神经鞘磷脂合成酶2与阿霉素致乳腺癌细胞线粒体损伤的相关性

目的:探讨神经鞘磷脂合成酶2(SMS2)的表达与阿霉素(ADR)致乳腺癌细胞线粒体损伤的相关性.方法:采用过表达慢病毒感染法构建并筛选SMS2过表达的乳腺癌MCF-7细胞.CCK-8实验检测细胞对ADR的IC50值,选择适当浓度的ADR药物作用条件处理细胞后,使用MitoSOX试剂染色检测线粒体ROS水平,检测细胞内ATP水平以评估线粒体功能;电镜观察线粒体超微结构的异同;Western blot检测线粒体细胞色素C的释放水平和细胞凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase 3、Bcl-2、Bax表达水平.结果:SMS2过表达的MCF-7细胞对ADR的IC50值为(2.42±0.073)μmol/L,而对照组细胞IC50值为(0.62±0.036)μmol/L(P<0.01).2μmol/L ADR处理细胞24 h后,SMS2过表达的MCF-7细胞内线粒体ROS水平降低(P<0.05);细胞内ATP水平增加(P<0.05);电镜观察示线粒体结构性损伤减轻;线粒体细胞色素C的释放水平降低(P<0.05);抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,促凋亡蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase 3、Bax的表达减少(P<0.05).结论:SMS2过表达可能通过减轻ADR对乳腺癌MCF-7细胞线粒体的损伤作用,进而抑制细胞凋亡.

麦默通微创旋切术加置引流对乳腺良性肿物患者术后恢复与并发症的影响

目的分析麦默通微创旋切术加置引流对乳腺良性肿物患者术后恢复与并发症的影响。方法将2016年1月至2017年7月间云南省玉溪人民医院收治的80例乳腺良性肿物患者,采用随机信封法分为引流组及无引流组;引流组患者采用麦默通微创旋切术加置输液管改制的引流管对残腔引流,无引流组仅接受麦默通微创旋切术,不采用任何引流方式;记录两组手术时间、出血量、瘀斑面积并评估患者术后疼痛情况;术后1个月评估残腔内积液情况;术后3个月观察手术瘢痕情况并调查患者满意度。结果引流组手术时间与患者满意度均显著高于无引流组(P<0.05),引流组的手术后出血量、瘀斑面积、疼痛、残腔内积液与不良反应发生率均显著低于无引流组(P<0.05);两组瘢痕长度无显著差异(P>0.05)。结论采用麦默通微创旋切术加置引流对乳腺良性肿物患者治疗后,可改善患者术后恢复进程,降低并发症发生率。

乳腺癌HLA-A2限制性新抗原表位的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法筛选乳腺癌HLA-A2限制性新抗原候选表位,寻找乳腺癌新抗原高频突变位点。方法:利用NCBI、GDC数据库,从已报道的文献与测序数据中寻找乳腺癌单核苷酸变异形成的错义突变位点,通过HLA-A2抗原表位预测网站BIMAS、SYFPEITHI与基于人工神经网络的NetMHC4.0预测新抗原表位,剔除TAP结合力低于Intermediate的表位,按突变频率与预测结果对候选表位进行优先级排序。结果:使用上述方法共筛选出了BTLA、ERBB2、NBPF12等17个相对高频突变基因,共26个新抗原表位,不同表位BIMAS、SYFPEITHI预测结合力有较大差异(P<0.05),高优先级表位如GSTP1(A114V,突变频率5.94%)、BRCA2(N991H,突变频率5.40%)等有望成为新抗原候选位点,但其突变频率较低,难以做到真正的"通用",其作为乳腺癌通用新抗原疫苗表位的可能性较小。结论:乳腺癌共有突变低于其他肿瘤,寻找"通用"乳腺癌新抗原表位较为困难;"个体化"新抗原疫苗也许更有前景,但仍需要进一步研究来证实。

干扰ADAM17表达可降低人结肠癌细胞对西妥昔单抗耐药

目的研究ADAM17的表达与结肠癌SW480细胞对西妥昔单抗耐药相关性。方法通过Western blot法检测结肠癌细胞系ADAM17的表达情况,筛选出高表达ADAM17的结肠癌细胞株做为目标细胞株;采用siRNA片段干扰结肠癌细胞ADAM17的表达,Western blot验证干扰效果;100μg/mL的西妥昔单抗处理细胞24 h后,FITC/PI染色,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell实验检测ADAM17不同表达状态下的结肠癌细胞的迁移能力;运用Western blot法,检测在ADAM17不同表达状态下的结肠癌细胞EGFR、AKT的磷酸化水平。结果人结肠癌SW480细胞株中ADAM17表达较高(P<0.05)。siRNA-1和siRNA-2干扰片段可显著降低SW480株ADAM17表达(P<0.05)。ADAM17表达被干扰后的SW480细胞对西妥昔单抗敏感性显著上升(P<0.05)。干扰ADAM17表达后,在西妥昔单抗药物作用下SW480细胞迁移能力显著降低(P<0.05)。干扰了ADAM17表达后,SW480细胞实验组的p-EGFR、p-AKT较对照组组显著降低(P<0.001)。结论干扰ADAM17表达可抑制EGFR-AKT通路激活从而减少人结肠癌SW480细胞对西妥昔单抗耐药。