电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs相关HCN亚型及钙离子震荡特性的影响

目的观察电针对逼尿肌过度活动(detrusor overactivity,DO)大鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channels,HCN)相关亚型表达水平及细胞内钙离子震荡特性的影响。方法40只Wistar雌性大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和药物组,每组10只。除对照组外,其余大鼠均采用环磷酰胺腹腔注射制备DO模型,电针组在模型基础上给予电针次髎和会阳,每日1次,每次20 min,连续3 d;药物组予甲磺酸伊马替尼灌胃,每日1次,连续3 d。对照组、模型组和药物组大鼠同电针组予以对照捆绑固定20 min,对照、模型和电针组同药物组予以同等体质量计量的饮用水灌胃处理,均每日1次,连续3 d。采用Western Blot和RT-PCR检测HCN1-44种亚型的表达,运用钙离子成像技术检测电针对ICCs内钙离子震荡特性的影响。结果与对照组比较,模型组大鼠膀胱ICCs相关HCN1和HCN2的蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和药物组HCN1和HCN2的蛋白和mRNA表达均降低(P<0.05);4组HCN3、HCN4比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠膀胱ICCs内钙离子震荡幅度、频率和宽度明显升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和药物组膀胱ICCs内钙离子震荡频率和幅度均下降(P<0.05),而钙离子震荡宽度无明显变化(P>0.05)。结论电针可能通过抑制DO大鼠膀胱ICCs起搏通道相关HCN1和HCN2的表达,及降低ICCs内钙离子震荡的幅度和频率,达到调控DO的作用。

电针对逼尿肌无力大鼠尿动力和离体逼尿肌条收缩性的影响

目的以逼尿肌无力大鼠为研究对象,采用尿动力学检测和离体逼尿肌条牵拉实验,动态观察电针的效应。方法160只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、药物组,每组40只。采用液氮冻伤方法建立逼尿肌无力大鼠模型。假手术组不做造模处理,仅给予开腹后缝合;模型组逼尿肌无力造模成功后不予治疗;电针组逼尿肌无力造模成功后,予电针次髎、会阳穴;药物组逼尿肌无力造模成功后,予皮下注射0.1%新斯的明0.02 mL,每日2次。为了进行动态观察,每组又随机分为4小组(对应不同时段分为处理后2 h、24 h、48 h、72 h),每小组10只。采用尿动力检测技术分析膀胱动力学特征,离体逼尿肌条牵拉实验分析膀胱离体逼尿肌条收缩性。结果造模后大鼠膀胱容量、残余尿量较假手术大鼠增加(P<0.05);经过电针及皮下注射新斯的明治疗后逼尿肌无力大鼠膀胱容量、残余尿量均较模型组降低,平均排尿速度较模型组升高(P<0.05);且电针治疗后2 h大鼠平均排尿速度高于其他3个时间段(P<0.05)。逼尿肌无力模型组大鼠离体逼尿肌条收缩幅度和频率均低于假手术组(P<0.05);电针及皮下注射新斯的明治疗后逼尿肌无力大鼠离体逼尿肌条收缩幅度、频率均较模型组升高(P<0.05),且电针治疗后2 h离体逼尿肌条收缩幅度大于其他3个时间段(P<0.05)。结论电针能改善离体逼尿肌条收缩功能,改善膀胱尿动力。且电针的效应具有动态变化的特点,治疗后2 h逼尿肌无力大鼠平均排尿速度和离体逼尿肌条收缩幅度的改善效应最佳。

逼尿肌过度活动大鼠电针后不同时间点的尿动力与离体逼尿肌条收缩性研究

目的 通过观察逼尿肌过度活动(DO)大鼠电针后不同时间点的尿动力变化与离体逼尿肌条收缩性改变,为临床针刺治疗的动态时效性研究提供基础研究的依据。方法 160只Wistar雌性大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和药物组,每组各40只,每组进一步随机分为4个亚组(对应不同时间点:干预后2 h、24 h、48 h和72 h),每个亚组各10只。除对照组外,其余大鼠均采用环磷酰胺腹腔注射制备DO模型,电针组给予电针次髎和会阳穴,药物组予甲磺酸伊马替尼灌胃,对照组、模型组、药物组和电针组大鼠均予以捆绑固定20 min,对照组、模型组、电针组大鼠予以和药物组大鼠同等体质量计量的饮用水灌胃处理,均每日1次,连续3 d。采用尿动力检测技术分析各时间点上大鼠的膀胱有效容量、储尿时间和排尿压力变化;利用离体逼尿肌牵拉实验观察各组膀胱离体逼尿肌条收缩性变化。结果 最终纳入统计分析的大鼠共124只。造模后,模型组大鼠膀胱有效容量和储尿时间明显小于对照组(P<0.05);干预后2 h、24 h、48 h、72 h各时间点,电针组与药物组的大鼠膀胱有效容量和储尿时间较模型组均显著升高(P<0.05),但电针组与药物组之间差异无统计学意义(P>0.05);干预后24 h,电针组大鼠膀胱有效容量和储尿时间高于其余3个时间点(P>0.05)。模型组大鼠离体逼尿肌收缩幅度低于对照组,而收缩频率高于对照组(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠在24 h时间点逼尿肌收缩幅度显著上升(P<0.05),升高趋势一直持续到干预后72 h,而药物组逼尿肌收缩幅度无升高的趋势;电针组与药物组均可降低DO模型大鼠膀胱逼尿肌肌条收缩频率,且在24 h时间点效果最为显著(P<0.05)。结论 电针可有效提高DO大鼠膀胱有效容量和储尿时间,增加离体逼尿肌收缩幅度,稳定逼尿肌收缩频率,其效应至少持续至针刺后72 h,且电针干预后24 h效应最佳。

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠高雄激素血症及卵巢雄激素受体表达的影响

目的:观察电针不同穴位对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠高雄激素血症和卵巢雄激素受体(AR)表达影响的作用差异,探讨电针治疗PCOS的可能机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、足三里组、关元组、三阴交组、综合组,每组10只。采用来曲唑灌胃诱导PCOS模型。足三里组、关元组、三阴交组电针干预相应穴位,综合组同时电针所有穴位,每次20min,每日1次,连续14d。治疗后测量大鼠体质量、卵巢质量,HE染色观察卵巢形态结构,酶联免疫吸附法检测血清性激素水平和性激素结合球蛋白(SHBG),计算游离雄激素指数(FAI),免疫组化法检测卵巢卵泡AR的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠体质量和卵巢质量明显增加(P<0.01),血清睾酮(T)和FAI水平明显升高(P<0.01),雌二醇(E2)和SHBG水平明显降低(P<0.01),卵巢晚期卵泡AR蛋白表达增加(P<0.05)。各电针组与模型组比较,体质量均明显减轻(P<0.05),卵巢形态改善,T和FAI显著降低(P<0.01),足三里组、关元组和综合组E2、SHBG明显升高(P<0.01,P<0.05),关元组卵巢质量明显降低(P<0.01)。关元组和三阴交组晚期卵泡AR蛋白表达较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。结论:电针不同穴位对PCOS大鼠高雄激素血症和卵巢多囊形态均有改善作用,不同穴位对PCOS大鼠的干预特点不同,临床可根据PCOS患者不同的临床表现选穴。

电针对压力性尿失禁大鼠盆底MMPs和TIMPs表达的影响

目的:探讨针刺肾俞穴和会阳穴对压力性尿失禁(SUI)大鼠盆底组织基质金属蛋白酶(MMPs)及组织金属蛋白酶抑制物(TIMPs)表达的调控作用。方法:采用阴道扩张及双侧卵巢切除法建立SUI大鼠模型。以尿动力学(膀胱容量和腹压漏尿点压)结合喷嚏试验判断模型是否成功。造模成功的大鼠随机分为模型组、肾俞组和会阳组。模型组不予任何处理;肾俞组和会阳组大鼠分别在双侧肾俞穴和会阳穴给予电针治疗,连续3 d。治疗结束后,取各组大鼠尿道下阴道前壁组织,PCR检测盆底组织MMPs和TIMPs mRNA表达水平,Western blot检测盆底组织MMPs和TIMPs蛋白表达水平。结果:(1)造模后,与正常大鼠比较,造模大鼠的最大膀胱容量和腹压漏尿点压明显降低(P<0.05),喷嚏试验阳性率为88.89%,提示SUI模型造模成功。(2)与模型组比较,电针肾俞、会阳穴可降低盆底组织MMP-1、MMP-2、MMP-3、TIMP-1、TIMP-2和TIMP-3 mRNA表达水平(P<0.05),下调MMP-1、MMP-3、TIMP-1和TIMP-3蛋白表达水平(P<0.05),并升高TIMP-1/MMP-1和TIMP-3/MMP-3蛋白表达比值(P<0.05)。会阳组大鼠MMP-1、MMP-2和MMP-3 mRNA表达水平显著低于肾俞组(P<0.05)。结论:电针肾俞、会阳穴可上调SUI大鼠盆底组织TIMP-1/MMP-1、TIMP-3/MMP-3蛋白表达比值,这可能是针刺治疗SUI的机制之一,且会阳穴作用优于肾俞穴。

电针不同穴位对多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育及相关因素的影响

目的:观察电针不同穴位对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵泡发育、促性腺激素、促性腺激素相关受体表达及卵巢抗苗勒氏管激素(AMH)、抑制素B(INHB)水平的影响,探讨电针治疗PCOS的可能机制。方法:雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、足三里组、关元组、三阴交组、综合组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠用来曲唑连续灌胃21 d诱导PCOS模型,足三里组、关元组、三阴交组分别选取"足三里""关元""三阴交"进行电针干预,综合组3穴同时进行电针干预,均干预14 d。干预结束后用HE染色法进行大鼠卵泡计数,用酶联免疫吸附法检测血清促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、INHB、AMH水平,用免疫组织化学法检测卵巢FSH受体(FSHR)和LH受体(LHR)的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠的生长期卵泡数及血清LH、LH/FSH、AMH、INHB水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),而FSH水平、早期卵泡中FSHR和LHR表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,三阴交、关元和综合组的生长期卵泡数明显下降(P<0.05,P<0.01),关元、足三里和综合组INHB水平明显下降(P<0.01),4个电针组的LH、LH/FSH、AMH水平均明显下降(P<0.01),而4个电针组的FSH均明显升高(P<0.01),足三里组大鼠早期卵泡FSHR阳性表达明显升高(P<0.05),足三里组和关元组大鼠早期和晚期卵泡LHR阳性表达均明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论:电针"关元""三阴交""足三里"及电针3穴均可减少PCOS大鼠生长期的卵泡数量并调节大鼠性腺激素的表达水平。在上调血清FSH和下调LH/FSH比值、AMH、INHB及改善促性腺激素受体表达方面,电针"关元"和电针"足三里"的作用明显优于电针"三阴交";而在下调LH水平方面,电针"三阴交"的作用明显优于电针"关元";但3个穴位之间没有协同作用。

电针对间质性膀胱炎大鼠脊髓背角p-ERK1/2和c-fos表达的影响

目的:观察电针"次髎""会阳"对间质性膀胱炎(IC)大鼠脊髓背角磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及原癌基因(c-fos)表达的影响。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组各6只。采用环磷酰胺腹腔注射的方法建立IC大鼠模型。电针组于"次髎""会阳"给予电针干预,20 min/次,1次/d,连续3 d。造模后48 h及干预后24 h观察大鼠膀胱疼痛行为变化;Western blot法检测脊髓腰6至骶1节段p-ERK1/2和c-fos蛋白的相对表达量;免疫荧光染色法检测右侧脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的表达。结果:与空白组比较,模型组膀胱机械疼痛阈值降低(P<0.05),脊髓p-ERK1/2和c-fos的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的免疫荧光面密度值均升高(P<0.05)。与模型组比较,电针组治疗后膀胱机械疼痛阈值升高(P<0.05),脊髓p-ERK1/2和c-fos的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的免疫荧光面密度值均降低(P<0.05)。结论:电针"次髎""会阳"可提高IC大鼠膀胱机械疼痛阈值,调节脊髓痛觉过敏,发挥镇痛作用,其机制可能与降低脊髓背角中p-ERK1/2和c-fos的表达有关。

嘌呤能信号在膀胱功能及相关疾病中的研究进展

嘌呤能信号对膀胱的功能有着重要的调节作用,嘌呤能信号的异常生成、释放和(或)嘌呤能受体的异常表达,导致的嘌呤能信号通路过度激活是许多泌尿疾病的共同特征。目前药物治疗在下尿路症状的治疗中多集中在对储尿期逼尿肌活动的调控,在储尿期感觉传入过敏的症状上存在一定局限性。随着对嘌呤能信号通路研究的深入,发现嘌呤能信号广泛分布于膀胱中,不仅涉及排尿期膀胱传出神经对逼尿肌的调节,还参与储尿期膀胱传入神经对感受刺激的调节,在改善下尿路症状方面更具优势,具有良好的临床应用前景,本文将对嘌呤能信号在膀胱的作用及相关疾病的研究进展进行综述,以期为后续研究提供参考。

针刺对膀胱过度活动大鼠膀胱尿路上皮Piezo1介导机械刺激的影响

目的观察针刺对膀胱过度活动(OAB)大鼠膀胱尿路上皮Piezo1机械激活离子通道的影响,探讨针刺调节膀胱机械刺激敏感性的作用机理。方法50只雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、Piezo1拮抗剂组及Piezo1拮抗剂+针刺组,每组10只。采用环磷酰胺腹腔注射制备OAB模型。各组每天干预1次,连续3天。采用尿动力学方法测定大鼠膀胱功能,免疫荧光染色法检测Piezo1在膀胱尿路上皮的分布表达,Western blot法检测膀胱尿路上皮Piezo1蛋白表达,qRT-PCR法检测膀胱尿路上皮Piezo1 mRNA表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠储尿时间缩短、膀胱有效容量减小、排尿压力降低(P<0.05);与模型组相比,针刺组、Piezo1拮抗剂组和Piezo1拮抗剂+针刺组大鼠储尿时间延长,膀胱有效容量增加,排尿压力升高(P<0.05);与假手术组相比,模型组大鼠膀胱尿路上皮层Piezo1平均强度值、蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组、Piezo1拮抗剂组和Piezo1拮抗剂+针刺组大鼠膀胱尿路上皮层Piezo1平均强度值、蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05)。结论针刺可通过下调膀胱尿路上皮Piezo1机械激活离子通道表达,降低膀胱对机械刺激的敏感性,从而提高OAB大鼠膀胱功能。