耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG基因家族突变研究及唑类药物抑菌分析

目的研究耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG11、ERG3和ERG5基因突变,及分离株对酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑的抑菌分析。方法收集221株经质谱仪鉴定为白色念珠菌的菌株,微量肉汤稀释法进行氟康唑、酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑药敏试验,得出四种药物对白色念珠菌最小抑菌浓度(MIC)值;根据CLSI M27-A3筛选出氟康唑非敏感白色念珠菌,提取DNA后扩增ERG11、ERG3与ERG5基因,进行双向测序,与GenBank中的标准菌株基因序列(SC5314和AF069752)进行BLAST比对分析。结果白色念珠菌对氟康唑耐药率为9.05%;对白色念珠菌MIC值进行比较,酮康唑的MIC值均低于克霉唑和硝酸咪康唑,差异有统计学意义(P<0.05)。克霉唑与硝酸咪康唑比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ERG11、ERG3、ERG5分别发现18、17、12种错义突变。结论酮康唑对白色念珠菌抑菌率总体比克霉唑、硝酸咪康唑强。耐氟康唑白色念珠菌ERG11、ERG3、ERG5基因出现若干错义突变位点,某些位点突变导致氨基酸变异可能与耐药产生有关。

黄连对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列基因表达影响

目的研究不同浓度黄连浸液对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列(ALS)基因mRNA表达量的影响.方法采用阴道白色念珠菌耐药株为研究对象,经甲基四氮盐(XTT)减低法筛选形成生物膜的白色念珠菌.在不同浓度黄连浸液干预下,通过RT-PCR检测生物膜黏附阶段ALS3/ALS4基因表达,观察黄连对白色念珠菌生物膜形成相关基因表达的抑制作用.结果当黄连浸液浓度为125 mg/L时,对白色念珠菌生物膜的形成阶段和成熟阶段的抑制率分别为88.6%和82.9%;黄连浸液干预下生物膜状态白色念珠菌黏附相关基因ALS3/ALS4的mRNA表达与药物浓度成负相关;当黄连浸液浓度大于4.023 mg/L时,黄连浸液干预下ALS3/ALS4的mRNA表达相对量与阴性对照比较差异有统计学意义(P<0.05).结论黄连可以抑制白色念珠菌黏附相关基因ALS3/ALS4的mRNA水平表达且呈剂量依赖关系.