野生型枯草芽孢杆菌N4的spizizen转化法优化

采用经典Spizizen方法将已构建的大片段重组质粒p HT01-nit(nit为腈水解酶基因)转化野生型枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis N4,无法获得转化子。研究对Spizizen方法进行改进,分别在感受态制备及转化过程中加入有机溶剂及溶菌酶,并对有机溶剂种类、浓度,溶菌酶浓度,质粒与感受态共培养时间进行优化,提高转化效率,构建Bacillus subtilis N4-p HT01-nit。经IPTG诱导,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacryamide gel electrophoresis,PAGE)验证nit在野生型枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis N4中的表达。结果表明,最优条件为在感受态制备过程中添加4%的Tween-80,转化过程中添加5μg·m L-1溶菌酶,感受态与质粒共培养时间为1 h,条件优化后可得到37个转化子·μg-1DNA。在SDS-PAGE上可以看到与腈水解酶分子质量一致的蛋白条带。说明该优化后的方法效果明显,适合于大片段重组质粒转化野生型枯草芽孢杆菌。

链霉菌Da07210抗菌活性物质发酵优化分析

链霉菌Da07210能产生对香蕉枯萎病病原菌有强烈抑制作用的活性物质。采用单因子实验和正交试验对其发酵条件进行优化。优化后的发酵培养基为:葡萄糖1.0%、甘油1.0%、大豆粉1.5%、硫酸铵0.5%。优化后的培养条件为:初始p H值7.0、培养温度28℃、种龄48 h、接种量8%、培养时间144 h、摇床转速200 r/min。

辣木的药用价值及应用研究

辣木所含营养丰富,是一种功能神奇的热带保健植物,有着潜在的药用价值和悠久的利用历史。综述近年来辣木营养价值、医疗功效,以及所含功能活性物质的研究成果及辣木药用价值的研究进展,展望辣木的开发应用前景。