基于网络药理学探究黄芪治疗口腔鳞状细胞癌的机制

目的:通过网络药理学理论及分子对接探究黄芪治疗口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)的可能机制。方法:从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)下载黄芪的有效成分及对应靶点,并通过癌症基因组图谱获取OSCC的差异表达基因集,筛选出的共同靶点即为黄芪治疗OSCC的潜在靶点。利用STRING数据库获取潜在靶点的相互作用关系,用Cytoscape软件构建黄芪治疗OSCC的潜在靶点相互作用网络图,并获得关键靶点。通过注释可视化和集成发现数据库(DAVID)和KOBAS数据库分别对潜在靶点进行基因本体论功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析并构建“靶点-信号通路”网络图。借助Schrodinger软件对关键靶点及相应的黄芪有效成分进行分子对接。结果:黄芪可通过66个潜在靶点治疗OSCC,包括周期蛋白依赖激酶1(Cyclin Dependent Kinase 1,CDK1)、信号转导和转录活化因子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)、雄激素受体蛋白(Androgen Receptor,AR)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)和微囊蛋白1(Caveolin-1,CAV1)。黄芪治疗OSCC的潜在靶点富集最显著的是肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)信号通路、细胞衰老和p53信号通路。关键靶点AR和黄芪相关有效成分均有良好的结合活性。结论:研究证明了黄芪治疗OSCC的多组分、多靶点和多通路特征,并为黄芪治疗OSCC的深入验证及黄芪在临床的合理应用提供科学依据。

异鼠李素对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制研究

目的:探讨异鼠李素对口腔鳞癌细胞(SCC-9、SAS)增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法:体外培养SCC-9、SAS细胞,加入不同浓度的异鼠李素,CCK-8法检测细胞活力。将SCC-9、SAS两种细胞分别分为3组:对照组(不予处理)、低剂量组和高剂量组。用平板克隆实验检测细胞集落形成情况,划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞水平及垂直迁移情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:随着异鼠李素浓度增加,SCC-9、SAS细胞增殖抑制率升高(P<0.05)。与对照组相比,两种细胞的低剂量组和高剂量组克隆形成率和水平迁移率降低,垂直迁移细胞数减少,两种细胞的高剂量组细胞凋亡率升高(均P<0.05)。SCC-9、SAS细胞高剂量组PI3K110、PI3K85、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、S6、p-S6蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05)。结论:异鼠李素可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制口腔鳞癌细胞的增殖、迁移,并促进细胞凋亡。

大体积悬空承台施工技术

西部湘渝山区地形复杂,场地险恶,诸多高速桥梁不可避免的需穿越沟谷、悬崖峭壁,大体积悬空承台的施工越来越普遍。以干溪沟2号特大桥为例,介绍了在湘渝山区桥梁大体积悬空承台施工中采用在桩身预埋钢牛腿,然后安装型钢支架后再浇筑混凝土承台的施工工艺,为类似工程提供施工参考。

二苯乙烯苷对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移及凋亡的作用机制研究

目的探讨中药单体二苯乙烯苷(TSG)对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、迁移及凋亡的影响及其分子机制。方法将SCC-9细胞分为3组:空白对照组(0μmol·L^(-1)TSG)和低、高2个浓度实验组(14,28μmol·L^(-1)TSG)。用划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移水平,用流式细胞仪测定凋亡率,用实时荧光定量-PCR法检测抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)基因表达水平,用蛋白印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达水平。结果空白对照组和低、高2个浓度实验组于24 h的平均水平迁移率分别为(48.00±5.87)%,(19.30±1.34)%和(17.16±1.50)%;这3组的垂直迁移细胞数分别为73.00±9.17,32.67±3.21和24.33±4.04;这3组的细胞凋亡率分别为(11.10±0.70)%,(23.17±1.03)%和(36.10±1.32)%;这3组的bcl-2基因的相对表达水平分别为1.03±0.02,0.39±0.09和0.15±0.04;这3组的PI3K蛋白表达水平分别为0.18±0.02,0.14±0.01和0.15±0.01;这3组的Akt蛋白表达水平分别为0.26±0.03,0.13±0.01和0.19±0.01;这3组的mTOR蛋白表达水平分别为0.47±0.05,0.38±0.01和0.34±0.02。上述指标:低、高2个浓度实验组与空白对照组相比,差异均有统计学差异(均P<0.05)。结论 TSG具有抑制口腔癌细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的抗癌特性,并可抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。