大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)诱导分化为心肌样细胞内向钠电流的状态。方法取健康SD大鼠骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,传至第两代,以10μmol/L的5氮杂胞嘧啶(5aza)孵育诱导24h。培养4周,用免疫细胞化学染色方法鉴定心肌样细胞(cardiomyocytelikecells);用全细胞膜片钳技术,检测胞膜内向钠电流,并与未经诱导的MSCs和急性分离的心肌细胞进行比较。结果MSCs经5aza诱导后部分表达心肌特异性肌钙蛋白T,在诱导后4周记录到快速激活和失活的膜内向钠电流。与急性分离的心肌细胞比较,相同刺激脉冲下心肌样细胞所产生的电流幅值较小,IV曲线向右偏移。结论经5aza诱导后,MSCs可分化成具有兴奋性内向钠电流的心肌样细胞。

大鼠骨髓间充质干细胞培养一周后的细胞膜电流

目的通过研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)膜电流的状态,以探讨MSCs的电生理学特性。方法取健康SD大鼠的骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养获得MSCs,培养1周后,利用膜片钳技术,以全细胞记录模式记录细胞膜电流。利用各种通道阻滞剂对记录到的电流进行鉴定、分析。结果培养1周后的MSCs未记录到内向膜电流,但显示有3种不同的外向电流在MSCs上单独或混合存在。利用氯通道阻滞剂D IDS不能阻断其外向电流,而在电极内液和细胞外液中使用钾通道阻滞剂后发现其膜电流幅度明显减小,提示所记录到的电流为钾电流,分别为:瞬间外向钾电流、超快速激活延迟整流钾电流及缓慢激活延迟整流钾电流。3种钾电流的电流-电压曲线与文献报道的相应钾电流相符。结论培养1周后的MSCs只表达外向钾电流,不同MSCs表达的钾电流差异较大,从电生理学角度提示MSCs具有多向分化潜能。

大鼠骨髓间质干细胞诱导分化为心肌样细胞膜电流的研究

目的:研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)诱导分化为心肌样细胞膜电流的状态。方法:按文献方法进行MSCs的诱导培养和鉴定。诱导后培养4周,用全细胞膜片钳技术,检测胞膜电流,并与未经诱导分化的MSCs进行比较。结果:未经诱导分化的MSCs不表达内向电流,只表达外向钾电流。MSCs经5-aza诱导后表达心肌特异性肌钙蛋白T,记录到2种膜内向电流,分别为钠电流(INa)和L-型钙电流(ICa),以及3种外向钾电流,包括瞬间外向钾电流(Ito),超快速激活延迟整流钾电流(Ikur)及缓慢激活延迟整流钾电流(Iks)。与未经诱导分化的MSCs相比,诱导后MSCs的钾电流以Ikur和Iks为主。结论:经5-aza诱导后,MSCs可分化成具有电压依赖性内向INa、ICa和外向Ito、Ikur、Iks的心肌样细胞。

自体毛囊移植联合米诺地尔外用对雄激素性秃发疗效的研究

雄激素性秃发（androgenicalopecia，AGA）是临床上最常见的脱发性疾病，本病在青年男性中多见．毛发缺失令患者在社交和生活等方面缺乏自信，严重影响患者的身心健康。目前治疗AGA的方法很多．包括外科手术和内服药物治疗等，外科有传统头皮下埋置扩张器的整形手术及自体毛囊移植等，特别近年来兴起的自体毛囊移植技术（autologous hair follicular unit transplantation，FUT）普遍被医患所接受。

大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞Cx43通讯连接功能检测

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为心肌样细胞Cx43的分布与通讯连接功能状态。方法:取健康SD大鼠骨髓,用5-氮杂胞苷体外诱导培养。取诱导培养2、3、4周的MSCs为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,另取急性分离的心肌细胞为对照组,用激光共聚焦技术检测Cx43的分布及平均荧光漂白恢复率。结果:对Cx43在细胞内分布检测发现,随诱导培养时间的延长,细胞内蛋白颗粒密度逐渐增加;诱导培养4周后MSCs内蛋白颗粒密度与对照组比较无显著差异(63.87±12.43,64.87±12.15,P>0.05)。各组细胞平均荧光漂白率的变化趋势与Cx43分布变化相似,即随诱导培养时间的延长,细胞平均荧光漂白率逐渐增加;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组分别为19.59%±6.08%、37.17%±3.84%、46.82%±2.69%、49.71%±5.53%,Ⅲ组与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:大鼠MSCs在体外诱导培养4周后已分化为心肌样细胞,其细胞Cx43的分布与通讯连接功能与正常心肌细胞相似。

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化的心肌样细胞内Ca^(2+)和CaMKⅡ的变化

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone m arrow m esenchym al stem cells,MSCs)体外诱导分化为心肌样细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达变化。方法取健康SD大鼠骨髓,用5-氮杂胞苷体外诱导培养。取诱导培养2、3、4周的MSCs为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,另取急性分离的心肌细胞为对照组,分别用激光共聚焦技术和W estern b lot技术检测[Ca2+]i及CaMKⅡ表达水平。结果经荧光探针结合Ca2+后,用激光共聚焦技术检测发现,随诱导培养时间的延长,[Ca2+]i逐渐增加;诱导培养4周的MSCs内[Ca2+]i与对照组比较无显著差异[(100.81±17.64),(100.32±17.10),P>0.05]。各组细胞CaMKⅡ的变化趋势与[Ca2+]i定量分析结果相似,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组分别为(322.45±19.43)、(434.43±16.77)、(680.91±20.61)、(682.69±21.03),Ⅲ组与对照组比较P>0.05。结论大鼠MSCs在体外诱导培养4周后已分化为心肌样细胞,其细胞内游离钙浓度和CaMKⅡ蛋白表达水平与正常心肌细胞相似。

1例SARS患者出院后低氧血症的监护及治疗报告

1 临床资料 2003年6月,某观察区接收1名SARS出院患者,该患者,女,22岁,既往体健,住院45d,住院治疗期间持续高热达15 d,予甲基泼尼松龙等药物治疗,无创正压机械通气20余天,出院时达到卫生部规定的SARS临床治愈标准,出院时胸片提示双肺纤维化明显.

重组人尿激酶原成功救治急性肺血栓栓塞症患者1例

急性肺血栓栓塞症(PTE)是心血管病常见的急危重症之一,其致死、致残率高,但经及时溶栓治疗后病死率可下降。目前临床上用于急性PTE治疗的溶栓药物主要为尿激酶(UK)及重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA),存在较高的出血并发症风险。重组人尿激酶原(rhPro-UK)是新型的特异性纤溶酶原激活剂,溶栓效率高、特异性强、出血风险小,近年在急性ST段抬高型心肌梗死的溶栓治疗中表现突出,但目前其用于治疗急性PTE的研究鲜有报道。作者近期在临床工作中利用rhPro-UK成功救治了1例急性PTE患者,为rhPro-UK在急性PTE溶栓治疗中的应用积累了宝贵经验。

新战士运动应激时心理状态与心率和血压变化的关系

目的观测不同心理状态武警新战士运动应激时心率和血压的反应。方法采用精神症状自评量表(SCL-90)对新战士进行集体心理状态测试,选取总分>160分的40名战士纳入实验组(低心理素质组),另选取总分≤160分的40名战士作为对照组(高心理素质组)。采用GE-CASE活动平板运动测试系统,按照标准的Bruce方案测定两组战士在安静时、运动应激中每3 min和恢复阶段每1 min的心率和血压。结果实验组达到极量运动的人数少于对照组,且出现不良反应如头晕、胸闷增多。实验组基础心率高于对照组(80.0±9.8)次/min vs(69.2±9.2)次/min,差异有统计学意义(P=0.023),极量运动时舒张压异常增高(96.6±6.4)mm Hg vs(78.4±8.3)mm Hg,差异有统计学意义(P=0.013),并伴有心率下降。恢复阶段,实验组心率恢复较慢。结论不同心理状态的新战士在运动应激时出现的心血管系统反应存在显著差异,低心理素质组的战士不良反应较高心理素质组的战士增多,可能与其机体内各种应激激素分泌失衡有关。

重组人尿激酶原治疗老年急性ST段抬高型心肌梗死的有效性及安全性分析

目的评价重组人尿激酶原(rhPro-UK)治疗老年急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者的临床效果及安全性。方法40例STEMI患者,按年龄分为老年1组(≥75岁,<85岁,8例)、老年2组(≥65岁,<75岁,12例)及对照组(<65岁,20例)。三组患者均接受rhPro-UK溶栓治疗。比较三组溶栓效果[胸痛缓解时间、ST段回落≥50%时间、肌酸激酶同工酶(CK-MB)酶峰时间及临床再通情况]、出血及主要心血管不良事件(MACE)发生情况。结果三组胸痛缓解时间、ST段回落≥50%时间、CK-MB酶峰时间及临床再通率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。老年1组和老年2组轻度出血发生率均为25.00%,均高于对照组的15.00%,但差异无统计学意义(P>0.05)。老年1组MACE发生率为12.50%,老年2组为25.00%,对照组为15.00%,三组MACE发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论rhPro-UK治疗老年STEMI患者有效性高、安全性好。

血小板微粒通过激活单核细胞HIF-1α促进血管生成的作用

目的:探讨血小板微粒(PMP)通过单核细胞促进血管生成的作用及机制。方法:制备人PMP,采用基质胶栓实验检测PMP对体内新生血管形成的影响。在体外常氧和缺氧条件下,使PMP与人单核细胞系THP-1结合,ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)的分泌水平,RT-qPCR检测THP-1细胞VEGF和低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的表达,转录活性实验检测THP-1细胞HIF-1α的转录活性;利用共培养系统检测PMP与THP-1细胞相互作用对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外管腔形成的影响。结果:PMP诱导在体基质胶栓表面形成新生血管,HIF-1α选择性抑制剂chetomin可明显减弱该效应(P<0.01)。在常氧和缺氧条件下,PMP均呈剂量依赖性地促进THP-1细胞表达和释放VEGF,上调HIF-1αmRNA的表达并增强其转录活性;阻断PMP与THP-1细胞的相互作用可以抑制THP-1细胞HIF-1α的转录活性以及VEGF的生成。PMP激活的单核细胞可促进HUVECs在体外基质胶上形成管腔,chetomin干预导致管腔的数量明显减少。结论:PMP通过激活单核细胞的HIF-1α诱导其释放VEGF,导致新生血管的形成,这可能是PMP促进动脉粥样硬化血管生成的一种新机制。

中老年载脂蛋白B/A1、CIMT与冠状动脉病变程度的相关性研究

目的研究中老年人血清载脂蛋白B(ApoB)/血清载脂蛋白A1(ApoA1),颈动脉内膜中层厚度(CIMT)与冠状动脉(冠脉)病变程度的相关性。方法选择武警广西总队医院心内科病房住院的199例行冠脉造影(CAG)的中老年患者,根据造影结果分为冠脉粥样硬化性心脏病(冠心病)组105例和非冠心病组(对照组)94例,其中单支病变组39例、双支病变组36例、三支病变组30例,并采用修正的Gensini评分系统评价冠脉粥样硬化的严重程度;双侧颈动脉B超系统明确CIMT,同时检测载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白A1(ApoA1)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血糖、血尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等指标;分析上述指标与CIMT的相关性。结果冠心病组LDL-C、HDL-C、Hs-CRP、脂蛋白a[LP(a)]、UA、ApoB/ApoA1、Hcy、CIMT与对照组比较存在显著性差异(P<0.05),且ApoB/ApoA1、CIMT随着病变血管狭窄支数的增加而逐渐增高,以3支病变组尤为显著(P<0.05)。Pearson直线相关分析表明ApoB/ApoA1、CIMT与冠脉支数呈正相关(γ分别为0.305、0.311,ρ值分别为0.008、0.006,P均<0.05)及与冠脉狭窄评分Gensini评分呈正相关(γ分别为0.336、0.377,ρ值分别为0.010、0.002,P<0.05)。结论ApoB/ApoA1、CIMT参与冠脉粥样硬化,与冠脉病变程度呈正相关:ApoB/ApoA1、CIMT可能是冠心病发病及进展的独立预测因子。

武警新战士运动应激时心率和血压的变化

目的检测新入伍战士运动应激时心率和血压的反应。方法采用活动平板运动试验,按照标准的Bruce方案从第3级开始对85名新入伍战士进行试验,测量休息时、运动应激中每3min和恢复阶段每2min的心率和血压。结果运动应激开始后心率较安静时成倍增加,此后心率随着运动应激量的增加而增快,极量心率约为安静时的2.5倍,增加117次/min,期间有两个高峰,分别为运动至第5级和第7级时。恢复期心率以停止运动后2min内减慢明显(减慢36次/min),10min后恢复正常;运动应激时血压升高,以收缩压升高为主,应激过程中收缩压和舒张压分别约增加21mmHg和4mmHg,12min后恢复至安静时水平,运动应激后舒张压持续降低。结论运动应激时心率和收缩压的变化呈双峰型,心率恢复较血压快。

普罗布考对高脂兔脂肪肝形成的影响

目的观察普罗布考对高脂兔脂肪肝形成的影响,并探讨其可能机制。方法16只新西兰大白兔给予高脂饲养8周后,随机分为2组:(1)淀粉组(n=8):饲以高脂饲料及1%淀粉;(2)普罗布考组(n=8):在饲以高脂饮食基础上给予1%普罗布考;另选8只兔为正常饮食组(n=8),给予普通饮食。14周末结束实验。测定血清脂质、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和转氨酶水平,测定肝脏的脂质含量并进行病理学检测。结果(1)高脂饮食8周后总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的含量明显升高,普罗布考可明显降低上述指标,均为P<0.01;(2)普罗布考对SOD活性无明显影响,但与淀粉组比较,普罗布考组MDA的含量[(9.2±3.3)μg/ml vs(12.6±4.4)μg/ml,P<0.01]明显降低;(3)普罗布考组血清转氨酶水平[ALT(45.3±12.9)U/L,AST(49.5±13.0)U/L]较淀粉组[ALT(67.20±14.3)U/L,AST(81.6±21.8)U/L]明显降低,均为P<0.01;(4)普罗布考干预6周后可明显降低肝脏中胆固醇和甘油三酯的含量,肝脏脂肪病变明显减轻。结论普罗布考具有降脂、抗氧化和护肝作用,能抑制高脂饮食所致的脂肪肝形成。

调脂治疗对高脂血症患者C-反应蛋白及纤维蛋白原的影响

目的 :观察高脂血症患者调脂治疗前后 ,血浆C -反应蛋白 (CRP)及维蛋白原 (FIB)的水平变化。方法 :选择住院的高脂血症患者 6 0例 ,随机分为两组 ,其中普罗布考组 (n =32 )给予普罗布考 ,普伐他汀组 (n =2 8) ,给予普伐他汀 10 ,疗程均为 4w。治疗前后分别测血脂、CRP和FIB。结果 :(1)普罗布考和普伐他汀均可显著降低总胆固醇 (TC)和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -C) ,(2 )普罗布考对FIB和CRP无显著影响 ;而普伐他汀显著升高FIB ,从 (3 2 5± 0 89) g/L升至 (3 87± 0 75 )g/L (P <0 0 5 ) ,对CRP无明显影响。 (3)普伐他汀组FIB的升高与胆固醇的降低无相关性。结论 :调脂治疗不能同时降低CRP和FIB 。

风湿性心脏病和扩张型心肌病患者血脂与载脂蛋白测定结果分析

目的 通过测定风湿性心脏病 (RHD)和扩张型心肌病 (DCM)患者血脂与载脂蛋白水平 ,探讨RHD和DCM患者血脂与载脂蛋白异常的意义。方法 86例RHD患者、5 0例DCM患者和 10 6例健康体检者 ,采用酶法测定血脂。免疫比浊法测定载脂蛋白。结果 RHD和DCM患者血脂代谢异常主要表现为血脂和载脂蛋白的普遍降低 ,尤其是总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、载脂蛋白B(ApoB)在DCM组降低明显 ,异常率分别达4 0 .0 %、4 0 .0 %、70 .0 % ;与对照组相比 ,RHD和DCM患者TC、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白A I(ApoAI)均降低 (P <0 .0 5 ) ,而DCM组同时伴LDL C和ApoB明显降低 (P <0 .0 5 ) ;与RHD组比较 ,DCM组LDL C和ApoB明显降低 (P <0 .0 5 ,0 .0 0 1)。结论 RHD和DCM患者的血脂和载脂蛋白普遍降低 ,DCM患者降低更明显 。

他巴唑直流电离子导入治疗弥漫性甲状腺肿并功能亢进症近期疗效研究

目的 :观察他巴唑离子导入治疗对Ｇｒａｖｅｓ病的近期临床疗效。方法 :对 3 0例Ｇｒａｖｅｓ病患者于甲状腺部位给予他巴唑离子导入治疗 ,记录治疗前后的临床资料。并与 3 0例口服他巴唑的对照组进行治疗 4ｗ后的疗效、副作用的对比。结果 :他巴唑电离子导入组的疗效明显 ,但同对照组相比较 ,两组无显著差异 (Ｐ >0 0 5) ,治疗组未发现副作用。结论 :他巴唑电离子导入治疗Ｇｒａｖｅｓ病近期疗效确切无副作用 ,尤其适用于伴有肝功能异常。

吸烟对武警新战士运动应激血压的影响

目的:检测吸烟对武警新战士运动应激时血压的影响。方法:采用分层随机整群抽样方法对85名武警新战士进行活动平板运动应激试验。根据烟龄≤1年或≥3年且吸烟≥10支/d分为吸烟组和非吸烟组。测量2组运动前、运动应激高峰和恢复期2,8,12min的血压,观察血压恢复至运动前水平所需的时间以及升压的幅度。结果:①吸烟组运动后血压的峰值[(20.8±0.1)kPa]明显高于非吸烟组[(19.9±0.2)kPa],(P<0.01);②恢复8min时,非吸烟组收缩压基本恢复正常,吸烟组收缩压[(19.3±0.6)kPa]明显高于非吸烟组[(16.3±0.8)kPa],(P<0.05);③运动应激后吸烟组的舒张压变化不明显,非吸烟组的舒张压明显下降约1.3kPa,(P<0.05)。结论:吸烟对武警新战士运动应激时的血压(收缩压和舒张压)影响较大。

自体毛囊移植联合非那雄胺对雄激素性秃发治疗效果的研究

目的观察自体毛囊单位移植技术联合非那雄胺口服治疗男性雄激素性秃发的疗效。方法Hamihon分级为Ⅲ、Ⅳ级的雄激素性秃发男性患者90例，随机分为3组。药物组（30例）每天口服非那雄胺1mg，连服12个月；手术组（30例）行毛囊单位移植治疗；联合组（30例）毛囊单位移植术后开始每天口服非那雄胺1mg，连服12个月。各组均随访12个月，每次随访时对患者头皮毛发密度及治疗效果进行评价，并由患者填写满意度调查表，同时观察和记录不良反应。结果3种治疗方法在随访结束时均未出现严重不良反应，手术组在不同时间点治疗秃发区毛发密度、治疗效果评价及患者满意度均显著优于药物组，差异有统计学意义（P〈0．05）；联合组在不同的时间点治疗秃发区毛发密度、治疗效果评价及患者满意度均显著优于手术组和药物组（P〈0．05）。结论毛囊单位移植联合非那雄胺口服治疗雄激紊性秃发起效快，疗效明显，患者满意度高，值得推广。