肾素-血管紧张素系统通过氧化应激机制参与血管反应性的调节

肾素-血管紧张素系统过度激活导致血管氧化应激损伤,进而影响血管功能。xanthine氧化酶、NAD(P)H氧化酶和脱耦联的NO合酶是血管组织中活性氧的主要来源。超氧化物阴离子和活性氧簇中的其他成分通过多种机制失活NO在心血管疾病的发生和发展中具有重要作用。随着对氧化应激损伤参与血管反应性调节机制的认识逐渐加深,有希望通过抑制氧化应激损伤改善血管内皮功能。

ALA-PDT减轻同种异基因小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨5-氨基乙酰丙酸-光动力疗法(5-aminolevulinicacid-mediatedphotodynamictherapy,ALA-PDT)在小鼠骨髓移植后减轻急性移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD)的作用。方法建立同种异基因小鼠骨髓移植急性GVHD模型,以C57BL/6J为供鼠,BALB/C为受鼠。BALB/C受鼠经致死剂量(8.5Gy)60Co照射后随机分为4组,A组为单纯60Co照射组;B组为单纯供鼠骨髓及脾细胞移植组;C组为供鼠骨髓移植以及供受鼠混合脾细胞移植组;D组为ALA-PDT移植组。在照射后4h移植供鼠骨髓细胞和脾细胞。观察骨髓移植后受鼠的一般情况、28d生存率、外周血白细胞计数以及肝脏、小肠、皮肤的病理组织学改变,应用流式细胞仪检测骨髓移植细胞嵌合情况。结果D组小鼠28d生存率明显高于其他各组,差异有显著性(P<0.01),28d各组小鼠存活率分别为:0,0,10%,60%。B,C组小鼠均出现GVHD反应,其血液学以及病理组织学改变的严重度与GVHD发生的早晚具有一定的相关性。D组仅有2只小鼠出现GVHD反应,但其血液学以及病理组织学改变程度较其他各组轻。结论ALA-PDT能够明显减轻小鼠骨髓移植后GVHD反应,增加受鼠的28d生存率,因此可能是一种有价值的抗同种异基因骨髓移植后急性GVHD反应的治疗方法。

ALA-PDT对急性淋巴细胞白血病小鼠同种异基因骨髓移植后GVHD和GVL的影响

目的探讨5-氨基乙酰丙酸-光动力疗法(5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy,ALA-PDT)在急性淋巴细胞白血病(ALL)小鼠骨髓移植后对移植物抗宿主病(GVHD)和移植物抗白血病作用(GVL)的影响。方法以ALL小鼠为模型,经致死剂量60Co照射后,对其进行同种异基因骨髓移植的同时,静脉输注经ALA-PDT处理的供受鼠混合淋巴细胞,同时设立骨髓细胞加脾细胞移植对照组及空白对照组。观察骨髓移植后受鼠的一般情况、30 d生存率、造血功能恢复情况以及肝脏等组织的病理学改变。结果ALA-PDT处理组小鼠30 d生存率明显高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.01);其造血功能恢复情况及GVHD反应均较其他各组有所改善。结论ALA-PDT能明显减轻小鼠骨髓移植后GVHD反应,并保留一定的GVL作用。

利妥昔单抗治疗高龄初治毛细胞白血病患者1例

目的观察利妥昔单抗治疗高龄初治毛细胞白血病的有效性和安全性。方法以利妥昔单抗单药治疗1例93岁初治毛细胞白血病患者,剂量600mg 1/周,共4周,观察其治疗前后白细胞及血小板变化。结果利妥昔单抗治疗后,患者白细胞总数、淋巴细胞比例以及血小板计数趋向正常。结论应用利妥昔单抗治疗高龄初治毛细胞白血病安全有效。

老年骨髓增生异常综合征患者的临床特征分析

目的分析老年骨髓增生异常综合征(MDS)的临床特征。方法对32例老年MDS患者进行13年的诊治、随访,分析其发病年龄、疾病分型、合并其它脏器疾病、生存时间等。结果 MDS发病年龄集中在80～89岁(59.38%),其中以难治性贫血(43.75%)及中低危组(87.50%)最常见。患者5年生存率为56.25%,大部分患者合并心血管疾病,影响其治疗的耐受性。结论老年MDS患者预后差,MDS相关病死率达50%,需要早期诊断、早期治疗。

135例老年血液病的分布及预后分析

目的分析老年血液病的分布及预后情况。方法对135例老年血液病患者进行13年的诊治、随访,分析其发病年龄、生存时间等指标。结果发病年龄集中在80-89岁,非霍奇金淋巴瘤发病率最高(31.11%),其次为骨髓增生异常综合征(16.30%)。两者的5年生存率分别为52.38%、50%。急性白血病及再生障碍性贫血预后最差,缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血经治疗后5年生存率不受影响。结论老年血液病患者预后差,但早期诊断、早期治疗后仍可延长生存时间。

超低剂量地西他滨联合自体CIK细胞输注治疗骨髓增生异常综合征转化的高龄急性髓细胞白血病1例并文献复习

目的观察超低剂量地西他滨联合自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）治疗骨髓增生异常综合征（MDS）转化的老年急性髓细胞白血病（AML）的安全性及疗效。方法患者男，83岁，初诊为骨髓增生异常综合征．难治性贫血（MDS．RA），采用氨磷汀联合红细胞生成素治疗，血象维持基本正常3年半，后病情进展，转变为慢性粒单细胞白血病，2个月后又演变为AML．M4型，采用超低剂量地西他滨联合白体CIK细胞治疗，具体方案为：地西他滨10mgd1．5，CIK输注（每次2×10^9～8×10^9）d14，rhlL-22mUd15-19，28d为1个周期。观察治疗后的不良反应、血象变化、缓解情况及生存期，并复习有关地西他滨治疗老年MDS／AML的相关文献。结果患者在最佳支持治疗的基础上，共完成8个周期地西他滨联合自体CIK输注治疗，期间出现Ⅰ／Ⅱ度骨髓抑制及Ⅰ度胃肠道反应，肝肾功能无明显异常，分别于第2、3、8周期出现高白细胞血症（最高达141．95×10^9／L），加用依托泊苷（50mg，d1-3）治疗后高白细胞血症得到控制。在间断输血治疗下血红蛋白维持在77～138g／L，血小板在第3周期后开始上升，至第6周期达到正常，疗效评价达到部分缓解。患者最终死于白血病进展和肺部感染，自诊断AML至死亡共生存22个月，显著长于文献报道。结论超低剂量地西他滨联合自体CIK细胞治疗老年MDS转化的AML安全有效，有必要扩大病例数深入研究。

含胸腺肽增强免疫的自体CIK细胞输注联合小剂量IL-2方案治疗老年人B-CLL的近期疗效观察

本研究评价含胸腺肽增强免疫的自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)输注联合小剂量IL-2方案治疗老年人B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)的安全性及疗效。以胸腺肽α1作为增强免疫方案,用法为1.6 mg/d,皮下注射,14 d为1个周期。采集5例B-CLL老年患者外周血单个核细胞,每周采集1次,分别在应用胸腺肽α1前和应用1个周期后各采集3次,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)及抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,观察对比应用胸腺肽α1前后CIK细胞在扩增数量、效应细胞扩增倍数、淋巴细胞亚群比例及体外杀瘤活性的变化。5例患者在接受胸腺肽α1治疗后开始进行自体CIK细胞联合小剂量IL-2方案免疫治疗,具体为:胸腺肽α1 1.6 mg/d,皮下注射,隔日1次;每次回输CIK细胞数为(4-6)×109个,回输后应用IL-2 1 mU/d,皮下注射,第1-10天。28 d为1个疗程,动态观察CIK细胞治疗前后细胞免疫功能、肿瘤相关生物学指标、疾病缓解情况及感染频次、程度的变化。结果表明:胸腺肽α1增强免疫治疗后体外诱导CIK细胞在扩增数量、效应细胞扩增倍数、比例及体外杀瘤活性4个方面均明显高于胸腺肽α1治疗前(P<0.05)。5例患者共接受46个疗程的CIK细胞联合IL-2治疗,未观察到明显不良反应。治疗后5例患者一般情况得到不同程度改善,CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例明显升高(P<0.05),血清β2微球蛋白水平显著下降(P<0.05),感染频次减少,程度减轻(P<0.05);3例由部分缓解(PR)达到完全缓解,1例由疾病稳定(SD)达到PR,1例由疾病进展达到SD。结论:含胸腺肽增强免疫的自体CIK细胞联合小剂量IL-2方案治疗老年人B-CLL安全有效。

30例老年非霍奇金淋巴瘤的临床病理学特征、疗效及预后分析

本研究探讨老年非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)的临床病理学特征、疗效和预后相关因素。对2003年1月-2012年12月中国人民解放军总医院老年血液科收治的30例老年NHL患者的临床资料进行回顾性分析,包括患者的一般临床特征、病理特点、化疗方案选择及临床反应,并运用Kaplan-Meier曲线进行生存分析,应用COX回归模型对相关预后因素(包括年龄、IPI评分、B组症状、Ann-Arbor分期和LDH水平)进行多变量分析。结果表明,30例患者中位年龄82.5岁;所有患者均有合并症,其中以心血管系统疾病(包括高血压、冠心病、心律失常等)最常见,少数(8/30)合并第二肿瘤;出现B组症状的占63%(19/30);病理分型中仅2例为T细胞淋巴瘤,其余为B细胞淋巴瘤,其中弥漫大B细胞淋巴瘤占所有B细胞淋巴瘤的57%(17/28);Ann-Arbor分期Ⅰ-Ⅱ期占37%(11/30),Ⅲ-Ⅳ期占63%(19/30);IPI评分2分以下10例,3分4例,4-5分16例,3-5分的患者占67%(20/30);初诊时有43%(13/30)患者的LDH高于正常。全组病例均采用改良R-CHOP为基础的个体化方案化疗,4个疗程后CR 14例,PR 13例,PD 2例,SD 1例,治疗总反应率为90%;全组病例1年、2年总生存率分别为73.3%、43.3%;半年、1年无进展生存率分别为62.2%、54.9%;COX回归多变量分析显示,B组症状和Ann-Arbor分期是影响老年NHL生存的独立预后因素(P=0.014、0.039;RR=6.678、4.939)。结论:老年NHL患者症状不典型,初诊时分期较晚,合并基础疾病多,由于个体差异大,应根据不同预后采取个体化治疗;以脂质体阿霉素为基础的CHOP方案对心脏的毒性低,对老年NHL可能是一种安全有效的方案;老年NHL患者无B组症状和Ann-Arbor分期≤Ⅱ期是老年NHL患者预后良好的指标。

自体CIK细胞联合化疗治疗老年急性髓细胞白血病的临床研究

本研究旨在评价自体CIK细胞联合化疗治疗老年人急性白血病的有效性和安全性。采集5例老年急性白血病患者外周血单个核细胞,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,回输至患者体内,28 d为1个疗程。观察治疗前后细胞免疫功能、感染发生、血红蛋白和输血依赖以及对自然病程的影响。结果表明:5例患者共接受46个周期的CIK细胞输注治疗,回输后所有患者均未出现不良反应;CIK细胞治疗后CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例显著增高(P<0.05);CIK细胞治疗可以有效减少AML患者的感染发生(P<0.05),缩短高热持续时间(P<0.05);在疾病稳定期,CIK细胞输注可以减少患者红细胞的输注量(P<0.05),稳定血红蛋白水平;CIK细胞输注虽不能改变病程的转归,但在患者疾病进展期以及终末期,采用化疗联合CIK治疗可使患者病情一度平稳,延长生存时间。结论:自体CIK细胞联合化疗对本组5例老年急性髓系白血病安全有效。

地西他滨联合自体CIK细胞治疗2例高龄急性髓系白血病的疗效观察

本研究旨在观察低甲基化药物地西他滨联合自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗老年急性髓系白血病(AML)的安全性及有效性。本科于2006-2012年收治2例80岁以上老年AML患者(M4型和M6型),均继发于骨髓增生异常综合征。对这2例患者先后采取单用自体CIK细胞输注、地西他滨或(和)自体CIK细胞方案治疗,系统观察了2例CIK治疗前后淋巴细胞亚群、临床相关指标(血液学反应、输血频率、白血病相关基因表达、缓解情况、生活质量)及生存期的变化。结果表明,与单用自体CIK细胞输注和单用地西他滨治疗相比,地西他滨联合自体CIK细胞治疗方案可减轻骨髓抑制程度,降低输血频率及输血量,延长部分缓解持续时间,同时表达的白血病相关基因减少,生存期显著延长,患者生活质量得到明显改善。结论:地西他滨联合自体CIK细胞治疗老年AML患者安全有效。

80岁以上老年急性白血病12例临床分析

本研究探讨80岁以上老年急性白血病的临床特点。对我院2000-2010年收治的12例80岁以上急性白血病患者进行回顾性分析,其中9例急性髓系白血病,3例急性淋巴细胞白血病,均合并有多种基础疾病,大部分患者一般情况较差,接受了个体化治疗方案的患者共10例。结果表明,2例患者获得完全缓解,其余患者未获得缓解。平均生存时间20±16周。AML患者平均生存时间为27±14周,明显长于国外报道。生存期最短的3例均为ALL患者。结论:本组高龄AML患者采取个体化治疗,生存期得到明显延长。而高龄老年ALL患者则预后很差,缺乏相对有效的治疗措施。

136例住院高龄老年患者贫血特点及分布

目的探讨住院老年患者贫血发生、病因学分布特点及其临床意义。方法对2013年11月在解放军总医院西院的老年患者按血红蛋白浓度男性<120 g/L、女性<110 g/L的标准进行贫血筛查。收集筛查出的老年贫血患者的一般临床资料、贫血病因、血常规中红细胞各项参数、铁代谢指标及叶酸、维生素B12水平,观察不同病因贫血老年患者上述各项指标的临床特点。结果同期住院的406例老年患者中,贫血患者占33.5%(136例),>80岁占90.4%,平均年龄88.7岁;其中轻、中度贫血占99.2%,以正细胞正色素贫血为主(占70.6%)。本组老年贫血的病因包括感染(52.9%)、恶性实体瘤(14.7%)、肾功能不全(13.2%)、不明原因贫血(7.4%)、恶性血液病(5.9%)、造血原料不足及失血(5.9%)。其中单病因贫血77例(56.6%),多病因贫血49例(36.0%),其余为不明原因贫血。多病因贫血患者的血红蛋白为(95.3±13.8)g/L,低于单病因贫血患者(102.6±12.2)g/L(P<0.05)及不明原因贫血患者(109.8±6.9)g/L(P<0.05)。本组仅8例恶性血液病(5.9%)在老年血液科就诊,其余128例(94.1%)就诊于其他科室后发现贫血。结论住院老年患者易发生贫血,且病因复杂,以轻、中度贫血为主,临床表现缺乏特异性,常因其他疾病就诊时发现。

过氧化氢诱导人巨核细胞系Dami氧化应激模型的建立及评价

目的探讨过氧化氢(H2O2)诱导Dami细胞氧化应激模型的条件,建立并评价模型。方法不同浓度过氧化氢处理Dami细胞后,Giemsa染色,显微镜观察细胞形态学的变化;CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,绘制生长曲线,计算半数抑制浓度(IC50);加载DCFH-DA探针后流式细胞仪检测细胞内活性氧自由基水平;Western blot检测核因子NF-E2相关因子(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)表达量。结果随着H2O2浓度升高,Dami细胞核皱缩趋于明显,存活率下降,IC50为(0.9132±0.144)mmol/L;0.1 mmol/L、1 mmol/L、10 mmol/L H2O2处理Dami细胞2 h,细胞氧化应激阳性率分别为12.11%、20.91%、52.53%;H2O2处理Dami细胞24 h后,抗氧化蛋白Nrf2、GCLC水平升高,未检测到HO-1和NQO1的表达。结论 1 mmol/L H2O2是建立Dami细胞氧化应激模型的合适浓度。Dami细胞抗氧化应激反应与Nrf2/ARE通路有关。

利妥昔单克隆抗体联合CIK治疗高龄眼眶弥漫大B细胞性淋巴瘤

高龄侵袭性弥漫大B细胞性非霍奇金淋巴瘤患者治疗存在一定难度。本研究探讨在利妥昔单克隆抗体单独或联合化疗的基础上,采用自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗高龄眼眶弥漫大B细胞性淋巴瘤的疗效及安全性。1例89岁男性患者经右眼眶肿物部分切除术后病理诊断为弥漫大B细胞性非霍奇金淋巴瘤,在利妥昔单克隆抗体联合小剂量化疗治疗基础上,采用CIK细胞治疗5个疗程,每疗程输注(2-3)×109CIK细胞2次,同时给予rhIL-2 1 MU/d皮下注射,连续10 d,观察CIK细胞疗效及不良反应。结果显示:该患者的外周血单个核细胞能成功扩增出所需的CIK细胞,培养后的CIK细胞以CD3+和CD8+细胞为主,CD3+CD56+细胞得到大量扩增。CIK细胞治疗2个疗程后,原发眼眶淋巴瘤及左肾上极病变完全消失,5个疗程结束后患者达到完全缓解。CIK细胞治疗中未见到明显不良反应。结论:对于高龄眼眶淋巴瘤侵袭性较高、分期较晚的患者,在利妥昔单克隆抗体单独或联合小剂量化疗的基础上,采用自体CIK细胞治疗,可能更有助于预防肿瘤复发,延长无病生存期,改善患者生存质量。

重组改构人肿瘤坏死因子-α治疗老年非小细胞肺癌恶性胸腹水1例并文献复习

目的报告1例重组改构人肿瘤坏死因子-α(rmhTNF-α)治疗老年恶性胸、腹腔积液的临床病例。方法 2010年我科收治1例肺癌并胸腹腔积液患者,给予留置胸腔和腹腔引流管,每天放尽胸、腹水并记录引流量后,分别注入地塞米松磷酸钠注射液2 mg、5 mg,然后分别将rmhTNF-α200万U、500万U溶于20 ml 0.9%氯化钠注射液并注入胸、腹腔。并通过治疗前后引流量变化、影像学变化、血制品的用量和输血时间间隔来评价疗效。结果 rmhTNF-α能有效控制进展期肺癌患者的恶性胸腹水,治疗后肺部CT、腹部B超显示胸腹水减少,胸腹水引流量减少(P<0.01),输注血制品的总量减少、时间间隔延长。结论 rmhTNF-α可能对常规治疗无效的恶性浆膜腔积液有效,但机制还不甚明了,有待进一步系统研究。

老年弥漫大B细胞淋巴瘤的临床病理学特征及疗效分析-附15例报告

目的：探讨老年弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）的临床病理学特征和疗效。方法对2003年1月-2012年12月我院收治的15例老年DLBCL患者的临床资料进行回顾性分析，包括患者的一般临床特征、病理特点、化疗方案选择及疗效，并结合电话随访收集患者生存资料。结果15例患者中位年龄84岁；所有患者合并至少2种其他疾病，其中以高血压病和冠状动脉粥样硬化性心脏病最常见，有4例合并第二肿瘤；出现B组症状（发热、盗汗及体重下降）的占13例；病理亚型中以非生发中心细胞型（non-GCB）居多（10/15）；Ann-Arbor分期Ⅱ期1例，Ⅲ/Ⅳ期14例；国际预后指数（international prognostic index，IPI）评分3~5分14例；初诊时有10例血清乳酸脱氢酶（LDH）高于正常。全组病例均采用R-CHOP（利妥昔单抗联合CHOP）为基础的个体化方案化疗，4个疗程后完全缓解（CR）4例，部分缓解（PR）8例，疾病稳定（SD）1例，疾病进展（PD）2例，治疗总反应12例；全组病例半年总生存10例，1年总生存8例；半年、1年无进展生存分别为7例、6例。结论老年DLBCL初诊时合并基础疾病多、分期较晚、病理分型以non-GCB亚型为主，预后很差；应在强化支持治疗的基础上，根据不同预后，采用个体化R-CHOP方案化疗。

全反式维甲酸联合猪胆酸钠对K562和Kasumi-1细胞系生物活性抑制作用

本研究旨在探索全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合猪胆酸钠(SBA-Na)对人白血病K562细胞系及Kasumi-1细胞系生物学活性的影响及其作用机制。分别配制浓度为10-6mol/L(W1)、10-4mol/L(W2)的ATRA溶液及浓度为100μg/ml(Z1)、200μg/ml(Z2)的SBA-Na溶液,分别使用W1、W2、Z1、Z2、W1+Z1、W2+Z2处理上述2种细胞系,并设立不加药的空白对照组。镜下观察不同处理组细胞形态及生长情况;应用CCK-8法检测细胞增殖能力,绘制细胞生长抑制曲线;分别采用PI单染和PI/Annexin V双染流式细胞术检测各加药组K562细胞和Kasumi-1细胞的细胞周期及凋亡的变化;采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测K562细胞系各组CyclinA基因表达量的变化。结果表明,ATRA及SBA-Na对2种细胞均有抑制增殖作用,两者联合用药的作用更明显;各给药组与对照组相比,细胞周期分布发生明显变化,处理组细胞凋亡明显增加,尤以ATRA联合SBA-Na给药组凋亡最为明显。低浓度SBA-Na处理组Cyclin A表达上调,其他处理组Cyclin A表达均下调,且存在量效关系。结论:ATRA及SBA-Na均可抑制K562细胞及Kasumi-1胞系增殖,促进其凋亡,且二者联合效果更明显,对于K562细胞系,两者可能是通过下调Cyclin A基因表达而发挥作用。

胸腺肽α1对老年CLL患者CIK细胞体外扩增及杀瘤活性的影响

目的探讨胸腺肽α1对老年B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B cell chronic lymphatic leukemia,B-CLL)患者来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)扩增及杀瘤活性的影响。方法以胸腺肽α1作为免疫增强方案,1.6mg/d皮下注射,14d为1周期。采集4例B-CLL老年患者外周血单核细胞,每周1次,分别在应用胸腺肽α1前和应用1周期后各采集3次,在体外经干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)及抗CD3单克隆抗体诱导成CIK细胞,检测其扩增数量、效应细胞扩增倍数、淋巴细胞亚群比例及体外杀瘤活性。结果 4例在胸腺肽α1治疗前后各做12次CIK细胞培养,培养时间(13.8±1.4)d,细胞存活率95.46%±3.12%。培养后CD3+、CD8+、CD3+CD8+及CD3+CD56+T细胞比例均显著升高(P<0.05),CD3+CD4+T细胞比例无显著变化(P>0.05)。胸腺肽α1治疗后,CIK细胞在扩增数量、效应细胞扩增倍数、比例及体外杀瘤活性明显高于治疗前(P<0.05)。结论胸腺肽α1能够增强老年B-CLL患者CIK细胞体外扩增活性。