅ Ａ Ｅ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０， Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２００ 和两次 Ｐ Ｂ Ｅ 聚焦层析纯化。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 电泳和等电聚焦电泳测定纯化样品的纯度和等电点。氨基酸组成用自动氨基酸分析仪测定。以小鼠背部皮下注射部位出血斑的面积来确定最小出血剂量和常规的方法测定酶活性。结果 从尖吻蝮蛇毒中纯化到一个相对分子量为５６ ０００ 的出血毒素 （ Ｄａ Ｈ Ｔ３）， 经氨基酸组成测定计算，它由 ４８７ 个氨基酸残基组成。此成分在 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ上显示出一条均一的蛋白染色带， 其ｐ Ｉ为５５０。该出血成分的最小出血剂量是 ２６μｇ， 具有蛋白水解酶活力， 其活力为 ３６８， 但没有精氨酯酶和磷脂酶 Ａ２ 活力。当加入 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ 螯合剂去除金属离子后， 它们的出血活力和蛋白水解酶活力均丧失。 结论 这是从大陆尖吻蝮蛇毒中获得的一个新的出血金属蛋白酶 （ Ｄａ Ｈ Ｔ３）。

云南墨江蜈蚣致突变试验研究

纯种小鼠Ａ＿１、Ａ＿２组及对照组各１０只，分别连续给蜈蚣制剂（相当于正常人体量和高于正常人体１０倍量计算）３ｏ天，处死。取骨髓细胞观察其染色体的变化情况，并以统计学计算处理，计致突变数。结果证明墨江蜈蚣无致突变作用，用药十分安全。指示人体（５０ｋｇ计算）可服用墨江蜈蚣２～２５条／次，连服一个月不会发生任何中毒。

Ca^（＋＋）Na~＋离子对湖南产五步蛇蛇毒PLA_2酶活力的影响

Ｃａ^（＋＋）离子能极大地激活五步蛇蛇毒ＰＬＡ_２的酶活力，Ｎａ离子只能在一定程度上激活，作者推测在测定ＰＬＡ_２酶活力的底物溶液中可以不加Ｎａ~＋离子。