山荆子MbLRK10L1.1基因正调控腐烂病抗性

此前从东北山荆子(Malus baccata)中发现可能参与腐烂病信号响应的WAK基因 MbLRK10L1.1,在此基础上,拟结合生物信息学分析、表达分析和功能验证研究其在腐烂病抗性中的作用机制。结果表明, MbLRK10L1.1响应Valsa mali(Vm)信号,并且在瞬时表达 MbLRK10L1.1后,‘烟富6号’果实表面病斑扩散速率明显减小, FRK1(Flg22-induced Receptor-like Kinase 1)、TaNOX(Triticum aestivum NADPH oxidase)、 EDS1(Enhanced disease susceptibility 1)等相关抗病基因均有不同程度的上调表达。表明 MbLRK10L1.1可通过JA、SA、SAR以及PTI等途径正调控果实对腐烂病菌的抗性。

如何让学生当堂课完成美术作业

传统美术课堂教学中,往往一节课在教师讲完新授后安排学生完成一份简单的作业,但是因为时间有限,而且期间很容易被一些琐碎的事情浪费掉,所以会出现作业不能当堂完成的问题,对于这种现象我做了一些浅薄的研究。

让“爱”铺满教育之路

在我们的教育教学中,爱是永恒的主题,任何脱离了爱的轨道的教育都是不完整的教育,那如何让＂爱＂铺满我们的教育之路呢？笔者从三类学生与常规教育活动的特点出发,逐一分析。

具有苹果枝条降解及生防能力真菌的筛选与鉴定

【目的】筛选具有苹果废弃枝条纤维素降解及生防能力的真菌菌株,为果园废弃枝条的资源化利用奠定基础。【方法】以羧甲基刚果红培养基初筛、粉碎枝条为菌源复筛、纤维素酶活性测定、枝条发酵培养和离体对峙试验,从废弃枯枝样品中筛选具有苹果枝条降解能力和腐烂病生防能力的真菌菌株;结合形态特征和基因序列的同源性分析鉴定,明确菌株的分类地位。【结果】筛选出4株具有产纤维素酶的真菌菌株,分别命名为MM1、MX-1、MX-2和Z-2-1。MX-2的滤纸酶活性高达(12.96±0.02)U/mL,MM1、Z-2-1、MX-1的滤纸酶活性分别为(10.08±0.01)、(10.47±0.18)、(6.16±0.15)U/mL;MX-2枝条纤维素降解率高达(21.27±0.56)%,Z-2-1和MM1的枝条纤维素降解率分别为(14.65±0.35)%和(12.73±0.91)%,MX-1最低。对峙试验表明,Z-2-1可与腐烂病菌形成抑菌带。经鉴定,MM1、MX-1、MX-2和Z-2-1分别为深绿木霉、雅致放射毛霉、黑曲霉和穗状弯孢菌。【结论】获得的4株真菌均对苹果废弃枝条具有降解作用,其中MX-2的降解效果最好,Z-2-1对苹果腐烂病具有一定的拮抗能力,有望被应用在废弃苹果枝条纤维素降解的生产活动中。

山荆子WAK类受体激酶基因家族鉴定与表达分析

以表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF,Pfam PF00008.28)和激酶(pkinase,Pfam PF00069)保守域全蛋白序列为种子序列,鉴定了山荆子(Malus baccata)WAK-RLK(Wall-associated kinases-Reporter like kinase)家族成员,对其家族成员理化性质、进化关系、重复现象和表达模式等进行分析。结果表明,山荆子WAK基因家族包括27个成员,其氨基酸序列大小介于496~805,分子量介于55.45~89.61 kD,理论等电点介于5.15~8.75,主要分布于质膜;根据进化分析,将拟南芥、水稻、番茄、香蕉、苹果、山荆子6个物种的WAK-RLK分为8个亚组,山荆子WAK主要分布于亚组Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅷ。基因重复分析表明山荆子WAK成员扩增的主要原因是发生基因组范围的重复(wide-genome duplication,WGD)。启动子顺式作用元件(cis-acting regulatory element,cis-element)分析表明,该家族成员主要响应多种激素和逆境信号。PCR表达分析表明,WAK基因在山荆子不同组织中存在差异表达,且在苹果树腐烂病菌(Valsa mali)侵染后,MABA031460、MABA030455和MABA014609在前期显著上调表达。由此表明山荆子WAK家族成员发生扩增,响应逆境和腐烂病信号,MABA031460、MABA030455和MABA014609可作为抗腐烂病研究的候选基因。本研究结果为进一步抗病研究和功能分析提供了参考。

解淀粉芽孢杆菌BaA-007鉴定及其对苹果腐烂病的抑制作用

从苹果韧皮组织分离获得1株潜在的生防菌菌株。基于形态和16S rDNA、gyrA鉴定其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),命名为BaA-007(中国农业微生物菌种保存中心,菌种编号:ACCC60382)。该菌株及其次生代谢物对苹果腐烂病菌(黑腐皮壳菌,Valsa mali)生长具有抑制作用,离体条件下可显著降低腐烂病病斑的扩散速度。以BG培养基为基础培养基,筛选其最佳培养条件为蔗糖0.5%、细菌学蛋白胨1%、硫酸二氢钾0.1%、温度36℃、pH 7.0。BaA-007处理后,苹果水杨酸(SA)响应性基因PR1、PR2和NPR1,茉莉酸(JA)响应性基因PDF1.2、CORONATINE INSENSITIVE 1(COI1)和AOS,乙烯(ET)响应性基因ETR1、ERF1和HEL以及几丁质合成酶B基因(Chitnase B,ChiB)在接种处理后的不同时间点均上调。综上所述,菌株BaA-007对苹果腐烂病有显著的拮抗效果,有望作为防治苹果腐烂病制剂开发的生防菌株。

植物Gly-RLK基因家族鉴定及其在苹果中的表达分析

类受体激酶(receptor like kinase,RLK)在植物生长发育和环境适应中起重要作用。前期研究发现苹果(Malus′domestica)中存在一类具有Glyco18胞外结构域(SM000636或SM000704)的RLK,命名为Glyco_18-RLK(Gly-RLK)。本试验中以Glyco18和Pkinase(SM000220)保守域全蛋白序列为种子序列,对53种被子植物基因组中的Gly-RLK进行鉴定,并分析其进化特征;明确苹果Gly-RLK(MdGly-RLK)的理化性状、亚细胞定位,基因在染色体上的分布、启动子区域的顺式作用元件和表达模式。结果表明,仅19种植物中存在Gly-RLK,家族成员数介于1~20,单子叶植物中均未发现该家族成员。根据进化分析将其分为8个亚组,亚组Ⅲ、Ⅶ和Ⅷ分布基因数较多。共发现6个MdGly-RLK,其编码的氨基酸序列大小、分子量和等电点分别介于451~776、50.99~87.33 kD和5.95~8.21,主要位于质膜,4个为串联重复。MdGly-RLK在苹果各组织和品种间存在不同的表达模式;接种苹果腐烂病菌(Valsa mali)后,6个MdGly-RLK均差异表达,MdGly-RLK6(MD15G1156900)可上调至对照的16.33倍。综上,Gly-RLK仅在部分双子叶植物中存在,家族成员的扩增速度较快。MdGly-RLK响应苹果生长发育和黑腐皮壳菌信号,MdGly-RLK6可作为苹果抗腐烂病研究的候选基因。

新型叶面肥“绿农素”对水稻生长发育的影响

通过在杂交稻品种甬优2640上不同时期喷施“绿农素”后发现，水稻单株分蘖增加，根系发达，成穗数比对照高0．8万／667m2，总粒数多15．7粒，结实率高12％，千粒重增加0．4g，产量较对照增加232kg／667m2，增幅27％，效益增加4532元／667m2。