1例犬糖尿病并发皮肤感染的诊治

文章介绍了1例老年犬糖尿病并发皮肤感染的诊治情况,通过止血、清创、消毒、抗菌、消炎、降糖等方法进行对症治疗,消除并发症,取得了良好效果,为犬糖尿病及并发症的诊治提供参考。

禽腺病毒4型Penton和Fiber1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

为开展禽腺病毒4型(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton)和纤丝蛋白(Fiber1)多克隆抗体的制备及评价,研究通过对Penton和Fiber1基因优势抗原表位基因片段进行生物信息学分析,设计特异性引物PCR扩增获得Penton和Fiber1优势抗原表位基因片段,将其克隆至原核表达载体pColdⅠ,转入表达宿主菌BL21(DE3)进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,将纯化、鉴定后的目的蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对抗体进行Western blot鉴定及间接ELISA抗体效价测定。结果可见,FAdV-4 Penton基因序列共编码525个氨基酸,Fiber1基因序列共编码432个氨基酸,其优势抗原表位点分别有7、6个区域,且均集中于N端;成功构建pColdⅠ-P和pColdⅠ-F1重组原核表达质粒,其诱导表达的重组蛋白Penton和Fiber1均与His标签单抗发生特异性反应,动物免疫获得的Penton、Fiber1多克隆抗体均能与目的蛋白反应形成特异性条带,且Penton多克隆抗体效价高于Fiber1多克隆抗体。综上,研究获得的纯化重组蛋白Penton较Fiber1蛋白表达量更高,免疫后血清抗体效价更高,更具有制备多克隆抗体的优势。

禽腺病毒血清型4通过JAK/STAT信号通路调控鸡胚心脏成纤维细胞炎症反应的研究

为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用western blot检测FAd V-4感染后CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;以40μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂Ruxolitinib预处理CEF细胞2 h后,将FAd V-4按MOI 5感染CEF细胞,在感染后不同时间分别收集细胞和上清,采用western blot检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;采用q PCR检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用ELISA检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果显示,与不感染FAd V-4的空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后IL-6和IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),IL-1β基因的转录水平在后期显著上调(P<0.05),TNF-α基因的转录水平在前期无变化,后期极显著上调(P<0.01);western blot结果显示,与空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后p-JAK2蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01),且48 h p-JAK2蛋白的表达水平最高。Western blot结果显示,与FAd V-4感染组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞及Ruxolitinib处理的CEF中p-JAK2蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01),Ruxolitinib组与空白对照组无显著差异;q PCR结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),TNF-α基因的转录水平显著上调(P<0.05);ELISA结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-8分泌水平极显著上调(P<0.01),TNF-α分泌水平显著上调(P<0.05)、IL-1β和IL-6分泌水平无显著变化,与转录水平结果基本一致。本研究上述结果首次证实FAd V-4可以诱导鸡胚心脏CEF细胞产生强烈的炎症反应,并激活了该CEF细胞中的JAK/STAT信号通路,该研究结果为深入阐明FAd V-4感染心脏细胞的致病机制提供一定的参考依据。

禽腺病毒血清型8a感染病例的实验室诊断

为查明贵州省德江县某养鸡场饲养鸡发病死亡的原因,采集6只病死鸡的心脏、肝脏、肺脏、脾脏、脑组织作为检测病料,采用PCR、qRT-PCR方法进行新城疫病毒、禽流感病毒、禽腺病毒(血清型8a、血清型4)核酸检测。结果:禽腺病毒血清型8a的核酸检测结果为阳性;新城疫病毒、禽流感病毒、禽腺病毒血清型4的核酸检测结果均为阴性。结论:病例存在禽腺病毒血清型8a感染。

牛支原体与附红细胞体混合感染病例的实验室诊断

为了确诊贵州省铜仁市某养牛场牛群发病的原因,采集病牛鼻拭子、耳静脉血各6份,分别进行牛支原体核酸检测、附红细胞体核酸检测和血液检查。结果:从3份鼻拭子样品中检出牛支原体核酸阳性;2份血液样品中检出牛附红细胞体核酸阳性,血液检查可见大量星芒状的红细胞。结论:牛场病例存在牛支原体与附红细胞体混合感染。

鸡沙门氏菌临床分离株的鉴定与耐药性分析

为了解六盘水市某养殖场鸡群沙门氏菌的感染及耐药性情况,采集该场3只病死鸡的肝脏、脾脏进行细菌分离培养,应用细菌形态学观察、生化试验和分子生物学方法进行鉴定,并用药敏纸片法进行药物敏感性试验。结果:从病例中分离培养的3株细菌在普通琼脂培养基上呈圆形、白色半透明、湿润光滑、边缘整齐的菌落,在麦康凯培养基上呈圆形、隆起、无色透明的菌落,均符合沙门氏菌的菌落形态特征;分离菌革兰氏染色镜检为革兰氏阴性杆菌,14种肠杆菌科细菌生化管试验结果与沙门氏菌生化特性相符;16S rDNA扩增和基因测序结果显示分离菌与沙门氏菌亲缘关系最近;药物敏感性试验结果显示分离菌对恩诺沙星、复方新诺明、羧苄西林高度敏感,对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、强力霉素中度敏感,对青霉素、红霉素、阿莫西林耐药。结论:临床分离的3株细菌为沙门氏菌,表明鸡场存在沙门氏菌感染,可选取高度敏感药物进行治疗。

禽腺病毒血清4型感染引起宿主炎症信号通路变化的研究进展

禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)是一种能引起家禽心包积液-肝炎综合征(hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS)的双链DNA病毒。近年来,病毒感染引起宿主信号通路变化的研究备受关注,对机体信号转导通路的作用有了全新的认识。目前为止,研究发现FAdV-4感染引起宿主发生炎症反应的信号通路主要有TLRs、NF-κB、JAK/STAT、UPR、Caspase-1、LXR-α、JNK/MAPK、STING和TNF通路等。本文对FAdV-4感染引起宿主的相关信号通路变化进行阐述,分析由FAdV-4感染引起机体信号转导通路变化而产生的一系列炎症反应等,以期为进一步探索FAdV-4感染宿主诱导炎症的分子机制研究提供思路和参考。