MP对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用及自噬的影响

目的了解甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用及自噬的影响。方法采用改良Allen′s重物打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将75只大鼠随机分为3组:假手术组、手术组和MP组,每组25只。MP组在急性脊髓损伤模型成功后立即经尾静脉注射MP(30 mg/kg),假手术组在打开椎板后不损伤脊髓。分别于损伤后4 h、12 h、1 d、3 d和7 d,采用Basso Beattie Bresnahan(BBB)运动功能评分;RT-PCR方法检测损伤的脊髓组织中炎症因子IL-1βm RNA和IL-6 m RNA的表达情况。于损伤后第3 d取脊髓组织用免疫荧光染色法检测自噬相关蛋白Beclin-1和caspass-3在各组的表达情况;用Tunel法检测各组凋亡情况。结果假手术组4 h、12 h、1 d、3 d和7 d,BBB分值分别为:19.8±0.8、19.1±0.4、20.5±0.5、20.4±0.5和20.1±0.5;MP组各个时间点BBB分值分别为:1.2±0.1、5.8±0.3、7.2±0.3、9.4±0.4和12.3±1.1;手术组各个时间点BBB分值分别为:0.6±0.1、0.7±0.1、2.2±0.2、2.5±0.2和3.3±0.2;假手术组大鼠的活动不受限,MP组的BBB评分值在各个时间点均高于手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。MP组中IL-1βm RNA和IL-6 m RNA的表达在大鼠急性脊髓损伤后12 h、1 d和3 d相对表达量分别为0.43±0.07、0.39±0.08、0.46±0.03和0.26±0.04、0.17±0.03、0.28±0.02,与手术组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组Beclin-1阳性神经细胞数量为:51.0±2.0,MP组数量为235.0±10.0,手术组数量为430.0±25.0;假手术组Caspase-3阳性细胞数量为18.0±2.0,手术组为:45.0±4.0,MP组为76.0±3.0,假手术组凋亡细胞数量为:14.0±2.0,手术组为51.0±3.0,MP组为75.0±3.0,与手术组相比,在急性脊髓损伤后3天MP组中Beclin-1阳性细胞数目、caspass-3的表达和凋亡细胞数目都明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用甲基强的松龙降低炎症反应,显著抑制大鼠急性脊髓损伤神经细胞自噬活动,降低凋亡相关蛋白的表达,减少神经细胞的凋亡从而对大鼠急性脊髓损伤后神经元细胞有保护作用。