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融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
被引量:
1
1
作者
冯均尚
窦文芳
+3 位作者
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期124-129,共6页
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融...
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
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关键词
融合蛋白GGH
类似物
毕赤酵母
表达
纯化
活性
下载PDF
职称材料
高色温水族金卤灯的色温漂移特性
2
作者
冯均尚
《中国照明电器》
2011年第3期5-8,共4页
色温在10 000K以上的高色温水族用金卤灯在寿命期间普遍出现严重的色温漂移现象,颜色鲜艳的蓝光会逐渐变淡,灯管的色坐标逐渐向白光区域漂移。通过改进制灯工艺、调整灯管设计等措施,使高色温水族用金卤灯的色温漂移程度得到了很好的改善。
关键词
高色温金卤灯
色温漂移
光谱变化
原文传递
题名
融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
被引量:
1
1
作者
冯均尚
窦文芳
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
机构
江南大学药学院制药工程研究室
江南大学药学院生物活性制品加工工程研究室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期124-129,共6页
基金
江苏省科技支撑计划(BE2009629)
文摘
GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
关键词
融合蛋白GGH
类似物
毕赤酵母
表达
纯化
活性
Keywords
Fusion protein GGH Analogue Pichia pastoris Expression Purification Bioactivity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
高色温水族金卤灯的色温漂移特性
2
作者
冯均尚
机构
南京中电熊猫照明有限公司
出处
《中国照明电器》
2011年第3期5-8,共4页
文摘
色温在10 000K以上的高色温水族用金卤灯在寿命期间普遍出现严重的色温漂移现象,颜色鲜艳的蓝光会逐渐变淡,灯管的色坐标逐渐向白光区域漂移。通过改进制灯工艺、调整灯管设计等措施,使高色温水族用金卤灯的色温漂移程度得到了很好的改善。
关键词
高色温金卤灯
色温漂移
光谱变化
Keywords
high color temperature metal halide lamp
color temperature drift
spectrum variation
分类号
TM923.328 [电气工程—电力电子与电力传动]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究
冯均尚
窦文芳
张晓梅
许泓瑜
史劲松
许正宏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
2
高色温水族金卤灯的色温漂移特性
冯均尚
《中国照明电器》
2011
0
原文传递
已选择
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