慢病毒介导的Sox9基因在兔骨髓间充质干细胞的过表达促进软骨损伤修复

目的 :明确在体内Sox9基因过表达的兔骨髓间充质干细胞对于关节软骨损伤修复的作用。方法:以慢病毒介导的Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),体外检测软骨特异性分子,将新西兰大白兔24只48个膝关节随机分为3组,动物麻醉后,双侧股骨滑车处的关节面上用直径4 mm的钻头钻孔,深度3 mm,穿透软骨下骨,造成全层关节软骨损伤,将转染后的细胞植入体内用以修复全层关节软骨损伤,实验组植入BMSCs-(Lenti-Sox9-EGFP)-藻酸钙复合物,实验对照组植入BMSCs-藻酸钙复合物,空白对照组只钻孔。术后6、12周分别进行光镜、电镜观察,以及HE、免疫组织化学染色检测软骨的修复程度。结果:经Sox9基因转染后的细胞在3 d时,Sox9基因表达最高,随后下降。转染后3 d,Ⅱ型胶原开始表达,到14 d时达到最高。表明Sox9过表达启动了兔骨髓间充质干细胞的软骨分化。组织学观察显示,实验组术后6周缺损处有透明软骨样组织填充,术后12周缺损处软骨和软骨下骨修复良好。两对照组,缺损处由纤维组织填充。免疫组织化学显示,修复组织内Ⅱ型胶原,免疫组化染色结果阳性强于两对照组。组织学评分结果显示实验组软骨损伤修复各时间点效果明显优于两对照组,差异有统计学意义。结论:Sox9基因过表达的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)促进软骨损伤的修复。

前交叉韧带重建术后康复期应用透明质酸钠凝胶的疗效分析

目的 ：分析在关节镜下前交叉韧带重建术术后康复期第2阶段应用透明质酸钠凝胶的疗效。方法：回顾分析2013年1月至2014年1月行关节镜下单侧腘绳肌前交叉韧带重建术治疗前交叉韧带损伤的患者126例,分为两组：医用透明质酸凝胶注射72例：男39例,女33例,年龄18-43岁,平均（28.27±12.30）岁,病程1-40 d,平均25 d,于前交叉韧带重建术后1个月行透明质酸钠凝胶注射的患者,每周注射1次,连续注射3次;透明质酸钠凝胶未注射54例：男21例,女33例,年龄16-45岁,平均（29.14±10.23）岁,病程1-36 d,平均26 d,前交叉韧带重建术1个月后未行透明质酸钠凝胶注射的患者。对两组患者术后6个月之内的临床资料进行比较。采用轴移试验和Lachman试验检查患者的膝关节稳定性,在对术后4、6、8、12、24周时患者在该段康复期的Lysholm评分、关节活动度、股四头肌肌围的关节功能进行比较。结果：重复测量分析结果显示：两组的Lysholm评分、大腿周径在各时间点和组间交互差异无统计学意义（P〉0.001）,两组关节活动度各时间点与组间交互比较差异有统计学意义（F=197.354,P〈0.001）。Lysholm评分及大腿周径在注射后6、8、12、24周注射组均优于未注射组,统计结果有统计学意义（P〈0.001）;在术后6周与8周关节活动度组间比较差异有统计学意义（P〈0.001）,注射组优于未注射组。结论：关节镜下前交叉韧带重建术后康复期第2阶段应用透明质酸钠凝胶可以在术后康复期较好的提高患者的各项膝关节功能,在膝关节活动度的恢复中有确切疗效,远期疗效还需进一步观察研究。

关节镜下髌骨周围去神经化治疗煤矿工人髌骨软化症性髌股关节病的临床疗效分析

随着我们煤矿工人生活水平的提高及全民健身运动意识增强,来院骨科就诊的膝关节疼痛患者逐年增多。这些膝关节疼痛患者20%为单纯的髌股关节病变,一部分为继发于其他关节病变。大多数髌股关节病变可以采用保守治疗,无需手术治疗。而另一部分膝关节疼痛患者临床确诊为髌骨软化症,在经历保守治疗包括改变行为方式、不良生活习惯、应用药物等干预后,髌股关节的症状如疼痛、关节不稳有时伴交锁仍无改善,可考虑关节镜治疗。

氨甲环酸局部用药联合引流管夹闭对膝关节置换术后失血量的影响

近年来,随着我国社会人口老龄化的加快,接受人工膝关节置换的患者人数大幅增高。然而,手术创伤及术中止血带的使用等因素导致纤溶系统异常激活,造成患者大量失血的问题[1],一直困扰着骨科医师。在全膝关节置换术中使用止血带不仅能够减少术中出血量,还能使手术视野更加清晰[2]但松开止血带以后,血管内纤维蛋白溶解系统被激活,反而增加了术后出血量[3],大量渗血增加了围手术期风险,

周期性动态压力对海藻酸钠培养间充质干细胞成软骨分化的作用

目的观察延迟性周期性动态压缩应力对立体培养条件下骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响,探讨力学因素在软骨分化过程中的作用机制。方法 KM小鼠骨髓间充质干细胞分离,体外培养至第3代,与海藻酸钠混匀制作成海藻酸钠凝胶。根据实验设计,进行7 d的相应的预培养。实验分为4组:空白对照组:普通培养液组,静态培养;实验组:完全成软骨诱导液,后7 d加力培养;单纯诱导组:完全成软骨诱导液,静态培养14 d;阴性对照组:普通培养液,后7 d加力培养。于培养第7和14天分离各组细胞,采用RT-PCR分析SOX9、ROCK1及Col2的表达,应用免疫荧光技术对各组处理前后的Ⅱ型胶原蛋白(Col2)表达进行检测,Image J软件进行图像定量检测。正态计量资料采用均数±标准差表示,组间计量资料采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNKq检验法。结果预培养7 d后,实验组SOX9、Col2及ROCK1的mRNA表达与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。14 d后,实验组中压力干预组SOX9及Col2的mRNA表达与未受力组比较有统计学差异(P<0.01),ROCK1的mRNA表达与未受力组比较有统计学差异(P<0.01)。免疫荧光显示压力组Col2蛋白表达高于未受力组。结论延迟性周期性动态压缩应力可促进间充质干细胞成软骨分化,ROCK信号通路可能参与有关调控。

动态压力对间充质干细胞成软骨定向分化的作用

间充质干细胞（MSCs）被认为是软骨组织工程重要的种子细胞来源.在其向软骨细胞分化过程中,力学刺激参与对其的调控.我们通过在分化过程中施以周期性动态压缩力,观察软骨细胞相关因子的变化,探讨周期性压力在软骨形成过程中的作用机制.