红景天苷通过调节Nrf2/HO-1和PPARγ/CEBPα信号通路抑制高脂诱导的大鼠肥胖

目的:观察红景天苷对高脂饲料诱导大鼠肥胖的治疗作用,并探讨其可能机制。方法:按文献方法建立肥胖模型,实验分为正常对照组、模型组及红景天苷50、100 mg/kg组;给药组灌胃给予相应的药物,1次/d,连续4 w。每周称量1次体质量和计算1次饲料消耗量和利用率。末次给药12 h后取血,进行Glu、INS、TG、TC、HDL-C、LDL-C含量检测和胰岛功能HOMA-IR、HOMA-β计算,取腹部和附睾脂肪组织计算质量指数;检测附睾脂肪组织TAC、GSH-Px、SOD活性和MDA含量并进行形态学分析;并检测附睾脂肪组织中Nrf2、HO-1、PPARγ、CEBPαmRNA表达。结果:红景天苷(50、100 mg/kg)能显著降低高脂诱导肥胖大鼠体质量、饲料利用率及血清Glu、INS、TG、TC、LDL-C水平并能降低HOMA-IR及附睾脂肪组织中MDA含量;升高血清HDL-C含量和HOMA-β及附睾脂肪组织中TAC、SOD、GSH-Px活性;降低腹部和附睾脂肪质量指数及附睾脂肪细胞大小和面积;升高附睾脂肪组织中Nrf2、HO-1 mRNA表达并降低脂肪组织中PPARγ、CEBPαmRNA表达。结论:红景天苷对高脂诱导大鼠肥胖具有较好的治疗作用,其作用机制与调节Nrf2/HO-1和PPARγ/CEBPα信号通路,增强抗氧化系统功能和抑制血糖、血脂升高有关。

木瓜三萜联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎临床疗效、炎症因子及肠黏膜屏障保护因子的影响

目的:观察木瓜三萜联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)临床疗效、炎症因子及肠黏膜屏障保护因子的影响。方法:将入选的90例UC患者随机分为对照组和治疗组,每组各45例。对照组口服给予美沙拉嗪1. 0 g,治疗组在给予美沙拉嗪的同时加服木瓜三萜0. 375 g,每天3次,疗程8周。比较两组患者的临床疗效、不良反应发生率,计算临床症状体征积分、疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠镜积分及病理组织学评分,检测外周血中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、IL-4、IL-10含量及结肠黏膜中髓过氧化物酶(MPO)活性和结肠黏膜中闭锁小带蛋白1(ZO1)、钙粘附蛋白E(E-cadherin)、紧密连接蛋白(occludin)、黏蛋白2(MUC2)、肠三叶因子(TFF3) mRNA表达。结果:UC患者治疗后,治疗组的总有效率(86. 67%)明显高于单用美沙拉嗪(66. 67%)对照组,不良反应的发生率明显低于对照组(P <0. 01);临床症状体征积分、DAI评分、结肠镜积分及病理组织学评分明显低于对照组(P <0. 05或P <0. 01);血液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ含量和结肠黏膜中MPO活性较对照组明显降低,IL-4、IL-10含量较对照组明显升高(P <0. 05或P <0. 01);结肠黏膜中ZO1、Ecadherin、occludin、MUC2、TFF3 mRNA表达较对照组明显上调(P <0. 05或P <0. 01)。结论:木瓜三萜与美沙拉嗪联用对UC患者有良好的治疗效果和较低不良反应,抑制促炎因子产生、恢复促炎和抗炎因子之间的平衡及上调肠黏膜屏障保护因子表达可能是其发挥对UC治疗作用的机制之一。

木瓜总三萜通过调节miR-10a和PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路诱导胃癌细胞凋亡

目的:通过观察木瓜总三萜对人胃癌HGC-27细胞株生长的抑制作用,探寻其可能的作用机制。方法:将HGC-27细胞分别单用木瓜总三萜或同转染miR-10a mimic、PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂CCI-779及分别与木瓜总三萜联用处理后,采用MTT和JC-1法检测细胞活性和线粒体活性,实时定量PCR法检测miR-10a mRNA表达,Western blot法检测HGC-27细胞中PI3K、Akt、mTOR、p70S6K蛋白表达及其磷酸化。结果:木瓜总三萜可显著降低HGC-27细胞活性和线粒体活性,促进细胞凋亡;上调miR-10a mRNA表达,下调p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达及降低p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K比值(P<0.05)。结论:木瓜总三萜具有抑制人胃癌HGC-27细胞线粒体活性和细胞增殖的作用,其机制可能与促进miR-10a表达,抑制PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路激活有关。

珠子参皂苷诱导骨髓造血干细胞增殖分化的体外实验研究

目的:观察珠子参皂苷对环磷酰胺干预后小鼠造血干细胞的增殖分化及细胞因子、转录因子、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其对应的受体CXCR4表达的影响。方法:模型小鼠按照380mg/kg腹腔注射环磷酰胺,正常小鼠腹腔注射同体积的生理盐水,1次/d,连续3d。给药结束后分离小鼠骨髓单个核细胞(BMMNC),分成正常组、模型组、促红细胞生成素(EPO)+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(50U/mL+250U/mL)和珠子参皂苷(50、100和200μg/mL)组。分别于给药d 4和d 8观察细胞增殖,计数粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系细胞集落形成单位(CFU-E)和红系爆式集落形成单位(BFU-E)数量,检测干细胞因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)分泌,检测SDF-1、CXCR4、GATA-1、PU.1基因mRNA和蛋白表达量。结果:珠子参皂苷可显著促进骨髓造血干细胞增殖分化,增加CFU-E、CFU-GM和BFU-E集落形成数量,促进细胞因子SCF和IL-3分泌、抑制细胞因子INF-γ和TNF-α分泌,上调SDF-1、CXCR4、GATA-1、PU.1基因mRNA和蛋白表达,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:珠子参皂苷可以显著促进骨髓抑制后小鼠造血干细胞增殖分化,其机制可能与上调SDF-1、CXCR4、GATA-1、PU.1的表达和调节细胞因子的分泌有关。

通经定晕丸阻断颈椎病大鼠NF-κB激活MCP-1/CCR2通路及TNF-α及IL-1β、IL-6表达的研究

目的:研究通经定晕丸阻断颈椎病大鼠核因子-κB(NF-κB)激活单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:用手术的方法制作颈椎病大鼠模型,用通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。4周后检测,腹主动脉取血,进行血液黏度,血液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取颈椎椎间盘进行组织形态学分析;实时定量PCR检测颈椎椎间盘组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达,Western blot检测椎间盘组织中NF-κBp65蛋白表达。结果:通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)可显著改善颈椎病模型大鼠的一般状况,降低血液低切黏度值、中切黏度值、高切黏度值,促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量及椎间盘组织中MCP-1、CCR2和NF-κBp65的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),减轻促炎因子对椎间盘造成的损伤,降低颈椎间盘高度和退变程度,降低纤维环裂隙、髓核、细胞数量、软骨厚度,其中以通经定晕丸10.0 g/kg剂量组作用效果更为显著。结论:通经定晕丸对颈椎病模型大鼠具有较好的治疗的作用,其作用机制与降低血液黏度,抑制MCP-1/CCR2信号通路激活、NF-κB活化及TNF-α、IL-1β和IL-6的生成相关。

木瓜总三萜诱导人胃癌细胞HGC-27凋亡的作用及机制研究

目的:探讨木瓜总三萜诱导的胃癌细胞HGC-27凋亡作用与PI3K/Akt/NAG-1信号通路的关系。方法:MTT法及平板克隆检测木瓜总三萜对HGC-27细胞增殖的影响;显微镜下观察木瓜总三萜处理后细胞形态变化;Hoechst 33258染色检测木瓜总三萜对HGC-27细胞凋亡形态变化的影响;Western blot检测HGC-27细胞中PI3K/Akt/NAG-1信号通路相关蛋白表达。结果:MTT及平板克隆实验结果表明木瓜总三萜对HGC-27细胞增殖具有抑制作用,其抑制作用随浓度升高及时间延长而增强;木瓜总三萜处理后胃癌细胞其圆梭形态明显变圆漂浮且出现细胞碎片,随着浓度升高越加明显;Hoechst 33258染色结果表明木瓜总三萜可诱导HGC-27细胞凋亡;Western blot检测表明木瓜总三萜各组除Akt蛋白水平无明显变化外,PI3K、p-Akt、NAG-1蛋白表达均显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:木瓜总三萜能抑制胃癌细胞HGC-27的增殖,可诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/NAG-1信号通路表达有关。

红景天苷通过激活3T3-L1前脂肪细胞Nrf2/HO-1信号通路及下调脂肪生成转录因子表达来抑制脂肪生成

目的:研究红景天苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及Nrf2/HO-1信号通路和脂肪生成转录因子的影响。方法:按文献介绍的方法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,然后分别用红景天苷(50和100μM)、吡格列酮(100μM)及红景天苷(100μM)与HO-1抑制剂ZnPP(3μM)共同处理3T3-L1细胞7天,分别于2、5、7天后进行胞内脂质含量测定,7天后进行胞内TG含量检测,实时定量PCR检测细胞中PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c、aP2、adiponectin mRNA表达, Western blot检测胞浆和胞核中Nrf2及细胞中HO-1蛋白表达。结果:红景天苷(50和100μM)可显著抑制胞内脂质的积聚和TG生成,降低脂肪生成相关转录因子PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c、aP2、adiponectin mRNA表达,抑制Nrf2核易位,上调HO-1蛋白表达,且量效关系明显;当与ZnPP联用后,上述作用被明显削弱。结论:红景天苷对3T3-L1前脂肪细胞分化和脂肪生成具有显著的抑制作用,其作用机制可能与其激活Nrf2/HO-1信号通路及抑制PPARγ、C/EBPα、SREBP-1c、aP2、adiponectin等脂肪生成转录因子的表达有关。

芪苈参萸益心方对心力衰竭大鼠Sirt1/FoxO1/Pgc-1α和Nrf2/抗氧化通路的影响

目的:研究芪苈参萸益心方对大鼠充血性心力衰竭(Congestive heart failure, CHF)的保护作用及可能的作用机制。方法:实验大鼠在成功进行冠脉结扎手术后,随机分为假手术组、模型组、芪苈参萸益心方28.8g/kg、57.6g/kg组、地高辛0.09mg/kg组;给药10周后,进行血流动力学测定,取血进行ROS、T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT和MDA含量分析;心脏经TTC染色、HE和Masson染色,计算心肌梗死面积、心室扩张程度和心肌组织形态学观察,实时定量PCR和Western blot检测Sirt1/FoxO1/Pgc-1α和Nrf2/抗氧化通路相关基因表达。结果:芪苈参萸益心方28.8g/kg和57.6g/kg可显著改善CHF大鼠心功能,降低血液中ROS含量和MDA水平,增加T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT酶的活性;减轻ROS所致心肌氧化应激损伤,降低心肌梗死面积、心室扩张程度和改善心脏组织形态学;上调心肌组织中Sirt1、胞核中Nrf2、Bcl-2蛋白表达和MnSOD、HO-1、NQO1、GCLC mRNA表达,下调Ac-FoxO1、Ac-Pgc-1α、Bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspas-3蛋白表达,升高Bcl-2/Bax比率。结论:芪苈参萸益心方对CHF具有较好的保护作用,激活Sirt1/FoxO1/Pgc-1α和Nrf2/抗氧化通路可能是其作用机制之一。

火麻仁油对代谢综合征大鼠NF-κB/MCP-1/CCR2信号通路及促炎因子表达影响

目的:观察火麻仁油对代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠核因子-κB(NF-κB)/单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用喂养高盐高脂高糖饲料,建立实验性MS大鼠模型,然后用火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。实验大鼠分别于给药后的第2周和第4周进行实验,检测大鼠血压(BP)、肥胖相关指标(体重、腹围、体长,计算Lee's指数和肥胖指数);进行血液中空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取肝组织进行组织形态学分析;实时定量PCR检测肝组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达; Western blot检测肝组织中MCP-1、CCR2和NF-κB p65蛋白表达。结果:火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg可显著改善MS模型大鼠的一般状况,降低BP、体重、腹围、Lee's指数和肥胖指数,降低血液中FBG、FINS、FAA、TG、TC、LDL-D及TNF-α、IL-1β和IL-6含量,升高血液中HDL-D含量,抑制肝组织脂肪变性及炎症细胞浸润,降低肝组织中NF-κB p65和MCP-1、CCR2表达。结论:火麻仁油对大鼠MS具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MCP-1、CCR2表达、NF-κB活化及促炎因子的生成相关。

木瓜总三萜对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路及黏膜屏障的影响

观察木瓜总三萜对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路及结肠黏膜屏障的影响。将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、木瓜总三萜(50,100 mg·kg-1)组和柳氮磺吡啶(250 mg·kg-1)组。实验小鼠通过自由饮用2.5%DSS诱导溃疡性结肠炎(UC)模型,在自由饮用2.5%DSS前3 d,各给药组灌胃给予相应的药物,正常组和模型组给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每天1次,连续10 d。每天观察实验小鼠一般状况、记录疾病活动指数(DAI)。末次给药次日,取血,进行血液中TNF-α,IL-1β,IL-6,IFN-γ,IL-4,IL-10含量检测;取结肠进行长度测量、结肠黏膜损伤指数(CMDI)计算、MPO活性检测和组织形态学分析;实时定量PCR法检测结肠组织中E-cadherin,occludin,MUC2,TFF3 mRNA表达,Western blot法检测结肠组织中SIRT1,IKKβ,p-IKKβ,IκBα,p-IκBα及胞浆和胞核中PPARγ,NF-κBp65蛋白表达。结果显示,木瓜总三萜(50,100 mg·kg-1)可显著改善DSS诱导的UC模型小鼠一般状况,降低DAI,CMDI和组织病理学评分,增加结肠长度,减轻结肠黏膜溃疡、糜烂及炎性浸润,恢复黏膜屏障的正常功能,降低血液中促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6,IFN-γ含量,升高抗炎因子IL-4,IL-10含量,抑制结肠组织中MPO活性,上调结肠组织中黏膜屏障保护因子E-cadherin,occludin,MUC2,TFF3 mRNA表达,下调结肠组织胞浆中PPARγ,组织中p-IKKβ,p-IκBα和胞核中NF-κBp65蛋白表达,降低p-IKKβ/IKKβ和p-IκBα/IκBα的比值,上调胞核中PPARγ,组织中SIRT1和胞浆中NF-κBp65蛋白表达(P<0.05或P<0.01),且随着剂量的增加,其作用效果更加明显。表明木瓜总三萜对DSS诱导的小鼠UC有显著治疗作用,其作用机制可能与其调节PPARγ/SIRT1/NF-κBp65信号通路、抑制促炎因子生成、上调肠黏膜屏障保护因子的蛋白表达有关。

酵母浸出物FP103对CHO细胞生长的影响

目的探讨安琪酵母浸出物FP103对CHO细胞生长的影响。方法分别采用含3、1、0.125 g/L酵母浸出物FP103的DMEM/F12培养基(含1%FBS)培养CHO细胞,CCK-8法检测细胞生长情况。另将酵母浸出物FP103与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)联合加入DMEM/F12培养基(含0.5%FBS)中,用其培养CHO细胞,CCK-8法检测细胞生长情况,显微镜下观察CHO细胞形态。结果1 g/L的酵母浸出物FP103可明显促进CHO细胞的生长(P<0.05)。酵母浸出物FP103与EGF联用可有效促进CHO细胞在低血清浓度下正常生长,且细胞形态正常,未见细胞悬浮不贴壁现象。结论酵母浸出物FP103可替代部分血清,为CHO细胞的生长提供所需营养。