不同配种方式对大熊猫产仔效果的影响

１９８７一１９９３年，我国人工圈养的大熊猫先后有３１只雌性受配１０８只次，产仔３５胎，获幼仔４５只。有１６只雄性参加配种，其中７只能进行自然交配，９只没有自然交配能力。从３只雄性采出的良好精液，能使雌性怀孕产仔，怀孕率为１９．１２％。在雄性自然交配前后再给雌兽作人工授精，能提高雌兽怀孕产仔效果。来自不同山系大熊猫的繁殖能力有不同程度的差异，尤以岷山山系大熊猫的繁殖效果较差。

大熊猫精液品质的研究Ⅰ.精液质量的动态观察

本文用11只大熊猫作了41次人工采精。其精液质量表明,在6—20岁的雄兽发情季节里,只要采精技术得当,均能采到可用作人工授精的精液。鲜精在0—4℃保存61小时,或冷冻精液超低温(-196℃)保存1—6年,解冻后在37℃培养90分钟,其精子活力仍在30％以上,用作人工授精,仍能达到受孕、产仔效果。 将大熊猫与几种猫科及食草动物的精液质量进行比较,大熊猫的精子畸形率(6—59％,平均29.74％)比其他动物高,这是大熊猫自然交配或人工授精后受孕率仍然很低的重要原因之一。对大熊猫进行科学饲养管理,可以提高大熊猫的性欲和自然交配能力。

大熊猫数量变化及人工繁殖效率研究

对大熊猫的分布、栖息环境、数量变化和近３０年国内外人工繁殖大熊猫的成功经验及失败教训作了报道。指出：①禁止砍伐森林、破坏大熊猫的栖息环境，立即将大熊猫分布比较集中地划为保护区，才有延缓大熊猫在野外灭绝的可能．②围绕大熊猫的繁殖进行深入研究，是提高人工繁殖率及幼仔成活率的关键，培育幼兽达到繁殖后代的目的是人工育幼的重要环节。③为拯救大熊猫物种出力，是使子孙后代能见到大熊猫应尽的责任和义务。

大熊猫消化系统同工酶凝胶电泳分析

对身体瘦弱、无病,落水的大熊猫消化系统8种组织器官及1种消化液的LDH、酯酶及过氧化物酶等三种同工酶,进行了凝胶电泳分析,并从基因表达的角度讨论了LDH同工酶的变化.

大熊猫种群数量调查方法的新突破

作者应用寡核苷酸基因ＬＺＦ－Ｉ和Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１探针，对野生大熊猫粪便样品材料作ＤＮＡ指纹图分析，确认大熊猫野生种群的个体数量和家系，获得了满意的结果。文章还介绍了在不同自然保护区、山系或行政区域内，大面积上作大熊猫的种群数量调查采用的方法：Ａ在已知大约数量时，则以１∶５采集粪便样品为宜；Ｂ在未知数量及密度时，则以面积和路线法布点，采集粪样，避免遗漏，影响真实的种群个体确切数量；Ｃ利用空白地形图标注粪样编号，用以核对大熊猫的数量、家系、领域以及每只个体的性别与大致年龄结构，便于评估大熊猫的数量、分布、栖息地的质量与发展趋势，有利于制定保护管理规划，更好地保护大熊猫物种。本法突破了现有陆生哺乳动物数量调查方法，并具有推广和应用价值。

大熊猫父权确定的DNA证据

本文对成都大熊猫繁育研究基地、成都动物园、福州大熊猫研究中心及昆明动物园圈养繁殖的大熊猫１４胎次、１９只幼子、２５只次参配雄兽个休的被毛、血液、精液、肝、甲醛固定组织细胞，以及粪、尿等样品，采用同位素与荧光素标记基因探针作ＤＮＡ指纹图谱分析，得到了一些有意义的结论：（１）同一大熊猫个体的被毛、血液、精液、肝、甲醛固定组织细胞及粪、尿检测，其ＤＮＡ指纹图完成一致。（２）大熊猫一雄配一雌．或多雄配一雌，受配雌善所产任一个子代个体的ＤＮＡ指纹条带，均分别来自父亲、母亲．以及父母双亲，没有新带出现，无误的确定了１９只子代的真正父亲．排除了非父。（３）５个双胞胎，即１０只子代个体的ＤＮＡ指纹图谱，均具个体特异性，表明为异卵双生，其中４个双生子个体为异卵异父双生，为大熊猫在一个发情期不一定同时排卵提供了佐证，亦为多雄配一雌，以及多次配种提供了理论和应用依据。（４）ＤＮＡ指纹技术用于大熊猫的父权认定，灵敏稳定．准确无误。（５）应用寡核苷醚基因探针ＬＺＦ—ｌ作大熊猫亲子鉴定较ＪＨ１２．６探针更为适合。（６）荧光素及同位素标记探针ＬＺＦ—ｌ其效果基本一致。因此荧光素标记可以取代同位素３２Ｐ标记方法。

大熊猫的现状与研究

本文对大熊猫的原地保育和移地繁殖，以及研究进展作了扼要报导．原地保育的总趋势仍然是栖息环境和分布范围不断在缩小，数量不断减少．拟新建的１４个自然保育区和１７条走廊连接带有待实现，可延缓野外大熊猫的灭绝。移地保育在各动物国、研究基地及自然保护区国养场，已具不同程度的条件和规模，并初见成效，但围绕大熊猫的繁育，增加大熊猫的数量所进行研究的广度与深度还很不够，使圈养繁殖的幼仔数量增长缓慢，未能充分发挥出移地保育的优势．文章指出，保育大熊猫的现实虽然不容乐观，但有利条件不少，只要加强国内外合作，抓住时机，在现有基础上，大熊猫等野生动物的保育与研究，前程似锦．

大熊猫卵泡及卵母细胞发育的研究

本文用５只大熊猫卵巢作了连续切片观察，测量分析了卵泡、卵母细胞和透明带的生长发育与成熟过程，以及它们之间的相互关系：（１）大熊猫卵泡及卵母细胞具哺乳类动物双相生长的共同特点，在生长过程中，仅有极少数优势卵泡被确定下来，其余卵泡均在不同时期成为闭锁卵泡，特别在发情期闭销卵泡黄体化及囊肿现象居多。（２）透明带出现在单层卵泡细胞呈低柱状至柱状期，随着卵泡及卵母细胞的增长，透明带缓慢增厚。（３）在２只发情期的卵巢切片中，未见到成熟卵泡，表明大熊猫雌兽在一个发情期中不一定能排出正常的卵子。

大熊猫父权认定的DNA指纹图分析

本文以大熊猫１４胎次，１９只幼子，２５只次雄兽个体的被毛、血液、精液、福尔马林固定的器官组织、粪和尿等为材料作了ＤＮＡ指纹检测。（１）同一大熊猫个体的被毛、血液、精液、固定组织及粪、尿检测，其ＤＮＡ指纹图完全一致。（２）大熊猫无论１雄配１雌，２雄配１雌、３雄配１雌，甚至４雄配１雌，受配雌兽所产任一子代个体的ＤＮＡ指纹图谱中，杂交谱带均分别来自父亲、母亲，以及父母双亲，没有新带出现，无误地认定了１９只幼子的真正父亲，排除了非父。（３）３只大熊猫雌兽的５个双胞胎，即１０只子代个体的ＤＮＡ指纹图谱，均具有个体特异性，表明为异卵双生，其中４个双生子为异卵异父双生，为大熊猫在一个发情期不一定同时排卵提供了佐证，亦为圈养雌兽发情高峰期用多只雄兽作多次配种或输精，能提高受孕产仔率提供了理论和应用依据。（４）ＤＮＡ指纹技术用于大熊猫的亲子鉴定，灵敏稳定，准确无误，为圈养大熊猫多雄配１雌，增加受配雌兽的受孕机会，提高产子率提供了鉴别手段，解除了多雄配１雌，其子代的父亲是谁的后顾之忧。（５）应用寡核苷酸探针ＬＺＦ－１作大熊猫亲子鉴定较ＪＨ１２．

凉山山系、小相岭山系大熊猫遗传多样性的DNA指纹比较分析

利用同位素标记大熊猫ＤＮＡ指纹探针Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１，比较检测了凉山山系和小相岭山系大熊猫随机个体的ＤＮＡ指纹图，获得的遗传多样性参数如下：（１）凉山山系和小相岭山系随机个体的平均谱带数分别是３３．１４和２８．２５条；平均等位基因频率分别是０．４３和０．４８；平均杂合率分别是５７％和５２％。（２）凉山山系和小相岭山系大熊猫各自群体内部个体之间ＤＮＡ指纹的相似系数分别是０．６８和０．７２。将两个山系并为一个大群体后，随机个体的平均谱带数为３０．５３；平均等位基因频率为０．３６；个体之间ＤＮＡ指纹的相似系数为０．５８；平均杂合率上升至６４％。（３）凉山山系和小相岭山系大熊猫群体之间的遗传距离为０．４２，两山系之间已有明显的遗传分化。大熊猫以分布的山系为群体单元时，个体之间遗传相似性高，遗传多样性贫乏；若群体单元扩大到两个山系时，个体之间遗传相似性下降，遗传多样性明显上升。此结果初步表明：大熊猫作为一个物种，遗传多样性可能不是很贫乏，但各个山系内的大熊猫群体，遗传多样性的贫乏程度是相当严重的。

大相岭山系大熊猫数量及遗传多样性的DNA指纹检测

大熊猫分布在秦岭、岷山、邛崃山、凉山、小相岭和大相岭等六大山系，前５大山系的大熊猫种群数量均有报道［１，２］．１９４８年大相岭山系峨眉山的最后一只大熊猫消失后，对大相岭山系大熊猫数量知之甚少．我们于１９９８年４月中旬，从洪雅县的炳灵乡出发，在白沙河两...

大熊猫精液品质的研究──精子和非精子的细胞成分超微结构观察

本文对刚接近性成熟大熊猫的精液在电子显微镜下进行精液品质鉴定，观察结果，除少量完成变态的精子外，多数是处在精子发生的各阶段并发育不正常，精液中伴随着大量巨噬细胞和被吞噬的衰亡精子及其碎片。镜检结果不仅说明这只雄性大熊猫性尚未成熟，其生殖系统可能还伴有生理或病理现象，这样的精液建议不能用于配种。

大熊猫亲子鉴定──DNA指纹技术的应用

以大熊猫１０个家系，２０只个体的被毛为材料，辅以血液、精液，作ＤＮＡ指纹图谱的对比分析，结果表明：在同一大熊猫个体的被毛和血液、被毛和精液，血液与精液组织检测，其ＤＮＡ指纹图谱完全一致；大熊猫多雄配一雌及一雄配一雌，所产任一子代个体的ＤＮＡ指纹图谱中，其杂交带都分别来自父亲和母亲，或父母亲，没有新带出现，准确无误地确定了１０个家系子代的真父，排除了非父；三只大熊猫双胞胎中６只子代个体的ＤＮＡ指纹图谱，均具个体特异性，表明都为异卵双生子，为大熊猫在一个发情期不一定同时排卵提供了佐证，亦为圈养雌兽在一个发情高峰期多次配种，提供了应用和理论依据；ＤＮＡ指纹技术用于大熊猫的亲子鉴定，灵敏度高，稳定，重复性好，为圈养大熊猫多雄配一雌，增加受配雌兽的受孕机会，提高产仔效率提供了鉴别手段，解除了多雄配一雌其子代的父亲是谁的后顾之忧。

牦牛远缘杂交后代血清同工酶电泳分析

同工酶来源于生物组织器官,能催化同一种生化反应,是蛋白质的结构与理化性质不同的酶类。乳酸脱氢酶同工酶(LDH)是葡萄糖酵解过程中相当关键的酶,主要功能是催化乳酸和丙酮酸转换的生化反应。酯酶是一种广谱底物的水解酶。过氧化物酶在细胞代谢的氧化还原过程中起着重要作用。研究表明,同工酶是基因的生化表现型,同工酶的分析方法,有助于研究'基因—酶—性状'的基本图式。LDH、酯酶。

大熊猫消化道消化吸收区段游离面的扫描电镜观察

对大熊猫消化道的消化、吸收区段作扫描电镜观察后表明：（１）胃粘膜上皮细胞排列疏松，细胞表面具微绒毛，（２）十二指肠绒毛呈指状，表面凸凹不乎；绒毛表面具丰富的微绒毛，微绒毛表面粗糙，末端膨大。（３）直肠段具丰富的绒毛结构，表面不平滑，具颗粒状物质，但无微绒毛存在：直肠腺丰富。

大熊猫基因指纹探针F_2ZGP96060801的研制及比较实验分析

利用ＡＢＩ－３９４型ＤＮＡ合成仪合成的寡核苷酸５′－［Ａ（Ｘ）ｎ－１ＴＣＣＡＣ］ｎ－３′，经高效液相色谱仪纯化后，制备成了命名为Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１的大熊猫基因指纹探针。用同位素标记法标记Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１、ＬＺＦ－Ⅰ、３３．１５、３３．６和（ＣＡＣ）５／（ＧＴＧ）５等５种基因指纹探针，比较检测了大熊猫随机个体的被毛、大熊猫３雄配１雌所产１个双胞胎计６只个体的福尔马林固定的肝组织和粪便中的胃肠道上皮脱落组织，以及粪便中细菌样品的基因指纹。结果表明：（１）在大熊猫随机个体检测中，Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１、ＬＺＦ－Ⅰ、３３．１５、３３．６和（ＣＡＣ）５／（ＧＴＧ）５探针检出的平均谱带数分别是３２．３７５、１７．６２５、１４．１２５、１２．６２５和１０．７５条，探针在随机个体中的鉴别机率分别是１．８３×１０－１０、１．３６×１０－８、４．０８×１０－８、４．２１×１０－７和３．１６×１０－７。表明了制备的大熊猫基因指纹探针Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１在大熊猫物种的个体识别检验中，具有最强的鉴别能力。（２）在亲子鉴定检测中，Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１、ＬＺＦ－Ⅰ、３３．１５、３３．６和（ＣＡＣ）５／（?

大熊猫作毛微量元素含量与疾病的关系

本文报告了用PIXE (Prolon Induced X-Ray Emission)技术研究不同健康状况大熊猫体毛中的微量元素含量,分别比较了各类样本中微量元素含量相对于各自锌含量的比值。不同健康状况的大熊猫体毛中的微量元素含量不同。血色素低与铁有关,食欲差与缺铬有关,癫痫病与钙和铜含量变化有关,癌症与铜和锌的比值变化有关。这些现象的初步揭示,为进一步研究高等功物体内微量元素与疾病的关系积累了资料,为人工饲养大熊猫提供了有益的参考资料。

荧光素及同位素标记LZF-1探针用于大熊猫亲子鉴定的DNA指纹图分析

以大熊猫４个家系，３０只次个体的被毛、皮肤和福尔马林固定的肝组织作材料，用荧光素（１１－ｄＵＴＰ）和同位素（γ－３２Ｐ－ＡＴＰ）分别标记寡核苷酸探针ＬＺＦ－１，作ＤＮＡ指纹图谱检测．结果表明，无论２雄配１雌、３雄配１雌，甚至４雄配１雌，受配雌兽所生子代的ＤＮＡ指纹图谱条带，均来自父亲、母亲及父母双亲，没有新的条带出现，准确认定了４个家系中６只子代个体的真父，排除了非父．在２个一胎二子的认定中，大熊猫的异卵异父双生的发现，可为大熊猫圈养繁殖配种时。

大熊猫雄性生殖器官元素EDS分析

应用扫描电镜及ｘ－射线能谱仪，对大熊猫雄性生殖器官的曲细精管４个区域、附睾头、附睾体、附睾尾、输精管及输精管壶腹各一个区域的１５种元素进行了测定，其中，常量元素６种，微量元素９种。依据典型图谱对各采谱区域内的元素含量变化作了定量计算。以Ｚｎ为基准对几种与生殖机能密切相关的元素作了对比分析。其中配种能力好精子数量多，精液质量优良，使雌兽受孕产仔率高的“强强”，其微量元素Ｚｎ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、ｃａ、Ｋ的相对含量较高，特别是Ｚｎ的含量显著增高（Ｐ＜０．０５）。

桑属几个种及品种过氧化物酶同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对桑属植物的7个种、3个品种的过氧化物酶同工酶进行了研究.结果:桑属内共同特征酶带的表达与细胞色素氧化酶呈规律性的一致倾向,但在表型上有差异;桑属内各种、品种间的酶谱有显著差异.每个种都有不同的特征酶谱;用排序法研究同工酶可达到定量比较水平,对各桑种、品种的相似性和相异性可作出直观.定量、准确的表达.研究结果为桑属植物的分群、分类提供了资料.