薯蓣皂苷通过GSK3β/Nrf2/HO-1通路改善尿酸诱导的HK-2细胞氧化应激损伤的作用及机制研究

目的探讨薯蓣皂苷(dioscin)对尿酸(uric acid,UA)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激损伤的影响及分子机制。方法将HK-2细胞分为正常组、模型组(尿酸刺激造模)、条件对照组(尿酸+DMSO)和薯蓣皂苷组(尿酸+薯蓣皂苷)。通过尿酸诱导HK-2细胞氧化应激损伤模型;采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞活性氧(ROS)水平,Real-time PCR法检测糖原合成激酶3(GSK3β)、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)在mRNA水平的表达,Western Blot法检测GSK3β、磷酸化糖原合成激酶3(p-GSK3β)、Nrf2及HO-1在蛋白水平的表达。结果经尿酸刺激后,HK-2细胞的活力明显下降,ROS水平明显升高(均P<0.001)。经薯蓣皂苷治疗后,HK-2细胞的活力增加,ROS水平明显降低(均P<0.001)。在蛋白及mRNA水平上,尿酸刺激后Nrf2和HO-1的表达均下降,薯蓣皂苷干预后Nrf2和HO-1表达均明显增加(均P<0.001)。在蛋白水平上,模型组细胞p-GSK3β/GSK3β比值较正常组明显下降,经薯蓣皂苷干预后p-GSK3β/GSK3β比值升高(均P<0.001)。结论薯蓣皂苷可能是通过促进GSK3β的磷酸化,激活Nrf2/HO-1通路,从而缓解尿酸诱导的HK-2细胞氧化应激损伤。

丹参酮ⅡA对尿酸诱导的肾小管上皮细胞纤维化模型线粒体损伤和相关炎症因子的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA对尿酸诱导肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化模型的保护作用并分析其作用机制。方法:制备尿酸溶液诱导的HK-2细胞纤维化模型,实验分为正常对照组、模型组、DMSO对照组及丹参酮ⅡA组。CCK-8法检测HK-2细胞增殖,流式细胞术检测HK-2细胞凋亡,ELISA检测IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平,Western Blot检测线粒体损伤相关蛋白DRP1、p-DRP1(S616)、p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达,线粒体荧光探针观察线粒体形态。结果:丹参酮Ⅱ_(A)可抑制HK-2细胞纤维化模型的线粒体损伤与炎症反应。与正常对照组比较,模型组细胞增殖率显著降低,IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平及总凋亡率和DRP1、p-DRP1(S616)蛋白表达显著升高,p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,丹参酮ⅡA组的增殖情况有显著改善,IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平及总凋亡率和DRP1、p-DRP1(S616)蛋白表达显著降低,p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),线粒体得到保护。结论:丹参酮ⅡA可通过抑制线粒体损伤及炎症改善尿酸诱导的HK-2细胞纤维化。

丹参酮Ⅱ_(A)对尿酸诱导的HK-2细胞凋亡及肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响

目的:探讨尿酸诱导HK-2细胞纤维化后丹参酮Ⅱ_(A)对细胞增殖、凋亡及肾小管上皮细胞-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法:体外培养HK-2细胞,分为4组:正常对照组、模型组、DMSO组、丹参酮Ⅱ_(A)组。观察各组细胞形态,并用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫荧光及Western Blot检测各组EMT标志性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:与正常对照组比较,模型组及DMSO组细胞形态发生明显改变,细胞活力显著降低,细胞凋亡比例显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低,α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组及DMSO组比较,丹参酮Ⅱ_(A)组细胞形态得到明显改善,细胞活力显著增强,细胞凋亡比例显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05);模型组与DMSO组比较各项检测指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参酮Ⅱ_(A)能抑制尿酸的诱导HK-2细胞凋亡,并通过上调E-cadherin的表达,下调α-SMA的表达,缓解尿酸的诱导HK-2细胞EMT,从而起到抗肾纤维化的作用。

化湿泄浊祛瘀汤配方颗粒HPLC指纹图谱研究

目的:采用HPLC法建立化湿泄浊祛瘀汤配方颗粒指纹图谱,为其质量标准建立提供依据。方法:采用Ultimate AQ C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以水-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为330 nm;柱温为40℃;进样量为20μL。结果:建立了化湿泄浊祛瘀汤配方颗粒的HPLC指纹图谱,标定了63个共有峰,并指认了其中6个成分,分别为隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、苍术素、落新妇苷、大车前苷,10批化湿泄浊祛瘀汤配方颗粒指纹图谱与对照图谱的相似度为0.842~0.998。聚类分析和主成分分析均将10批样品分为2类。结论:该研究建立的化湿泄浊祛瘀汤配方颗粒HPLC指纹图谱方法简便,结果可靠,可为其质量控制和评价提供参考。

“双创”背景下中医药健康养生文化发展问题及对策研究

扎实推进中医药健康养生文化的创造性转化与创新性发展,是党和政府近年来繁荣发展中医药文化事业的重要任务。中医药健康养生文化的内涵与实践方式随着社会的发展逐步更新并丰富。中医药事业与产业的高质量发展,亦需要不断总结、反思与改进。现阶段,我国中医药健康养生文化尚存在人才结构布局失衡、中医药文化宣传力度薄弱,以及中医药文化创意产业扶持力度不足等问题,建议通过合理规划人才队伍结构,促进资源合理布局;统筹部署宣传任务,创新改进宣传方式;健全延伸产业链条,构建中医产业集群等方式推进中医药传承创新和现代化建设,开辟中国式中医药现代化发展之路。

基于SWOT分析茂名市中医药产业发展现状及对策研究

茂名具有广博富饶的中医药资源,中医文化底蕴丰厚,区位交通便捷,且茂名地区的中医药产业框架雏形已初步建成,并产生了一定的聚集效应。然而,茂名中医药产业的发展仍存在产业链不完整、多元融合差、产业延伸较短等不足之处,故运用SWOT分析法分析茂名中医药产业发展现状,阐释目前茂名中医药产业发展过程中的优势、劣势、机会与威胁。根据分析结论提出茂名中医药产业发展的对策,主要包括健全延伸产业链条,构建中医产业集群;打造地方中医药品牌,重塑市场竞争力;推出中医药休闲旅游线路,带动地方康养产业发展等方面。

基于“两创”方针的康养产业发展路径--以中医药健康养生文化品牌塑造为例

“创造性转化、创新性发展”方针(以下简称“两创”方针)是党中央治国理政新理念新思想新战略的重要内容,也是建设社会主义文化强国的重要方针,有利于传承中华优秀传统文化。在“两创”方针的指导下,塑造一批更具竞争力的中医药健康养生文化品牌已成为时代要求。本文认为,应立足国家发展战略,紧跟行业发展趋势,充分发掘中医药文化资源,打造地方特色中医药文化品牌,构建完整的中医药现代产业体系,推动中医药健康养生文化的创造性转化、创新性发展。

四逆散证病机量化分析

【目的】量化分析四逆散的配伍特点并深入挖掘四逆散证的病机。【方法】将《伤寒论》所载经方纳入数据库中,采用分别记录的原则处理药物的剂量与炮制方法的差异问题;运用双层频权剪叉算法,计算每味药物的功效权值,进而计算出四逆散的功效权值并判定其功效强度,最后归纳四逆散证的病机特点。【结果】四逆散的Ⅲ级功效为疏肝、止痛;Ⅱ级功效为升阳;Ⅰ级功效为行气、止汗、清热、治心悸;-Ⅰ级功效为益胃、和胃、潜阳、发汗、燥湿、利水、化湿;-Ⅱ级功效为降气。【结论】四逆散证病机为枢机不利、阳郁不达,病位在少阴,治之在厥阴。

药理学教学方法新探

药理学是基础医学向临床医学过渡的桥梁学科,主要内容是研究药物与机体相互作用及其作用规律的一门学科。该学科讲授药物的种类多,药理作用多,不仅令广大医学生难记忆,同时也考验着药理学授课老师的教学水平。研究者从自身学习药理学的经验出发,探索药理"教"与"学"的新方法,解决药理"教"与"学"难题,提高学生的学习兴趣。

鹅不食草酒精浸液治疗慢性单纯性鼻炎嗅觉丧失验案1则

慢性单纯性鼻炎是发生在鼻腔黏膜和黏膜下层的慢性炎症。临床以间歇性或交替性鼻塞为特点，鼻涕量略多，呈黏液性。久病者可有嗅觉减退。可有伤风鼻塞反复发作史。慢性单纯性鼻炎属中医学“鼻窒”范畴。笔者从中医整体观念和辨证论治的角度出发，治疗1例慢性单纯性鼻炎伴嗅觉丧失患者，效果满意，现报道如下。