高效液相色谱法同时测定复方牛黄贴中胆红素和奥硝唑含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定复方牛黄贴中胆红素和奥硝唑含量。方法采用Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以乙腈-1%醋酸为流动相,梯度洗脱,检测波长:胆红素450 nm,奥硝唑315 nm,柱温为30℃,进样体积:10μL。结果胆红素在1.58~51μg·m L-1浓度范围内,线性关系良好(r=0.999 2),低、中、高浓度平均加样回收率分别为96.70%,97.92%,98.13%,RSD分别为1.15%,1.41%,0.36%。奥硝唑在3.22~103μg·m L^(-1)浓度范围内,线性关系良好(r=0.999 0),低、中、高浓度平均加样回收率分别为97.83%,98.31%,99.47%,RSD分别为0.97%,0.79%,0.64%。结论该法专属性强、精密度好、准确性高,具有良好的稳定性,可用于复方牛黄贴中胆红素和奥硝唑的含量测定。

GW4064对果糖诱导非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用研究

目的:研究GW4064对果糖诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠的保护作用。方法:小鼠随机分为正常对照组、模型组和治疗组,采用30%果糖水造模,8周后,治疗组灌胃给予GW4064(30 mg·kg^(-1)),2周后测定各组小鼠血清中葡萄糖、胰岛素、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)和胆固醇(CHO)水平;观察肝脏病理改变。结果:与NAFLD模型组相比,GW4064组小鼠空腹血糖及胰岛素含量降低,血清中TG、CHO和LDL-C含量显著降低,HDL-C水平显著升高。病理结果显示,GW4064能显著降低NAFLD小鼠肝脏脂肪变性,明显减轻肝脏损伤程度。结论:采用30%果糖可以成功诱导NAFLD模型,GW4064通过降低脂质沉积和增加胰岛素敏感性来改善NAFLD。

串联混合输注装置中丙氨酰谷氨酰胺配伍稳定性考察

目的考察串联混合输注装置中丙氨酰谷氨酰胺的配伍稳定性,为合理输注丙氨酰谷氨酰胺提供实验依据。方法选取临床常与丙氨酰谷氨酰胺配伍的两种氨基酸注射液,经串联输注装置连接后滴注,测定不同时刻流出的输注液p H值、渗透压、不溶性微粒数和丙氨酰谷氨酰胺含量。结果在串联混合输注方式下,实验各配伍组p H值、不溶性微粒数量随时间变化不明显,但渗透压和丙氨酰谷氨酰胺含量在输注0.5 h时变化较大。结论串联混合输注装置在整个输注过程中不能很好混匀丙氨酰谷氨酰胺和氨基酸注射液,建议尽可能提前混匀各配伍溶液以保证输注过程中丙氨酰谷氨酰胺的稀释比例和配伍液渗透压的稳定性。

体外培育牛黄对小鼠慢性溃疡性结肠炎的疗效研究

目的:研究体外培育牛黄(CBS)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的慢性溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用。方法:采用2%的DSS溶液连续给药3周期,在雄性C57BL/6小鼠中诱导慢性UC动物模型。造模的最后7 d连续给予50 mg·kg^(-1)和150mg·kg^(-1)的CBS灌胃给药处理,每日1次;通过小鼠一般情况、疾病活动(DAI)指数、结肠状态、HE染色和Tunel检测细胞凋亡等来评价CBS对DSS诱导慢性UC的疗效。结果:CBS减弱了DSS诱导的小鼠体质量降低、腹泻、便血等症状,并减少了其DAI指数,同时减轻了结肠的组织病理损伤。结论:CBS对于DSS诱导的慢性UC具有一定的治疗作用,值得进一步深入研究。

牛黄的现代研究(二):质量控制

牛黄来源于牛的胆囊、胆管或肝管中干燥后的胆结石,是我国传统名贵动物药材,是多种方剂的配方组分之一。由于天然牛黄药源紧缺,价格昂贵,我国科研工作者相继研制出了人工牛黄、培植牛黄以及体外培育牛黄等替代品。牛黄中主要含有胆红素类、胆汁酸类、氨基酸类、胆固醇及无机元素等成分。由于牛黄及其不同替代品的共同存在,且药材本身成分非常复杂,因此对于该类药材的真伪鉴别、物质基础研究乃至质量控制一直都是牛黄药材和复方研究的难点和重点。目前对于该类药材的质量控制主要集中在胆酸和胆红素类成分上,学者们已经陆续对其他胆汁酸以及其余成分开始测试技术的研究,以期解决牛黄及其替代品的质量控制问题。该文就牛黄及其替代品所含化学成分研究进展进行回顾,同时针对胆红素、胆汁酸类、氨基酸类等成分测定技术的研究进展进行回顾与综述,旨在为牛黄及其替代品的质量控制提供参考依据。

核受体调控羧酸酯酶表达及活性的研究进展

羧酸酯酶(carboxylesterase,CES)是一类重要的Ⅰ相药物代谢酶,参与许多临床抗癌药物、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类杀虫剂、环境中有毒物质以及前致癌物的体内代谢。有研究表明,许多核受体(nuclear receptor,NR)家族成员在调控人和动物肝脏及肠道CES的表达和活性方面发挥着重要作用。本文查阅有关文献,综述NR对人和动物CES调节作用的研究进展,评价其在药物代谢、药物相互作用等方面的意义。近年来,随着基因敲除小鼠模型和转基因小鼠模型的应用,孕甾烷X受体蛋白(pregnane X receptor,PXR,NR1I2)和雄甾烷X受体蛋白(constitutive androstane receptor,CAR,NR1I3)调控CES的转录机制逐步被阐明,其他NR对CES调控机制的研究也有所突破,但目前有关NR对CES调节方面的研究大多局限于啮齿动物模型,后续可通过运用人源化小鼠模型以及临床试验等来深入探讨NR调控CES的作用机制以指导新药开发及临床合理用药。

5种中药成分体外对羧酸酯酶活性的影响研究

目的:初步考察5种中药成分黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外对羧酸酯酶1(CES1)和羧酸酯酶2(CES2)活性的影响。方法:采用CES1、CES2特异性探针咪达普利和伊立替康(CPT-11)及其代谢产物咪达普利拉和SN-38,在大鼠肝微粒体孵育体系中初步考察上述5种中药成分抑制两种CESs活性强度。结果:上述5种中药成分在100μmol·L-1浓度下对CES1、CES2活性均无显著抑制作用(P<0.05)。结论:黄芩苷、穿心莲内酯、橙皮苷、茶多酚及黄豆苷元在体外不影响CESs活性,体内实验有待进一步开展。

牛黄复方及其制剂的研究进展

牛黄复方由于牛黄代用品的出现,已经在临床上广泛地使用。牛黄常应用于传统的急救用药方,由于成分复杂且含有难溶性成分,在临床应用中存在生物利用度低,起效慢等缺点,而且其药效通常与给药途径和制剂的剂型特点息息相关,本文对已有的牛黄复方及其新剂型进行总结,根据剂型特点和复方临床应用阐述已有的牛黄复方制剂,希望促进牛黄新剂型的开发应用。

炎性细胞因子调节药物代谢酶的研究进展

炎症状态下许多重要的药物代谢酶表达及活性发生下调,药物代谢酶表达及活性的改变直接影响机体对药物的处置过程,导致药物不良反应的发生。大量研究表明,炎症反应中机体会释放大量的细胞因子,而其中某些炎性细胞因子参与下调药物代谢酶的表达及活性,其中细胞色素P450酶首当其冲。由于细胞因子对细胞色素P450酶的调节作用与炎症的发展程度以及疾病的治疗进程有关,临床上很难预测这种调节作用的结果。因此,弄清炎症情况下细胞因子对药物代谢酶的调节作用对分析和解释临床上发生的药物不良反应具有重要意义。本文综述了炎症状态下细胞因子对细胞色素P450酶的调控研究进展,探讨了其可能的作用机制以及临床意义。

385例茵栀黄制剂不良反应/事件分析

目的通过对茵栀黄制剂导致的药品不良反应(ADR)进行分析,了解茵栀黄制剂ADR发生的特点,为规范临床合理用药提供参考。方法收集2012年1月1日至2018年12月31日湖北省药品(医疗器械)不良反应监测中心数据库中385例茵栀黄制剂ADR/事件(ADE)报告,对报告中患者使用药物剂型、患者年龄、性别、原患疾病、使用剂量、发生时间、累及系统-器官以及临床表现等进行统计分析。结果茵栀黄制剂所致ADR/ADE患者中,男女性别比为1.60∶1.00,多发生于40~59岁人群(42.86%);其中有发生时间记录的报告301例,多在用药30 min内出现ADR/ADE;累及系统-器官主要为皮肤及附件损害,主要临床表现为瘙痒及皮疹等。结论茵栀黄制剂可导致不同程度的ADR/ADE,一般经停药或对症处理后患者好转,临床上应给予足够重视,密切关注患者用药后状况,辨证施药,禁止超功能主治施药。

体外培育牛黄及其主要成分对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶作用的体外研究

目的:探讨体外培育牛黄(CBS)及其主要成分对大鼠肝微粒体6种细胞色素CYP450酶同工酶活性的影响。方法:采用大鼠肝微粒体为研究工具,将CBS或其主要成分与CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A1/2这6种同工酶特异性探针底物共同孵育,通过液相-串联质谱法(LC-MS/MS)检测各探针底物代谢物生成量,评价CBS及其主要成分对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A1/2这6种CYP450酶同工酶的体外抑制作用。结果:CBS对大鼠肝微粒体CYP2D6和CYP2E1两种亚型酶活性无抑制作用,而对CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9和CYP3A1/2的活性有一定的抑制作用;其主要成分胆酸(CA)、去氧胆酸(DCA)、熊去氧胆酸(UDCA)等对这6种CYP450酶同工酶具有不同程度的抑制作用。结论:CBS在体外可对CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9和CYP3A1/2产生抑制作用,从而可能影响合并用药的体内药动学过程,需进一步开展临床研究。

呱氨托美汀及其代谢产物在大鼠体内的组织分布

目的:建立生物样本中测定呱氨托美汀(MED-15)及其代谢产物浓度的方法,考察MED-15在人工体液中的稳定性及在大鼠体内的组织分布。方法:制备人工胃液和人工肠液,考察MED-15在体液中的稳定性。取24只雄性SD大鼠,灌胃给药MED-15 100 mg·kg-1,分别于给药后1,3,7,24 h处死大鼠,迅速取出心脏、脑组织、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、胃、小肠和大肠匀浆,HPLC法检测各组织中MED-15、MED-5及托美汀的含量。结果:MED-15在人工胃液和肠液中的稳定时间>3 h。灌胃给予MED-15(100 mg·kg-1)后,MED-15仅在胃、大肠和小肠中可测得,并且肠道滞留时间长达24 h。代谢产物MED-5在大鼠体内多个组织均有分布,在胃、小肠、大肠和肝脏等组织中的浓度较高,7 h后在小肠和大肠中仍可检测到较高浓度的MED-5。MED-15活性代谢产物托美汀在肝、脾、肾等血流量丰富的组织中分布迅速而广泛,同时在这些组织中浓度较高。结论:呱氨托美汀可缓慢吸收入血,其在胃肠上皮细胞中滞留的现象也可能是其发挥作用时间较长的原因之一。

体外培育牛黄对肝内胆汁淤积大鼠雌激素受体α的影响研究

[目的]研究体外培育牛黄(CBS)对17α-乙炔雌二醇(EE)诱导肝内胆汁淤积(IC)大鼠体内雌激素受体α(ERα)的作用。[方法]雄性Wistar大鼠给予5 mg/kg的EE皮下注射制备IC大鼠模型,同时采用50 mg/kg和150mg/kg的CBS灌胃给药处理。连续5d后处死动物,通过HE染色、透射电镜评价CBS对IC大鼠肝脏损伤的作用;RT-PCR、western blot和免疫组织化学技术评价肝脏ERα的表达情况。[结果]CBS减轻EE诱导IC大鼠肝组织病理损伤和细胞超微结构改变,显著下调IC大鼠肝脏ERα的mRNA和蛋白表达。[结论]CBS对于EE诱导IC大鼠的保护作用可能与其减少肝脏ERα表达有关。

干细胞介导的酶前药策略与肿瘤靶向治疗研究进展

目的传统化疗在杀灭肿瘤细胞的同时也给患者机体带来了较大的毒副作用,严重影响患者生活质量。近年来,人们利用干细胞定向肿瘤迁移特性将其作为细胞载体,配合酶前药体系共同杀灭肿瘤细胞实现了较好的效果,本文综述了近年来干细胞介导的酶前药策略在肿瘤靶向治疗中的发展现状。方法应用PubMed分别以"Stem cell,Enzyme,Prodrug,Tumor"等为关键词检索相关文献,检索时间为建库开始到2017-08,共检索到有关英文文献89篇,主要选取近10年文献纳入分析。检索CNKI、维普、万方等中文数据库未发现有关文献,故未纳入中文文献。纳入标准:(1)应用于肿瘤治疗的干细胞及酶前药体系;(2)干细胞介导的酶前药策略治疗肿瘤的原理;(3)干细胞介导酶前药体系治疗肿瘤的疗效与存在问题。依据纳入标准,符合分析的文献共有38篇。结果干细胞介导的酶前药策略治疗肿瘤的原理在于通过基因工程使干细胞携带抗肿瘤前药的代谢酶基因,干细胞进入体内后定向迁移至肿瘤部位并在肿瘤局部表达药物代谢酶,全身给予抗肿瘤前药后,肿瘤局部可以生成浓度高的细胞毒性代谢产物可起杀肿瘤细胞作用。此法不仅可以提高治疗效率还可以减少药物治疗带来的毒副作用。结论干细胞介导的酶前药策略为肿瘤靶向治疗提供了一种新方法,也是近年来肿瘤领域研究的热点之一。随着研究的深入,干细胞介导的酶前药体系将有望更好地应用到肿瘤靶向治疗中。

体外培育牛黄和天然牛黄对小鼠血清和组织胆汁酸代谢轮廓影响的对比研究

目的建立高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法测定小鼠血清和不同组织中多种胆汁酸(BAs)的浓度,对比体外培育牛黄(CBS)和天然牛黄(CB)对小鼠体内胆汁酸代谢轮廓(MPBA)的影响。方法小鼠分别灌胃给予CBS和天然CB,给药后收集不同时间点的全血、心、脾、肺、肾和脑组织,全血分离血清,用蛋白沉淀法处理血清和各组织。采用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离胆汁酸,比较两种药物在动物血清和上述组织中相应胆汁酸的经时变化特征。结果CBS组和天然CB组血清中胆酸(CA)、去氧胆酸(DCA)、牛磺胆酸(TCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺脱氧胆酸(TDCA)以及牛磺酸(Tau)的浓度-时间曲线下面积具有显著性差异(P<0.05)。BAs和Tau在CBS组和天然CB组中总体上浓度变化趋势相似,但CA和TDCA在不同组织中存在明显差异。结论CBS和天然CB对体内血清和组织的胆汁酸代谢轮廓有不同的影响。CB类药材成分复杂,研究为其物质基础的深入研究提供了思路。