广藿香醇在小肠缺血再灌注损伤中的肠道保护作用分析

目的初步探究岭南道地药材广藿香中标志性成分广藿香醇(PA)在小肠缺血再灌注损伤中对肠道的保护作用,以便发掘广藿香新的药用价值。方法实验分为假手术组、模型组及PA低、中、高剂量组,PA各剂量组连续7 d预防性灌胃给予PA后,通过结扎肠系膜上动脉后再复通建立小肠缺血再灌注模型,假手术组行假手术,再灌注4 h后检测小肠中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、脂多糖(LPS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,并按Chiu 6级评分法对小肠组织进行病理学半定量评分,同时通过TUNEL染色,计算细胞凋亡指数。结果与假手术组相比,模型组TNF-α、IL-6、LPS、SOD、MDA含量,组织病理学评分,细胞凋亡指数均明显升高(P<0.05或0.01),在PA保护性干预后,组织病变情况有所改善,低、高剂量组能明显降低小肠缺血再灌注损伤大鼠肠组织中的TNF-α、SOD和MDA含量,高剂量组还可降低IL-6含量及细胞凋亡指数,但PA对降低肠组织中LPS含量无明显作用。结论初步发现广藿香醇可抑制由缺血再灌注损伤引起的肠道细胞凋亡,并可降低机体的氧化应激压力及炎症因子水平,从而保护肠道组织。

利用D-900树脂对巴戟天多糖脱色工艺进行优化

研究D-900阴离子交换树脂对巴戟天多糖的最佳脱色工艺。采用D-900阴离子交换树脂对巴戟天多糖进行静态和动态吸附试验,考察不同温度、树脂用量、流速和pH值等因素对吸附过程的影响,以脱色率和多糖保留率综合评价其脱色效果。最佳工艺参数为:采用动态吸附,柱溶液温度45℃、流速1.0BV/h、上样液pH6.0。使用D-900阴离子交换树脂对巴戟天多糖脱色可以获得较好的脱色率以及较高的多糖保留率。

气相色谱法同时测定三川丹皮酚膏中4种成分含量

目的建立同步测定三川丹皮酚膏中樟脑、薄荷脑、龙脑和丹皮酚4种成分含量的气相色谱法。方法使用气相色谱仪,ZB-WAX毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)。以氮气为载气,氢火焰离子化检测器,采用程序升温,外标法测定含量。结果三川丹皮酚膏中的樟脑、薄荷脑、龙脑和丹皮酚等4种物质在规定范围内有良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.82%、99.28%、98.72%、97.35%。结论本方法简便,灵敏度高,重复性好,结果准确,适合于三川丹皮酚膏中樟脑、薄荷脑、龙脑和丹皮酚的含量测定。

GC法测定蛇脂膏中冰片(龙脑)的含量

目的建立气相色谱法（GC）测定蛇脂膏中冰片（以龙脑计）的含量。方法采用GC法，色谱柱为石英毛细管柱007—225（30m×0．25mm×0．25μm）；程序升温，起始温度110℃，保持0．5min，以每分钟30℃升温至140℃，保持2min，再以每分钟50℃升温至190℃，保持1．5rain，最后以每分钟20℃升温至205℃，保持1min，分流比10：1，FID检测器；检测器温度为280℃。结果用GC法测定蛇脂膏中冰片（以龙脑计）在O．0516～0．1548mg／mL范围内呈良好的线性关系，线性方程为：Y=10．36X＋0．0322，r=0．9995。平均回收率97．94％（n=6），RSD为2．0％。结论本方法简便、准确、快速，可用于蛇脂膏的质量控制。

天然化合物抗肿瘤活性研究

目的:利用MTT法检测天然化合物对肿瘤细胞的杀伤作用,寻找有抗肿瘤潜力的先导化合物。方法:药物和细胞按所需浓度于96孔板中,恒温培养48h,加入5μg/mlMTT溶液20μl/孔,4h后吸弃100μl/孔上清液,加入MTT裂解液100μl/孔,孵育过夜,用酶标仪检测各孔吸光值,根据Reedand Menuch法计算IC50值。结果:在对人肝癌细胞株HepG2的毒性试验中,化合物Qiu17、Qiu33、Qiu22对细胞的抑制率均略低于50%,而阳性对照药物DDP则有明显的抑制肿瘤活性。结论:化合物Qiu17,Qiu33,Qiu22有一定的的抗肿瘤活性作用性。

山珠半夏提取纯化工艺研究

目的:探讨山珠半夏的最佳提取纯化工艺,以便更有效、合理地开发利用云南山珠半夏植物资源。方法:以总游离氨基酸的含量为指标,采用正交试验法对中药山珠半夏的提取工艺进行优选,并对其纯化方法进行考察。结果:最佳的纯化方法为微孔滤膜过滤法,最佳提取工艺条件为20倍量40%乙醇,70℃水浴中连续回流提取2次,每次0.5h;且此方法简便、稳定、工艺合理。

急、慢性高尿酸血症模型的建立

目的拟通过建立急性小鼠与慢性大鼠高尿酸血症模型,并采用阳性药验证两种模型的可治愈性,为抗高尿酸药物的研发提供模型工具。方法急性痛风模型小鼠采用腹腔注射次黄嘌呤联合皮下注射氧嗪酸钾的方法造模,造模后半小时阳性组给予别嘌醇片,造模后2 h测定血尿酸、血肌酐、血清尿素氮及肝黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。慢性痛风大鼠每天灌胃腺嘌呤及乙胺丁醇盐酸盐造模,阳性组每天给予别嘌醇片,连续21 d后检测血尿酸、血肌酐、血清尿素氮、肝XOD活性并进行肾组织病理学检测。结果急、慢性痛风模型动物血尿酸、血肌酐均显著升高(P<0.05),慢性痛风大鼠还可见血清尿素氮及肝XOD活性显著升高(P<0.05),肾小管间质损伤及尿酸盐结晶加重,评分显著升高(P<0.05)。阳性药别嘌醇可显著降低急、慢性高尿酸动物的血尿酸值,降低慢性高尿酸动物的血肌酐值、肝XOD活性,改善肾损伤及减少尿酸盐结晶(P<0.05)。结论本实验所采用的方法适用于建立急、慢性高尿酸血症动物模型,并可用于药物药效学观察。

天然蛋白与酵母β-葡聚糖组合物增强免疫力功能研究

目的:拟通过5项免疫功能试验,评价乳清蛋白和小麦蛋白与酵母β-葡聚糖组合物是否具有增强免疫力的功效。方法:BALB/c小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、组合物低、中、高剂量组。组合物剂量组灌胃组合物溶液,阳性对照组灌胃转移因子口服溶液,30 d后通过脾淋巴细胞增殖试验、迟发型变态反应试验、血清溶血素试验、小鼠碳廓清试验以及NK细胞活性试验。结果:与阴性对照组相比,组合物低剂量组可增强巨噬细胞的吞噬能力,中剂量组可提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、血清溶血素的生成水平及增强巨噬细胞的吞噬能力,高剂量组可提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力及NK细胞活性。结论:乳清蛋白、小麦蛋白与酵母β-葡聚糖组合后具有良好的免疫增强功效,其作用以提高细胞免疫及增强巨噬细胞吞噬能力为主,以提高体液免疫及增强NK细胞活性为辅。

慢性疲劳综合征大鼠模型相关指标观测

目的采用拥挤等复合应激制作慢性疲劳综合征(CFS)大鼠模型,并观测相关指标。方法综合运用不定期的拥挤、噪音和昼夜颠倒等不同的应激因子长期温和刺激大鼠,造模持续64 d。观察大鼠精神状态、皮毛色泽,每周测体质量,每月进行半定量评分和摄食量测定,采血检测血常规、免疫球蛋白G(Ig G)及血乳酸的含量,试验期末强迫游泳测定不动时间。结果与正常对照组比较,造模大鼠自主活动减少、精神萎靡、皮肤松弛、毛发变黄、耳尾颜色淡红少泽,半定量评分值升高;体质量、摄食量下降;白细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞比容等下降;强迫游泳后不动时间、血乳酸和Ig G上升。结论采用拥挤、噪音和睡眠紊乱成功构建CFS大鼠模型,半定量评分、大鼠体质量、摄食量、白细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞比容、强迫游泳后不动时间、血乳酸和Ig G可以作为参考指标。

2款保健食品配方辅助降血糖试验研究

目的探讨2款保健食品配方益气养阴清热降糖方与滋阴补肾降糖方对糖尿病大鼠的辅助降血糖作用。方法 SD大鼠给予基础饲料适应1周后转喂3周高热能饲料,第5周腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立Ⅱ型糖尿病模型,第1周基础饲料适应的同时,分别给予益气养阴清热降糖方与滋阴补肾降糖方低(1.8 g/kg)、高(3.6 g/kg)剂量药液,连续34 d,结束实验时检测空腹血糖、糖耐量、血清胰岛素及计算胰岛素抵抗指数。结果与模型组比较,益气养阴清热降糖方低剂量组0.5 h糖耐量血糖值下降;滋阴补肾降糖方低剂量组空腹血糖值下降、高剂量组空腹血糖值、0.5 h糖耐量血糖值、胰岛素抵抗指数下降有统计学差异(P<0.05)。结论益气养阴清热降糖方与滋阴补肾降糖方可有效降低Ⅱ型糖尿病大鼠的糖耐量,滋阴补肾降糖方在降低Ⅱ型糖尿病大鼠的空腹血糖以及改善胰岛素抵抗情况方面,作用优于益气养阴清热降糖方。

慢性尿路感染大鼠模型的动态变化研究

目的建立慢性尿路感染大鼠模型并研究相关指标的动态变化。方法雌性SD大鼠经膀胱处注入大肠杆菌液,以诱导慢性尿路感染大鼠模型,并灌胃盐酸左氧氟沙星治疗。第0、7、14、21、28天动态检测动物体温、尿细菌数、血常规及BUN、Cr值的变化。第31天进行肾脏及膀胱感染菌计数及组织病理学检测。结果模型对照组在第7、14天体温显著升高(P<0.05);第7～28天尿细菌数、第30天肾脏及膀胱感染菌数明显增多(P<0.05);第30天膀胱及肾脏病理检查可见炎性细胞浸润及黏膜下层血管扩张充血。盐酸左氧氟沙星组尿细菌数、肾脏及膀胱染菌数明显下降(P<0.05),膀胱及肾脏炎症明显减轻。结论此法适用于建立慢性尿路感染大鼠模型及进行药效学观察。

中药冰片对足底切口痛大鼠的镇痛作用研究

试验旨在研究中药冰片对足底切口痛大鼠的镇痛作用,为实验动物使用与管理委员会(IACUC)福利伦理审查和动物术后镇痛用药选择提供参考。将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、复方利多卡因乳膏组以及中药冰片低、高剂量组,每组10只大鼠。建立足底切口痛大鼠模型,术后连续3 d给药,中药冰片低、高剂量组和复方利多卡因乳膏组分别局部表面给予4%、8%中药冰片溶液以及复方利多卡因乳膏,每天2次,单次3 s,间隔约1 h;假手术组、模型组局部表面给予等体积溶媒。末次给药1 h后,测定大鼠的热痛阈值,试验结束测定血常规和血清生化等指标。结果显示:术后2、24和36 h,假手术组、复方利多卡因乳膏组和中药冰片高剂量组的热痛阈值均显著高于模型组(P<0.05)。与模型组相比,术前各组热痛阈值及术后各组大鼠血常规和血清生化指标差异均不显著(P>0.05)。研究表明,中药冰片可提高足底切口痛大鼠术后热痛阈值,有效缓解足底切口痛大鼠的术后疼痛,对大鼠血常规和血生化未见明显影响,可作为动物试验术后局部镇痛的药物选择。

番茄红素蜂胶胶囊改善大鼠前列腺增生的实验研究

目的:探究番茄红素蜂胶胶囊对去势雄性大鼠前列腺增生的改善作用。方法:雄性去势SD大鼠,皮下注射丙酸睾丸素建立前列腺增生模型,灌胃给予番茄红素蜂胶胶囊,考察其对大鼠前列腺湿质量、前列腺体积、SOD、MDA水平及前列腺组织结构的影响。结果:高剂量番茄红素蜂胶胶囊能降低前列腺增生大鼠的前列腺指数(PI)及前列腺增生率(P<0.05),并提高组织中SOD活力(P<0.05)。结论:番茄红素蜂胶胶囊具有改善实验性前列腺增生的作用。

胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠模型的建立及其比较

目的为制备成功、稳定的胰岛素抵抗合并高尿酸血症(IR-HUA)模型,比较了IR-HUA模型、高尿酸血症(HUA)模型、胰岛素抵抗(IR)模型的制备方法。方法选用40只雄性SD大鼠,按体质量随机分为正常对照组(A组)、HUA模型组(B组)、IR-HUA模型组(C组)和IR模型组(D组),A组、B组喂饲普通饲料及饮用水; C组、D组喂饲自制高脂饲料及质量分数10%果糖水;造模8周,第6周始, B组、C组大鼠每日灌胃酵母膏(16 g/kg) 21 d;于实验第6、8周末取样检测相关指标。结果实验第8周末,与A组相比, B组血尿酸(SUA)、尿尿酸(UUA)、尿酸排泄总量及尿酸排泄分数(FEUA)均升高; C组空腹胰岛素(FINS)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值均下降,UUA浓度、FEUA均升高,排尿体积下降; D组Lee’s指数下降,空腹血糖(FPG)升高, FINS下降,UUA浓度升高,排尿体积、尿酸排泄总量均下降,血、尿肌酐均升高。结论给雄性SD大鼠每日灌胃酵母膏(16 g/kg) 21 d可制备HUA模型;单纯给予高脂高糖饮食8周诱导大鼠IR模型欠理想,大鼠未呈现出明显的IR特征, IR-HUA模型制备方法有待进一步完善。此外,高脂高糖饮食可致大鼠排尿体积减少,尿酸排泄下降;并可致大鼠胰岛素分泌减少,导致血糖升高。

如何提高病毒外源因子检测中小鼠和乳鼠检查法的成功率

随着生物制品在临床上的应用日益广泛,其安全性也备受关注。根据国家规定,拟上市的生物制品需依照2015版药典要求进行病毒外源因子检测以控制其质量,但其中较为关键的小鼠、乳鼠检查法在实际操作中存在一定的困难,导致检测结果易出现假阴性或假阳性,有鉴于此,本文以广东省医学实验动物中心丰富的检测经验为依据,对小鼠及乳鼠检查法的关键点进行归纳总结,拟提供高效实用的操作方法并提高该检查法的成功率。

中药冰片对腹部切口大鼠血生化和血常规的影响

探讨中药冰片对腹部切口大鼠体重变化、血生化和血常规的影响。取50只大鼠区组随机分组,建立腹部切口大鼠模型,中药冰片低剂量组、中药冰片高剂量组和双氯芬酸钠肠溶片组分别灌胃给予0.0125 g/kg体重、0.05 g/kg体重的冰片和5 mg/kg体重双氯芬酸钠肠溶片混悬液,假手术组、模型组灌胃给予0.5%CMC-Na溶液,术后连续2d,2次/d。术后24 h内、48 h内称重、称摄食、摄水量,术后48 h内测定大鼠血常规白细胞(WBC)、中性细胞数(NEUT)、淋巴细胞数(LYM)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)和总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CK)。与模型组比较,24 h内中药冰片高剂量组和双氯芬酸钠肠溶片组体重变化、双氯芬酸钠肠溶片组摄食量、48 h内双氯芬酸钠肠溶片组体重变化、中药冰片低剂量组和双氯芬酸钠肠溶片组BUN均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。与假手术组比较,24 h内模型组体重变化、24 h、48 h内摄食量和48 h内血清尿素氮(BUN)均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各组血常规11项均无显著性差异(P>0.05)。中药冰片对腹部切口大鼠术后有一定镇痛效果,相对安全。对血清尿素氮可能有一定影响,进行动物术后镇痛和相关试验研究用药时需关注动物反应情况。

也论登封—新密煤田滑动构造成因机理

登封—新密煤田的滑动构造,引起了地质界的广泛讨论,不少同志对这一构造的成因、发展及现状做了大量的考察研究工作,发表了许多重再的见解,这对丰富地质科学理论及地质找矿、矿山生产方面都有着重要的意义。笔者在勘探工作中发现不少钻孔遇到的滑动构造现象,为查清滑动范围、滑面轨迹及对煤层的影响,作了一定的工作。现结合部分资料、通过分析对比,对滑动构造的成因机理、发展阶段及现存滑体的解释提出个人粗浅看法。

玉米须总黄酮对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠模型相关代谢指标的影响

目的观察玉米须总黄酮(TFSM)对胰岛素抵抗合并高尿酸血症(IR-HUA)模型大鼠血清尿酸(SUA)等相关代谢指标及胰岛素抵抗(IR)状态的影响。方法选用60只雄性SD大鼠,按体质量随机分为正常对照组、IR-HUA模型组(简称IR-HUA组)、吡格列酮阳性对照1组(简称吡格列酮组)、苯溴马隆阳性对照2组(简称苯溴马隆组)、TFSM高剂量组(简称TFSM.H组)和TFSM低剂量组(简称TFSM.L组)。正常对照组喂饲普通颗粒饲料和正常饮用水,其余各组每天喂饲高热能饲料及10%果糖水,连续8周;第7周始(d43),各给药组灌胃相应药液,正常对照组、IR-HUA组灌胃2%吐温80 CMC-Na溶媒,每日1次,连续15 d;给药3~4 h后,正常对照组灌胃0.5%CMC-Na溶液,其余各组灌胃腺嘌呤溶液(150 g/kg体质量),每日1次,连续15 d。结果与正常对照组相比,IR-HUA组的Lee’s指数及尿酸排泄分数(FEUA)增加;同时,IR-HUA组的空腹血糖(FPG)及HOMA-IR指数升高,空腹胰岛素(FINS)略有升高。与IR-HUA组相比,苯溴马隆组体长增加,Lee’s指数降低;苯溴马隆组、TFSM.H组、TFSM.L组的SUA及UUA浓度略有降低而排尿体积略有增加,吡格列酮组、苯溴马隆组、TFSM.H组、TFSM.L组的尿酸排泄总量均略有下降,但吡格列酮组、苯溴马隆组、TFSM.L组的FEUA均略有增加;同时,吡格列酮组、苯溴马隆组、TFSM.H组的FPG、FINS、HOMA-IR指数及TFSM.L组的FINS均略有降低。此外,苯溴马隆组、TFSM.H组的SUA水平与FEUA具有相关性。结论 IR-HUA模型大鼠在SUA升高的同时伴随FPG、Lee’s指数及HOMA-IR指数升高,表明制备的IR-HUA模型是成功的;TFSM、吡格列酮、苯溴马隆均显示出一定的促进模型大鼠肾脏排泄尿酸、降低SUA水平以及改善IR状态的作用趋势;SUA水平与肾脏尿酸排泄能力密切相关。

缺血时间差异对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响研究

目的从氧化损伤途径及组织病理学层面评价小肠缺血时间对小肠缺血再灌注模型的影响,为该疾病的研究提供建模条件及基础数据。方法24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血30 min组、缺血1 h组、缺血2 h组,各造模组结扎肠系膜上动脉使缺血一定时间后,再灌注4 h诱导缺血再灌注损伤模型。恢复供血4 h后大鼠安乐死,取10%肠组织匀浆后通过试剂盒对应检测,比较小肠组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)水平,HE染色观察肠组织形态,并测量小肠绒毛高度及黏膜厚度。结果与假手术组比较,缺血30 min组及缺血1 h组的SOD、GSH-Px、MDA水平显著升高(P<0.05),缺血30 min、1 h及2 h均可使炎性细胞浸润加重,病理Chiu’s评分显著升高(P<0.05),此外,缺血1 h及2 h还可显著降低小肠绒毛高度及黏膜厚度(P<0.01)。但缺血2 h可引起动物死亡(死亡率33.3%)。结论缺血1 h再灌注4 h建立的小肠缺血再灌注模型的氧化指标及肠道组织形态最为理想,该条件下建立的小肠缺血再灌注模型适用于疾病研究及药物开发。

黄芪多糖注射液生物活性检测的测量不确定度评定

目的:按《中华人民共和国兽药典(2015年版)》二部黄芪多糖注射液的要求,测定黄芪多糖注射液的生物活性,通过分析不确定度来源建立不确定度评价的数学模型,从而对该实验的不确定度进行评定。方法:将120只BALB/c小鼠随机分为阴性对照组6组、给药组6组,10只/组,共12组,给药组小鼠腹腔注射黄芪多糖注射液,0.5 mL/只,阴性对照组给予等量的氯化钠注射液,1次/d,连续7 d。末次注射24 h后计算平均脾指数。并通过数学模型,从注射过程、动物称重、脾脏称重方面进行不确定度的分析与评定。结果:给药组与阴性对照组平均脾指数的差值Y=7.31±3.31,k=2,符合《中华人民共和国兽药典(2015年版)》二部黄芪多糖注射液生物活性中给药组与对照组平均脾指数差值应≥2的规定。结论:注射给药用注射器、动物体重和脾脏重量为不确定度主要来源。