佛手散改善谷氨酸钠诱导的PC12 细胞氧化应激损伤的作用机制

目的探讨佛手散改善谷氨酸钠诱导的PC12细胞氧化应激损伤的作用机制。方法将PC12细胞随机分为对照组、模型组、佛手散高剂量组、佛手散中剂量组、佛手散低剂量组。分别给予佛手散低剂量组、佛手散中剂量组、佛手散高剂量组32 mg/mL、64 mg/mL和128 mg/mL佛手散处理,给予对照组和模型组PBS处理。除对照组外,对其余4组PC12细胞建立谷氨酸钠诱导的氧化应激损伤模型。比较各组PC12细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽、丙二醛和活性氧簇的含量,以及凋亡相关蛋白[Caspase-3、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达水平。结果模型组PC12细胞的SOD和谷胱甘肽含量、Bcl-2蛋白表达水平均低于对照组,丙二醛和活性氧簇含量、Caspase-3和Bax蛋白表达水平均高于对照组(均P<0.05)。佛手散低剂量组、佛手散中剂量组、佛手散高剂量组PC12细胞的丙二醛和活性氧簇含量、Caspase-3和Bax蛋白表达水平均低于模型组,SOD和谷胱甘肽含量、Bcl-2蛋白表达水平均高于模型组(均P<0.05),且上述指标的变化总体上呈剂量依赖性。结论佛手散可以通过提高细胞的抗氧化能力及减少细胞凋亡,来抑制谷氨酸钠诱导的PC12细胞氧化应激损伤,从而发挥保护神经的作用。

佛手散治疗阿尔茨海默病分子机制的系统药理学研究

目的利用系统药理学方法和体外实验探究佛手散治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的分子机制。方法利用TCMSP、TCM-Mesh、ETCM和TCMID数据库筛选佛手散的活性成分;利用TCMSP、ETCM和PharmMapper数据库对活性成分进行作用靶点预测。利用DisGeNet、GAD、CTD、TTD、HPO和Orphadata数据库筛选出AD疾病相关靶点,并与佛手散活性成分作用靶点映射取交集,交集基因即为佛手散治疗AD的潜在作用靶点。通过String数据库构建佛手散治疗AD潜在作用靶点的蛋白互作(PPI)网络;利用Cytoscape3.6.1软件构建"活性成分-潜在作用靶点"网络。通过WebSestalt及David分析平台对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析,并进行体外实验验证。结果共筛选出佛手散52个活性成分,预测得到185个共同靶点,最终确定31个佛手散治疗AD的潜在作用靶点。GO功能富集分析结果表明,潜在作用靶点参与生物调控、刺激反应、细胞间通讯等生物学过程;细胞膜、蛋白复合物、囊泡参与等细胞组分;蛋白结合、离子结合、分子转导活性、水解酶活性等分子功能。KEGG富集分析得到13条信号通路。体外实验结果表明,佛手散对谷氨酸钠诱导损伤的PC12细胞有保护作用,可通过降低胞内Ca^(2+)浓度和NO含量达到降低细胞凋亡率的效果。结论佛手散在治疗AD方面具有多成分、多靶点、多途径的整体调控特点,可能与其通过豆甾醇、Z-藁本内酯、藁本内酯、β-谷甾醇等活性成分调控5-羟色胺能突触通路、神经配体-受体交互作用通路、Ca2+信号通路以及cGMP-PKG信号通路等多通路有关。