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除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究
被引量:
6
1
作者
雷红涛
冯伟雯
+4 位作者
沈玉栋
杨金易
王弘
方坚生
孙远明
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期1018-1023,共6页
制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2...
制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2×PBS,不含BSA、甲醇,建立的标准曲线IC50=1.7ng·mL-1,检测限为0.006ng·mL-1,检测范围0.06~2616.7ng·mL-1,批内变系数9.25%,批间变异系数23.55%。蒸馏水以及稀释10倍后的矿泉水、池塘水、稻田水添加1ng·mL-1和10ng·mL-1的丁草胺,用所建立的方法检测,平均回收率分别为93.27%、158.50%、119.75%、124.51%。本研究为进一步开发丁草胺免疫分析试剂盒奠定了基础。
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关键词
丁草胺
酶标抗体
直接竞争ELISA
除草剂
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职称材料
丁草胺人工抗原及抗体制备研究
被引量:
3
2
作者
雷红涛
肖治理
+4 位作者
方坚生
沈玉栋
刘文字
孙远明
冯伟雯
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期67-71,共5页
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,...
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,丁草胺人工抗原合成成功,获得了丁草胺小鼠抗血清。棋盘滴定法确定包被抗原工作浓度为3μg/ml,抗血清稀释倍数为32000倍。建立了间接竞争ELISA标准曲线,丁草胺IC50为1.44μg/ml,检测限为0.47μg/ml。
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关键词
丁草胺
人工抗原
抗血清
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职称材料
除草剂丁草胺人工抗原合成及其抗体制备研究
被引量:
1
3
作者
雷红涛
孙远明
+3 位作者
黄晓钰
王弘
方坚生
冯伟雯
《农产品加工(下)》
2005年第9期52-54,60,共4页
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外扫描法鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体.结果表明,巯基...
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外扫描法鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体.结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,抗血清能被丁草胺阻断,丁草胺人工抗原合成成功,获得了抗丁草胺多克隆抗体.
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关键词
丁草胺
半抗原
人工抗原
合成
抗体
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职称材料
题名
除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究
被引量:
6
1
作者
雷红涛
冯伟雯
沈玉栋
杨金易
王弘
方坚生
孙远明
机构
广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品安全研究所
出处
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期1018-1023,共6页
基金
国家自然科学基金(20477012)
广州市科技攻关重点项目(2004Z2-E0031)
文摘
制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2×PBS,不含BSA、甲醇,建立的标准曲线IC50=1.7ng·mL-1,检测限为0.006ng·mL-1,检测范围0.06~2616.7ng·mL-1,批内变系数9.25%,批间变异系数23.55%。蒸馏水以及稀释10倍后的矿泉水、池塘水、稻田水添加1ng·mL-1和10ng·mL-1的丁草胺,用所建立的方法检测,平均回收率分别为93.27%、158.50%、119.75%、124.51%。本研究为进一步开发丁草胺免疫分析试剂盒奠定了基础。
关键词
丁草胺
酶标抗体
直接竞争ELISA
除草剂
Keywords
butachlor
enzyme-labeled antibody
direct competitive ELISA
分类号
X839.2 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
丁草胺人工抗原及抗体制备研究
被引量:
3
2
作者
雷红涛
肖治理
方坚生
沈玉栋
刘文字
孙远明
冯伟雯
机构
广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品安全研究所
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期67-71,共5页
基金
国家自然科学基金项目(20377016)
广东省自然科学基金项目(032240)
粤满仓关键领域重点突破项目(2006A25005002)
文摘
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,丁草胺人工抗原合成成功,获得了丁草胺小鼠抗血清。棋盘滴定法确定包被抗原工作浓度为3μg/ml,抗血清稀释倍数为32000倍。建立了间接竞争ELISA标准曲线,丁草胺IC50为1.44μg/ml,检测限为0.47μg/ml。
关键词
丁草胺
人工抗原
抗血清
Keywords
butachlor
artificial antigen
antiserum
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
TS207.53 [轻工技术与工程—食品科学]
下载PDF
职称材料
题名
除草剂丁草胺人工抗原合成及其抗体制备研究
被引量:
1
3
作者
雷红涛
孙远明
黄晓钰
王弘
方坚生
冯伟雯
机构
广东省教育厅食品质量安全重点实验室
出处
《农产品加工(下)》
2005年第9期52-54,60,共4页
基金
国家自然科学基金(20477012)
广东省自然科学基金重点项目(036842).
文摘
以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外扫描法鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体.结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,抗血清能被丁草胺阻断,丁草胺人工抗原合成成功,获得了抗丁草胺多克隆抗体.
关键词
丁草胺
半抗原
人工抗原
合成
抗体
Keywords
butachlor
hapten
artificial antigen
synthesis
antibody
分类号
S482.26 [农业科学—农药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究
雷红涛
冯伟雯
沈玉栋
杨金易
王弘
方坚生
孙远明
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
下载PDF
职称材料
2
丁草胺人工抗原及抗体制备研究
雷红涛
肖治理
方坚生
沈玉栋
刘文字
孙远明
冯伟雯
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
下载PDF
职称材料
3
除草剂丁草胺人工抗原合成及其抗体制备研究
雷红涛
孙远明
黄晓钰
王弘
方坚生
冯伟雯
《农产品加工(下)》
2005
1
下载PDF
职称材料
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