非编码RNA在脑缺血再灌注损伤中的作用

脑卒中(stroke)是导致成年人残疾和死亡的第二大病因,缺血性脑卒中约占所有脑卒中病例的87%^([1]),成为了现代社会健康和生活质量的主要威胁。缺血性脑卒中(ischemic stroke)由于脑血流量严重减少,脑组织缺乏血液和氧气供应,最终导致神经元细胞死亡和脑梗死^([2])。

左西孟旦在心脏术后心肾综合征患者中的应用

目的探讨左西孟旦在心脏术后心肾综合征(CRS)患者中的临床疗效,寻找由心功能不全导致肾功能不全的新治疗方法。方法统计143例心脏术后早期心肾综合征患者,其中A组68例未使用左西孟旦,B组75例患者术后早期使用左西孟旦,对比2组术后第1、2、3日血管活性正性肌力药物评分(VIS),脑钠肽前体(pro BNP)、肾小球滤过率(e GFR)、尿量、主动脉球囊反搏(IABP)和持续肾替代治疗(CRRT)使用情况及ICU停留时间。结果 2组在术前心功能、手术体循时间无明显差异(P>0.05),术后第1日B组VIS即小于A组且有差异(P<0.05);第2日B组pro BNP浓度小于A组(P<0.05);第3日B组e GFR及尿量均高于A组(P<0.05);CRRT使用患者比例B组小于A组(P<0.05),IABP使用率无差异。结论左西孟旦在心脏术后心肾综合征患者中的应用可减少儿茶酚胺类药物的使用量,改善心功能,增加尿量,有助于肾功能恢复。

1例小儿心脏移植术后口服抗免疫排斥药物早期依从性的护理

全球每年有超过500例儿童心脏移植病例,其中1岁～10岁的占37%左右,在小于10岁的儿童中复杂先天性心脏病占移植病因的56%[1],儿童心脏移植是复杂先天性疾病重要治疗方法之一。在国内关于小儿心脏移植的病例报道并不多见,国内报道最小年龄的心脏移植受体为8岁。

大鼠野百合碱肺高压模型基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达

目的 观察基质金属蛋白酶（MMP）-1、-9在大鼠野百合碱肺高压模型中的表达.方法 SD大鼠24只,随机分为野百合碱注射组（MCT）和对照组（Con）.MCT组给予野百合碱60 mg/kg单次右侧皮下注射.饲养6周后,采集肺组织样本进行肺小动脉形态学测量,原位杂交和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测.结果 MCT组肺小动脉横断面的厚度指数（TI）及面积指数（AI）的均值都高于Con组（TI：0.41±0.13比0.13 ±0.07,P＜0.05;AI：0.64±0.15比0.23 ±0.11,P＜0.05）.MMP-1、-9主要分布于肺小动脉内皮细胞和外膜成纤维细胞,MCT组肺组织中MMP-1、-9mRNA转录水平高于对照组（0.72±0.13比0.28±0.01,P＜0.05;0.85±0.15比0.39±0.12,P＜0.05）.结论 MMP-1、-9活性表达的增强,参与了肺高压肺血管重构的机制.

维替泊芬对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化的影响

目的探讨维替泊芬(VP)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化是否有抑制作用及对心功能的影响。方法 6周龄C57BL/6小鼠(购自中山大学实验动物中心)随机分为4组。对照组予以尾静脉注射1%二甲基亚砜(DMSO);ISO组予以皮下注射ISO (每天20 mg/kg);VP组予以尾静脉注射VP(每天2 mg/kg);ISO+VP组分别予以皮下注射ISO(每天20 mg/kg)和尾静脉注射VP(每天2 mg/kg)。连续给药7 d后行超声心动图检查评估心脏形态及功能。取材后行心脏质量、心脏体重比测定,天狼猩红染色检测心肌纤维化变化情况。酶联免疫吸附测定(ELISA)血浆氨基末端脑钠素原(NT-pro BNP)浓度。组间比较采用单因素方差分析。结果成功建立了ISO诱导小鼠心脏纤维化模型。ISO组小鼠的左心室收缩末内径[(2.20±0.63) mm比(1.44±0.45) mm,F=9.730,P<0.05]及容积[(18.33±12.17) μl比(6.32±5.04) μl,F=8.890,P<0.05]较ISO+VP组增大,差异有统计学意义,左心射血分数(EF)较ISO+VP组降低[(56.65±11.41)%比(82.35±10.30)%,F=15.670,P<0.05],差异有统计学意义;ISO组小鼠的心脏质量[(0.11±0.01) mg比(0.10±0.01) mg,F=13.560,P<0.05]及心脏体重指数[(0.57±0.03)%比(0.51±0.02)%,F=23.950,P<0.05]均大于ISO+ VP组,差异有统计学意义;ISO组小鼠血浆NT-pro BNP浓度较VP组升高[(0.57±0.16) μg/L比(0.23±0.07) μg/L,F=9.340,P<0.05],差异有统计学意义;天狼猩红染色结果显示ISO组小鼠左室心肌纤维化较ISO+VP组严重[(17.48±5.85)%比(9.27±2.62)%,F=30.190,P<0.05],差异有统计学意义。结论 VP可抑制ISO诱导的心脏纤维化并改善左心收缩功能。

DACT2对H9C2心肌细胞心力衰竭标志物的影响

目的探讨β-连环蛋白抑制基因2(DACT2)过表达对H9C2心肌细胞心力衰竭标志物的调控作用及其分子机制.方法以Ad-DACT2-绿色荧光蛋白(GFP)及其对照空载体Ad-CON177-GFP腺病毒液感染H9C2心肌细胞后,利用荧光显微镜观察H9C2心肌细胞的感染效率;利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测DACT2过表达效率;RT-qPCR检测DACT2过表达后心力衰竭标志物α-肌球蛋白重链(α-MHC)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)和心钠素(ANF)的表达改变;Western blot检测DACT2过表达后Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)和转化生长因子-β(TGF-β)/Smad通路关键蛋白表达变化.两组间比较采用独立样本t检验.结果绿色荧光显示细胞感染成功;与空载组比较,DACT2过表达组的mRNA和蛋白水平均明显增加(t=11.291,t=31.469,P<0.01),提示过表达模型构建成功;心力衰竭标志物oα-MHC(t=3.922,P< 0.05)、ANP(t=5.895,P<0.01)、BNP(t=30.195,P <0.01)和ANF(t=8.074,P<0.01)的表达水平明显降低,β-MHC(t=1.553,P>0.05)的表达水平无明显变化;DACT2过表达后Smad4的表达(=9.510,P<0.05)明显上调,其他因子的表达无显著改变.结论 DACT2通过上调Smad4抑制心力衰竭标志物的表达.

ABT-737通过上调NIX介导的线粒体自噬缓解大鼠低氧性肺动脉高压

目的观察ABT-737对大鼠低氧性肺动脉高压（PAH）肺血管重构的作用，并从NIX介导的线粒体自噬方面探讨其可能的机制。方法采用随机数表法将18只SD大鼠平均分为3组（n=6）：对照组、缺氧组（其中死亡1只）、处理组。后两组大鼠置于低氧环境饲养4周，每天8h。处理组大鼠低氧饲养前，腹腔注射15mg／kgABT-737，另外两组注射等量溶剂。4周后，检测右室收缩压（RVSP）及右室肥厚指数（RVHI），并作肺血管组织学分析，计算中层厚度指数（Wn）。Western blot法检测大鼠肺组织NIX、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ／LC3-Ⅰ及外膜转运酶（Tom）20蛋白的表达。结果对照组、缺氧组、处理组大鼠RVSP分别为（15．76±1．27）、（43．16±4．34）、（29．77±2．21）mmHg（1mmHg=0．133kpa），RVH1分别为0．28±0．04、0．37±0．02、0．29±0．03，WT1分别为（6．51±2．46）％、（14．60±2．33）％、（10．20±3．24）％。与对照组比较，缺氧组大鼠RVSP、RVHI及wTI显著增高（P值分别为0．000、0．002和0．000）。处理组较缺氧组大鼠RVSP、RVHI及WTI显著降低（P值均为0．000），但RVSP及WTI仍较对照组增加（P值均为0．000）。缺氧组NIX蛋白表达（0．93±0．11）比对照组（0．60±0．13）上调（P=0．001），而处理组（1．25±0．12）更高（P=0．000）。处理组大鼠LC3-Ⅱ／LC3-Ⅰ（1．59±0．53）较对照组（0．71±0．32）和缺氧组（0．94±0．20）均显著上调（P=0．006，P=0．032）。缺氧组Tom20蛋白表达（1．20±0．23）较对照组（0．84±0．15）显著升高（P=0．009），ABT-737干预能显著降低Tom20蛋白（0．97±0．08，P=0．040）。结论低氧导致大鼠肺循环压力升高、肺血管重构并且Tom20蛋白表达增加，而ABT-737可以通过上调NIX的表达，促进线粒体自噬，降解Tom20，缓解低氧诱导的PAH。

miRNA在深、中低温停循环中的表达及其对肠道保护的影响

目的探讨不同温度停循环期间肠道miRNA表达是否有差异及对肠道保护的影响。方法16只猪随机分入4组：深低温停循环（DHCA，18℃）组、中低温停循环（MHCA，24℃）组、体外循环（CPB）组及假手术（s0）组。各组动物分别经历80minDHCA／MHCA、305minCPB及维持常温305min。采用定制Real—timePCR芯片检测miRNA变化情况，DHCA和MHCA对肠道miRNA的表达影响分别通过直接方法（DHCA对MHCA）和间接方法比较（DHCA／SO对MHCA／SO；DHCA／CPB对MHCA／CPB）。结果DHCA组引起肠道组织miRNA的改变数目少于MHCA组（9／304对25／304；8／304对18／304），不同温度低温停循环问7个miRNA（miR-122，miR-145—5p，miR-421-5p，miR-99a，miR-365—5p，miR-31和miR．192）表达差异有统计学意义。结论从miRNA角度而言，DHCA的肠道保护作用优于MHCA；不同温度低温停循环问肠道miRNA表达具有差异。