β-谷甾醇对T47D细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨

目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响;利用Western-blot和Real-time PCR技术检测其对细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白及m RNA表达的影响。结果:高浓度BSS抑制T47D细胞增殖,使细胞分裂增殖指数降低,且ICI182 780不能完全拮抗其对T47D细胞的增殖抑制作用;低浓度BSS可促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且ICI182 780可完全拮抗其促增殖作用。Western-blot及Real-time PCR结果显示:低浓度BSS可诱导T47D细胞Cyclin D1蛋白和m RNA表达,并且ICI182 780能够抑制此诱导作用。结论:BSS通过ER介导调节Cyclin D1蛋白与m RNA水平的表达,从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期,发挥植物雌激素样作用。

顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的实验研究

目的:探讨采用临床常用药物顺铂建立化疗性损伤卵巢早衰动物模型的方法。方法:通过观察阴道脱落细胞选取有正常动情周期的雌性SD大鼠60只随机分为正常组,低剂量组和高剂量组。按4 mg/kg和6 mg/kg分别给予低、高剂量组腹腔注射顺铂注射液,每周1次,连续2周。每天观察大鼠一般情况,体重,动情周期。取材后测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量,光镜下观察卵巢病理组织形态变化。结果:体重下降,动情周期紊乱,动情间期延长。与正常比较,高、低剂量组E2水平不同程度降低,FSH、LH水平升高(P<0.05)。孕酮含量各组比较无统计学意义(P>0.05)。卵泡计数减少。结论:化疗药物顺铂可致大鼠卵巢功能明显衰退,卵泡发育障碍,生殖能力受损。为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型提供一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。

中西医结合治疗骨髓增生异常综合征的生存期研究

目的:观察中西医结合治疗骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)的中位生存期,探究影响MDS患者生存期的因素。方法:选取2009年12月至2018年5月北京中医药大学东方医院收治的自愿接受益髓浓煎方联合西药治疗的MDS患者57例作为研究对象,随访至死亡或观察截止,记录其中医证型及血液、骨髓等检查,分析评估生存期的影响因素。结果:57例患者中位生存期30个月,其中65周岁以下较高危组患者中位生存期30个月,长于国内报道的27个月以下。8例接受地西他滨联合中药治疗的较高危组患者中位生存期17个月,长于文献报道的单纯西药治疗的13个月。津液内停、实热的出现影响患者生存。结论:部分分组MDS患者生存期较单纯西药治疗延长,提示没有异基因造血干细胞移植条件的MDS患者进行中西医结合治疗可在生存期上获益。中医证型与MDS危险分层存在相关性,实邪的出现提示预后不良,生存期缩短,因此,中医药参与MDS治疗不能单纯采用“补益”中药治疗,还应该根据患者的危险分层,对较高危组患者采用一定“祛邪”药物治疗。

细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠卵巢早衰实验研究

目的:通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周各组灌胃给予相应药物治疗。观察大鼠一般情况;测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量;观察卵巢组织形态;TUNEL法分析卵泡颗粒细胞的凋亡;免疫组化检测BAX、Bcl-2和VEGF蛋白的表达情况。结果:模型组体质量下降,动情周期紊乱,治疗后体质量增加,动情周期恢复。与正常组比较,模型组E2、LH下降,FSH水平升高,Pro含量各组比较无显著差异。TUNEL检测模型组较正常组阳性表达增多,二仙汤组较模型组阳性表达减少。模型组较正常组BAX表达明显升高,Bcl-2下降,二仙汤治疗后与模型组比较BAX表达量下降,Bcl-2表达升高;VEGF蛋白在模型组中表达明显低于正常组,二仙汤组较模型组表达增多,阳性组表达略有恢复。结论:顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡,造成卵巢功能过早衰退;二仙汤通过调节血清中各激素含量,改变凋亡细胞相关蛋白的表达量来降低顺铂对卵巢的损害,促进卵泡发育,改善并增强卵巢功能。

二仙汤对卵巢早衰大鼠卵巢储备功能的影响

目的:通过研究二仙汤对卵巢血供和卵泡颗粒细胞分泌AMH、Inhibin的影响,探究其对卵巢储备功能的影响,从而探究二仙汤治疗卵巢早衰的机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周灌胃药物治疗。HE染色观察卵巢血管的变化;ELISA法测定血清中AMH、Inhibin含量。结果:与正常组比较,模型组卵巢血管减少,血清AMH、Inhibin下降(P<0.05);二仙汤和西药补佳乐治疗后与模型组比较卵巢血管增多,血清AMH、Inhibin升高(P<0.05)。结论:二仙汤治疗卵巢早衰的机制之一可能是改善卵巢血供,促进颗粒细胞AMH和Inhibin分泌,恢复卵泡正常募集和成熟,减少卵泡闭锁,从而改善卵巢储备功能。

卵巢早衰的中医辨证论治

卵巢早衰为妇科常见病,是指月经初潮正常或青春期延迟,第二特征发育正常的女性在40岁以前出现持续性闭经和性器官萎缩,并伴有卵泡刺激素和黄体生成素升高,而雌激素降低的综合征。由于其可导致不孕不育及低雌激素状态,严重影响女性生理和心理健康,且发病率呈逐年上升趋势,成为当今医学研究热点和难点。本文对卵巢早衰的病因病机、辨证分型及对应中医治疗方法进行分类总结,做一综述。不管是中药治疗还是针灸治疗,对于证型辨证分类及对病因病机的认识差别不大。卵巢早衰多责之于肾精不足,在补肾同时根据病情进行辨证,兼调心肝脾,活血化瘀。大量文献显示,中医由于其副作用小,疗效明显,且多体现"治未病"的防治思想,在治疗卵巢早衰方面有很大优势。