神经生长因子修饰脂肪干细胞移植促进损伤脊髓的修复

背景:基因修饰的干细胞能够增加多肽和全长蛋白的分泌而起到保护脊髓损伤和促进神经元功能恢复的作用,因而成为近年来的研究热点。目的:探讨神经生长因子修饰的脂肪干细胞移植对大鼠脊髓损伤的保护作用。方法:贴壁培养法原代培养脂肪干细胞,免疫荧光法行表面标志物鉴定;脂质体介导神经生长因子质粒转染修饰脂肪干细胞,Real-time PCR及Western blot检测转染后神经生长因子的表达;改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,将转染后的脂肪干细胞注射移植入大鼠脊髓损伤部位,BBB评分评估修复效果;脂肪干细胞移植后3周处死大鼠,Real-time PCR及Western blot检测移植后损伤节段脊髓中神经生长因子的表达。结果与结论:原代培养脂肪干细胞获得成功,免疫荧光显示表面抗原CD29和CD44呈阳性表达;转染后脂肪干细胞中神经生长因子mR NA及蛋白表达增高;转染神经生长因子的脂肪干细胞移植后,大鼠BBB评分明显升高,损伤节段脊髓中神经生长因子mR NA及蛋白表达明显升高。结果表明经神经生长因子转染修饰的脂肪干细胞可促进大鼠脊髓损伤修复。

长链非编码RNA MALAT1在骨肉瘤细胞中的表达变化及其对细胞侵袭能力的影响

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录物1(lncRNA MALAT1)在骨肉瘤细胞中的表达变化及其对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响。方法 (1)采用qRT-PCR法检测骨肉瘤MG-63细胞及正常成骨细胞系h FOB1.19中的lncRNA MALAT1表达。(2)将MG-63细胞随机分为MALAT1沉默组和MALAT1非沉默组,分别转染MALAT1-siRNA质粒及con-siRNA质粒;转染48 h,采用qRT-PCR法检测lncRNA MALAT1表达,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测ROCK1蛋白表达。(3)将MG-63细胞随机分为对照组、MALAT1沉默组、MALAT1沉默+ROCK1对照组及MALAT1沉默+ROCK1过表达组,分别转染con-siRNA质粒、MALAT1-siRNA质粒、MALAT1-siRNA+pcDNA质粒、MALAT1-siRNA+oe-ROCK1质粒;转染48 h检测各组ROCK1蛋白表达和细胞侵袭能力。结果 (1)MG-63细胞lncRNA MALAT1相对表达量高于hFOB 1.19细胞(P<0.01)。(2)MALAT1沉默组lncRNA MALAT1相对表达量、细胞侵袭能力及ROCK1蛋白相对表达量均低于MALAT1非沉默组(P均<0.01)。(3)对照组、MALAT1沉默+ROCK1过表达组ROCK1蛋白表达及细胞侵袭能力均高于MALAT1沉默组、MALAT1沉默+ROCK1对照组(P均<0.01)。结论骨肉瘤细胞lncRNA MALAT1表达升高;lncRNA MALAT1可能通过调控ROCK1表达而参与骨肉瘤细胞侵袭。