香猪MAP3K4基因结构变异多态性和基因表达研究

基于前期比较基因组学分析,在香猪的丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶4(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 4,MAP 3K4)基因第15内含子中发现一个189 bp的结构变异(MAP3K4-I15-sv189)。为探究该结构变异(structural variation,SV)在香猪群体中的多态性分布及其对基因表达的影响,本研究设计一对特异性引物,建立MAP 3K4基因SV的PCR检测技术,分析香猪群体中该结构变异的基因类型;采用RT-qPCR研究结构变异不同基因型之间基因的差异表达。结果显示,香猪群体中MAP3K4-I15-sv189位点存在两种基因型,DD型和ID型(D为缺失基因,I与参考基因一致),其中D等位基因的频率为97.35%;大白猪群体中检测到3种基因型,DD型、ID型和II型,D等位基因频率为80%。相比之下,香猪的D等位基因频率显著高于大白猪的相应值(P<0.05)。采用生物信息学方法分析结构变异区域得到多种剪接元件和重复元件,可能影响MAP 3K4基因的表达。比较香猪各组织中MAP 3K4基因的表达量,发现该基因在肺组织的表达量最高。进一步检测肺组织中3种结构变异类型的相对表达量,显示:DD型>ID型>II型,表明SV的缺失可能促进MAP 3K4基因的表达。本研究表明,香猪MAP 3K4的结构变异MAP3K4-I15-sv189以缺失型为主,缺失型可促进肺组织MAP 3K4基因的表达。研究结果有助于解析香猪易感肺部疾病的分子机制。

宰后猪肉成熟过程中基因表达变化及其与肉品质的相关性分析

【目的】研究宰后成熟对猪肉品质的影响,以及宰后成熟过程中基因表达规律与猪肉品质变化的相关性,以期更好地阐释鲜肉成熟过程中肉品质变化的机理。【方法】以4℃条件下贮藏的大白猪背最长肌为研究对象,测定贮藏0、1、2、4、6、8和10 d时肉品质变化状况;利用实时荧光定量PCR测定宰后猪背最长肌中单磷酸腺苷脱氨酶3(AMPD3)、肌球蛋白结合蛋白C2(MYBPC2)、肌球蛋白轻链3(MYL3)、左旋氨基酸转运体(SLC7A8)和原肌球蛋白3(TPM3)等基因的表达变化,并分析其与肉品质指标的相关性。【结果】大白猪宰后背最长肌pH在2 d时达到极限值6.5,显著低于4、10 d(P<0.05);蒸煮损失和滴水损失均呈现先升高后降低的趋势,而贮藏损失在10 d时达到最高值12.52%,显著高于0.5~6 d(P<0.05);剪切力在宰后成熟1~10 d显著低于0~1 d(P<0.05);硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值随成熟时间的延长逐渐升高,且8~10 d显著高于其他时间点(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,宰后肌肉组织中基因的转录丰度仍然存在,AMPD 3基因在贮藏6 d时表达水平显著高于0、0.5、2和10 d(P<0.05);MYBPC 2、MYL 3和TPM 3基因0~10 d表达量均呈时间依赖性上调,在贮藏10 d时表达水平显著高于0~2 d(P<0.05);SLC 7 A 8基因在贮藏2 d时表达量达到峰值,显著高于其他时间点(P<0.05)。相关性分析表明,AMPD 3基因与猪肉品质指标间没有相关性(P>0.05);MYBPC 2基因表达量与TBARS值和贮藏损失呈显著正相关(P<0.05);MYL 3基因表达量与TBARS值、剪切力、滴水损失及贮藏损失呈极显著或显著正相关(P<0.01;P<0.05),与蒸煮损失呈极显著负相关(P<0.01);SLC 7 A 8基因表达量与pH呈显著负相关(P<0.05);TPM 3基因表达量与TBARS值、滴水损失及贮藏损失呈显著或极显著正相关(P<0.05;P<0.01),与蒸煮损失呈显著负相关(P<0.05)。【结论】宰后猪肉成熟过程中基因表达变化与肉品质指标间存在相关性,基因表达的差异影响着动物屠宰后不同的代谢类型和生理功能,进而影响肉品质。

发情周期对香猪卵巢生物钟相关基因表达的影响

生物钟在生物体(如猪)的生殖系统中起着重要作用。为研究发情周期对香猪卵巢生物钟相关基因表达的影响,本研究分析了香猪卵巢在发情期和未发情期生物钟相关基因的表达和可变剪接。结果在香猪卵巢中共检测到90个生物钟相关基因的表达,其中有33个生物钟相关基因在发情期和未发情期差异表达。从34个生物钟相关基因的转录本中鉴定出44个差异可变剪接事件。此外,还发现包括核心时钟成分arntl和cry1在内的20个基因仅在可变剪接水平上被差异调节,包括per1和clock在内的14个基因同时在基因表达和可变剪接水平被差异调节。通过RT-qPCR实验,证实了核心时钟基因per1、cry1、clock和arntl以及时钟相关基因ppp1cb和ntrk1在香猪卵巢中的表达具有节律性。结果表明,香猪卵巢生物钟可能通过转录和转录后调控水平在调节卵巢生理功能中发挥着重要作用。

香猪皮肤转录组衰老相关病毒源基因的筛选和鉴定

皮肤是哺乳动物抵御致病因素的第1道防线,在皮肤衰老的过程中,整合到哺乳动物基因组中的病毒源基因序列会被重新激活,影响宿主基因的表达,激起细胞对病毒的反应,引起慢性炎症、促进细胞衰老。本研究旨在探究病毒源基因表达与皱皮香猪皮肤皱纹形成的关系,选取12~18月龄皱皮香猪和普通香猪各5头进行转录组测序和生物信息学分析,采用RT-qPCR方法对皱皮香猪中差异表达的病毒源基因进行验证。2组中皮肤组织差异表达基因与病毒整合位点数据库进行比对分析,筛选出612个差异表达的病毒源基因。以普通香猪为对照,得到上调基因182个,下调基因430个,这些差异表达的病毒源基因主要富集在皮肤发育、炎症反应等GO条目,以及长寿调控途径、FoxO信号通路、细胞衰老等KEGG通路。经猪-人同源基因转换,与免疫、衰老、人类皮肤相关的基因取交集,筛选出高表达的候选基因6个:AGT、CAT、CTNNB1、JUP、KRT75和LIPE,采用RT-qPCR验证了皮肤中这6个基因的差异表达,与转录组测序结果趋势一致。研究结果表明,皱皮香猪皮肤皱纹的形成与病毒源基因的异常表达有紧密联系,本研究可为后期皱皮香猪皮肤褶皱形成的分子机制及衰老分子标记物选择奠定理论基础。

香猪ADCY2基因结构变异鉴定及其与生长性状的关联分析

为了探究香猪腺苷酸环化酶2(Adenylate Cyclase,ADCY2)基因结构变异与香猪生长性状的关系,本研究以233头断奶香猪为实验动物,定期测量体尺指标,采集耳组织提取基因组DNA,利用PCR技术分析香猪ADCY2基因结构变异的遗传多样性,并与香猪体尺指标进行相关性分析。结果显示,香猪ADCY2基因中存在1个长度为305 bp的结构变异位点(ADCY2-I2-SV305),该位点检出3种基因型:纯合缺失DD型、正常的II型和杂合的ID型,其中II基因型频率(67.09%)显著高于ID和DD基因型;I等位基因为优势等位基因。ADCY2-I2-SV305位点与香猪多个日龄的体宽、胸围和腹围显著相关,且II基因型的香猪个体各项体尺指标均显著高于ID和DD型个体,提示该结构变异的缺失型不利于香猪生长发育。对ADCY2-I2-SV305变异位点的功能元件分析发现,该位点中含有1个简单重复元件和1个SINE元件,以及5个miRNA结合位点,推测该位点的缺失突变将导致这些重复元件的丢失,不利于ADCY2基因的表达,进而影响香猪生长发育。综上,ADCY2基因的ADCY2-I2-SV305结构变异与香猪生长发育显著相关,可作为香猪良种选育的分子标记。

青黛复方制剂调节猪免疫力的作用机制分析

试验旨在应用网络药理学方法,探究青黛复方制剂调节猪免疫力的分子机制。从Tcmsp数据库中筛查青黛复方制剂含有的化合物,得到有效活性成分,预测有效活性成分作用的靶基因,制作“活性成分-靶基因”网络分析,筛出主要活性成分。通过Omim等数据库分析免疫相关基因,与活性成分的靶基因取交集,得到复方制剂靶向的猪免疫相关基因。利用String数据库构建蛋白互作网络图(PPI),运用Cytoscape筛选PPI的核心蛋白;通过David数据库分析靶基因富集的基因功能和KEGG通路;用Autodock和PyMol进行分子对接,验证核心活性成分与核心靶点蛋白的相互作用。结果显示:青黛复方制剂含有330种化合物,其中有效活性成分为62种,主要的活性物质有β-谷甾醇、豆甾醇、常春藤皂苷元、山柰酚、异牡荆素等10种;有效活性成分作用于64个猪免疫相关基因以及SLC6A4、ESR1、TNF等20种核心靶蛋白,通过IL-17信号通路、TNF信号传导途径、NOD样受体信号传导途径等调节天然免疫和特异性免疫系统功能,提高香猪的抵抗力。青黛复方制剂主要通过β-谷甾醇、异牡荆素等主要活性成分,影响白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(IFN-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平。分子对接分析表明,这些活性成分能够与靶蛋白有效结合,可为中药增强机体免疫力的物质基础和作用机制等研究提供参考。同时,网络药理学分析结果可为全面解析青黛复方制剂增强猪免疫力的作用机制提供依据。

11种肉及肉制品动物源性成分PCR检测技术

为建立准确的动物源肉制品检测技术,采用生物信息学方法,针对猪、牛、马、山羊、小鼠、大鼠、兔、犬、鸡、鸭、鹅等11种动物肉类的特异性基因,建立了特异性PCR检测技术。该技术可高特异性检测猪、牛、马、山羊、兔、犬、鸡、鸭、鹅源肉样,并可鉴别掺入的大鼠、小鼠等违禁肉类成份,最低检测限为1.00 ng/μL基因组DNA,以及低至1%的肉类添加量。运用该技术在市场中随机抽检3种初加工肉制品各10份进行验证,结果在每种肉制品中均检出掺假样品,不同种类肉品的掺假率为10%~20%。本研究建立了具有高灵敏、准确、低成本、适用范围广等优势的肉制品动物源性成份检测技术,为消费市场肉制品质量检测提供了技术支撑。

猪水肿病大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体新基因的分子特征

从仔猪水肿病样品中分离的一株大肠杆菌菌株NP96 2 1,抽提染色体DNA ,构建NP96 2 1的总DNA文库 ,经菌落原位杂交筛选、限制酶酶切和Southern印迹等分析 ,获得含有志贺样毒素基因的重组质粒 ,核苷酸序列分析表明 ,该基因的A亚基与SLT IIes的同源性为 97 6 %～ 98 1% ,与SLT IIc、SLT IId及EHECO15 7:H7产生的SLT II的A亚基之间的同源性分别为 93 1%、93 0 %和 92 9% ;B亚基与SLT IIes的同源性为 99 6 2 %～ 10 0 % ,与SLT IIc、SLT IId及SLT II的同源性分别为 81 5 %、81 1%和 81 5 % ;与 2 9种已知序列的SLT II、SLT I及志贺毒素STX进行聚类分析 ,结果证实大肠杆菌NP96 2 1菌株中的志贺样毒素基因属于一种新的SLT IIe亚型。SLT IIe NP96 2 1的A亚基与其它SLT IIe之间存在 7～ 9个氨基酸的差异 ,B亚基的氨基酸序列完全相同 ,与A亚基毒力活性密切相关的氨基酸分别为Thr4、Glu16 7、Arg170和Arg176。

贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因多态性及其编码蛋白的进化分析(英文)

BMP15和GDF9是转化生长因子β(TGFβ)超家族的成员,对绵羊的繁殖性状有直接的调节作用,从中发现的多个高产突变位点直接提高了排卵数和产羔数。在之前的研究中,作者从贵州白山羊中找到了一个高产突变位点。为了进一步揭示Bmp15和Gdf9基因突变与繁殖性状之间的关系,对贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因编码区进行了克隆,以人BMP7的晶体结构为模板构建了贵州白山羊BMP15和GDF9成熟肽的三维模型。贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因分别编码394和453个氨基酸的蛋白前体。对BMP15和GDF9成熟肽序列进行分析发现,除了之前确认的BMP15中的FecXB突变(S99I)和GDF9中的V79I突变之外,还从贵州白山羊的BMP15和GDF9成熟肽分别发现7个和3个位点突变。其中,BMP15成熟肽的S32G、N66H、S99I/P99I和G107R突变可能影响二聚体与受体的结合;GDF9成熟肽的P78Q和V79I影响二聚体与I型受体的亲和力,将值得进一步深入研究。对Bmp15和Gdf9基因编码的蛋白前体序列进行聚类分析,结果显示在鱼类到哺乳类的进化过程中,BMP15出现长度逐渐增加的现象,以BMP15成熟肽N端长度增加为主。这种演变可能使BMP15对低排卵哺乳动物繁殖力的控制更为灵敏。该文的研究结果为贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因变异与繁殖力的关系提出了合理的解释,并支持这两个因子是贵州白山羊高产性状重要调节因子的观点。

SRIF及CSH对斜带石斑鱼脑垂体生长激素合成和分泌的调控

斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)属于雌性先成熟、具有性转变的雌雄同体鱼类。生长激素释放抑制因子 (SRIF)是鱼类生长激素 (GH)分泌的主要抑制性调节剂 ,半胱胺 (CSH)可抑制SRIF的作用。本文采用静态孵育系统 ,应用RPA及RIA研究SRIF及CSH对斜带石斑鱼GHmRNA表达及GH分泌的调节。结果显示 ,SRIF能以剂量依存方式抑制斜带石斑鱼脑垂体释放GH ,时间越长作用越强。但SRIF作用 2 4h对GHmR NA水平的影响不显著 ,表明SRIF是斜带石斑鱼GH释放的抑制性调节剂 ,对GHmRNA的表达没有明显影响。较低剂量的CSH (10 -4- 10 -2 mol/L)使斜带石斑鱼的GH释放量增加 ,较高剂量 (10 -1mol/L)的CSH引起的GH增加趋势减缓 ,这种现象可能与较高剂量的CSH不仅抑制下丘脑SRIF的释放 ,同时影响GHRH的释放 ,使得GH的分泌量增幅下降有关 ;无论是较高剂量还是较低剂量的CSH都不能使GHmRNA的水平增加 ,表明CSH只能引起GH的释放量增加 ,不影响GH的合成。GnRH与CSH共同作用引起的GH释放量明显高于CSH单独作用的效应 。

乳链球菌乳糖利用阴性突变体的分离及其性质研究

以紫外线和溴乙锭对乳链球菌6030和6025菌株诱变，筛选出乳糖代谢障碍（Lac－）突变体，测定了乳链球菌及其突变体利用糖类的能力和β-半乳糖苷酶活力，经质粒DNA检测和Southcrn印迹杂交分析，证实乳链球菌Lac-突变体乳糖代谢能力的丧失与含有乳糖代谢基因的大质粒有关。

产志贺样毒素和肠毒素大肠杆菌分子流行病学(英文)

【目的】人和动物腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,本文主要研究贵州省致腹泻大肠杆菌毒力因子的分布类型。【方法】采用PCR技术对各毒力因子的基因分布进行研究。【结果】共分离到333株大肠杆菌,其中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)在腹泻的人、猪、牛群中占优势,分别为:人群73(n=112),猪群82(n=106),牛群18(n=115)。在ETEC菌株中检测到热敏肠毒素(lt)和不耐热肠毒素(st)基因,还存在lt/st并存现象。从人、猪、牛群中还检测到产志贺样毒素大肠杆菌(STEC),其中源自猪的STEC的检出率最高。大部分STEC同时携带lt、st或lt和st同时并存。编码F18菌毛的主亚基由fedA基因编码。对所分离大肠杆菌F18菌毛进行的研究结果表明,fedA基因主要与肠毒素基因共存,与stx基因并存的类型较少,25份猪源STEC菌株中仅有4份检测到fedA基因。【结论】贵州省人群、猪群和牛群致腹泻病原菌中以带F18菌毛的ETEC为主,STEC主要分布在腹泻的猪群中。

甲状腺素和生长激素与斜带石斑鱼早期个体发育的关系

采用放射免疫法测定了斜带石斑鱼卵、胚胎及仔鱼组织的三碘甲腺原氨酸 (T3)水平。斜带石斑鱼未受精卵中含有较高的T3水平 ,达每克体质量 2 75ng,于开口期升至每克体质量 6 2 8ng ,之后保持在较低水平。用T3浸泡处理 4～ 5周仔鱼 ,当T3浓度达到 10 - 8mol L以上时 ,外源T3才能引起组织T3水平增加 ;10 - 8mol L的作用比 10 - 7mol L的作用弱 ,浸泡 2 4h所引起的T3增加幅度明显高于 72h ;对 4周仔鱼的影响明显强于 5周仔鱼。这些结果证实了斜带石斑鱼卵中存在母源T3,其自身内分泌腺的分化可能始于孵化期或开口期 ,处于变态后期的仔鱼已具有一定的调节组织甲状腺素水平的能力。外源T3能影响 4～ 5周仔鱼组织T3水平的最低浓度为10 - 8mol L ,浸泡 2 4h对发育早期的仔鱼作用较强。用RT_PCR检测了斜带石斑鱼卵、胚胎及仔鱼生长激素(growthhormone,GH)mRNA的表达情况 ,表明未受精卵中有较高水平的GHmRNA表达 ,受精卵至囊胚期胚胎的GHmRNA表达水平较低 ,原肠期以后 ,胚胎GHmRNA的表达量明显增加 ,进一步证明硬骨鱼从受精卵开始就存在GHmRNA的表达 ,并在自身内分泌腺分化之前参与鱼类早期发育的调节。总之 ,斜带石斑鱼的早期发育受甲状腺素和生长激素的共同调节。

平板免疫溶血试验快速检测大肠杆菌不耐热肠毒素

琼脂糖为介质，进行固相平板免疫溶血试验测定毒素源性大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴ），同时与ＥＬＩＳＡ，兔肠结扎试验测定ＬＴ进行了比较。结果表明，平板免疫溶血试验特异性强，标准的ＥＴＥＣ发生溶血，非ＥＴＥＣ不发生溶血，灵敏度与ＥＬＩＳＡ相似，比肠结扎试验敏感８倍左右；对１５１份样品的检测说明平板免疫溶血试验与ＥＬＩＳＡ具有很高的符合性。此外对不同来源的红血球用于测定ＬＴ进行了研究。

应用PCR技术扩增大肠杆菌热敏肠毒素基因

以一对合成的特异性寡核苷酸片段为引物，通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ），对不同血清型的ＥＴＥＣ以及１０４份牛、猪及鸡源大肠杆菌分离物中ＬＴ基因片段进行扩增。３株已知血清型ＥＴＥＣ、１３份牛源、６份鸡源、１０份猪源的大肠杆菌扩增后可见一条３１４ｂｐ的片段，而非ＥＴＥＣ大肠杆菌、沙门氏菌等扩增后未出现这一片段。扩增产物用ＳｍａＩ酶解为１９０ｂｐ和１２４ｂｐ两个片段。印迹杂交表明，３１４ｂｐ扩增片段及ＳｍａＩ酶解的１２４ｂｐ和１９０ｂｐ片段均能与特异的ＬＴＢ基因探针杂交，Ｄｏｔ－印迹杂交与ＰＣＲ对样品的扩增结果相一致。

贵州矮马(Equus caballus)生长激素受体基因5个单核苷酸位点的多态性研究

旨在探究贵州矮马生长慢的根本原因,本研究采用PCR和基因克隆技术测定贵州矮马生长激素受体基因(GHR)外显子10的核苷酸序列;以伊犁马为对照,通过AS-PCR和SSCP方法研究贵州矮马群体中SNP位点的分布频率,应用群体遗传学和生物信息学方法分析基因型与体尺指标间的相关性。结果,从贵州矮马GHR外显子10中得到10个单倍型,包括10个SNPs位点,其中的5个引起氨基酸改变。与伊犁马相比,贵州矮马GHR基因1028位点的A等位基因占优势,对应较低的尻高和较粗的管围;1471位点的E等位基因在贵州矮马群体中分布较多,与胸围率较高相关;1697和1732两个位点的杂合型存在于最矮的雄性矮马(6岁)GHR基因中。1028位点引起的V343A位于UbE结构域中,1471、1697和1732位点引起的S491G、Y566C和R578G改变与GHR蛋白的磷酸化有关。这4个位点可能影响GHR的内化作用或通过磷酸化途径影响细胞内的信号传导效率。研究结果提示,贵州矮马GHR基因外显子10中的多态性变化可能影响贵州矮马的生长发育。

贵州野豌豆属植物的核型研究

对贵州窄叶野豌豆、广布野豌豆、光叶紫花苕和救荒野豌豆４种野豌豆及其种下不同类元的核型进行了研究，结果表明，广布野豌豆和光叶紫花苕的染色体数目为２ｎ＝１４，属于较为原始的类群；窄叶野豌豆和救荒野豌豆的染色体数目为２ｎ＝１２，属于较为进化的类群。窄叶野豌豆和救荒野豌豆种下类元的核型研究表明，种下类元间的核型差异明显，并对野豌豆属核型进化的趋势进行了探讨。

促性腺激素释放激素及多巴胺对斜带石斑鱼生长激素分泌及其mRNA表达的调控(英文)

研究斜带石斑鱼生长激素分泌及其 mRNA 表达的调控规律对于性别分化的控制、临床药物的选择,以及石斑鱼的增养殖等均具有重要的理论意义和实践意义。本文应用静态孵育系统, 采用放射免疫测定法和化学发光液相杂交实验, 研究GnRH 和 DA 对斜带石斑鱼 GH 分泌、GH mRNA 合成的调控作用。100 nmol/L sGnRH 作用斜带石斑鱼脑垂体碎片 1~24 h,明显促进GH的释放和GH mRNA的合成, 并具有时间依存性; 10 nmol/L^1 μmol/L sGnRH作用1 h 能明显促进斜带石斑鱼脑垂体释放GH,促进GH mRNA的合成, 表现出明显的剂量效应。100 nmol/L、1 μmol/L mGnRH 作用1 h 以一定的剂量依存方式促进 GH 的释放、促进 GH mRNA的合成,但 mGnRH 的效应比相应剂量的 sGnRH 的作用弱。APO 为 DA 受体的非选择性激动剂,不同剂量APO 对斜带石斑鱼脑垂体碎片的作用结果显示, 10 nmol/L^1 μmol/L APO 以剂量依存方式促进斜带石斑鱼脑垂体碎片释放GH、促进 GH mRNA的合成;1 μmol/L APO 作用 12 h 以上明显促进GH 的释放和 GH mRNA的合成,并随时间的延长而增加。与 sGnRH 对斜带石斑鱼 GH 释放、GH mRNA合成的作用相比, APO 的作用较弱。本文研究结果证实GnRH 和 DA能促进斜带石斑鱼脑垂体GH 释放和GH mRNA合成。

罗汉松内生真菌的抑菌活性研究

为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性,以96株罗汉松内生真菌为研究材料,将菌丝及其培养液经氯仿—甲醇抽提后,采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用,其中菌株LHS18、LHS42、LHS67、LHS92和LHS93抽提物经100倍稀释后对金黄色葡萄球菌仍有强的抑菌作用,菌株LHS30抽提物的100倍稀释溶液对大肠杆菌的生长有强烈的抑制作用。对抑菌活性较强的6株菌根据其ITS序列相似性进行了分子鉴定。菌株LHS18和LHS42鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigatus),LHS92为四孢脉孢菌(Neurospora tetrasperma),LHS30为丝枝霉(Aphanocladiumsp.),LHS67为拟茎点霉(Phomopsis liquidambari),LHS93未能鉴定出种属。研究结果提示,罗汉松内生真菌中49%菌株具有抑菌活性,其中6株菌对动物和人类的病原菌有强列的抑制作用,是挖掘高效抑菌物质的重要资源。

重组斜带石斑鱼生长激素及其抗血清在放射免疫测定中的应用

将斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)生长激素成熟多肽cDNA序列克隆到质粒pRSET ,与 6x组氨酸等原核编码序列融合获得重组质粒pRGH6 ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得高效表达 ,表达量占细菌总蛋白的4 3%。免疫印迹证明表达产物为含斜带石斑鱼生长激素的融合蛋白 ,Ni2 +亲合层析柱纯化融合蛋白 ,以此为抗原免疫家兔制备特异性的抗血清。以纯化的重组生长激素和特异性的抗血清建立斜带石斑鱼生长激素的放射免疫测定法 ,该方法的灵敏度、特异性和重复性均达到测定血液生长激素的水平。研究了多巴胺的受体激动剂阿扑吗啡对静态孵育斜带石斑鱼脑垂体碎片释放生长激素的影响 ,结果表明 。