(1-3)-β-D葡聚糖联合半乳甘露聚糖抗原检测在侵袭性真菌感染中的应用价值

目的探讨(1-3)-β-D葡聚糖(G试验)和半乳甘露聚糖抗原(GM试验)检测在侵袭性真菌感染(IFI)中的应用价值。方法收集该院住院高危IFI患者126例,分别检测患者血清(1-3)-β-D葡聚糖和半乳甘露聚糖水平,计算G试验、GM试验及联合检测的敏感度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、假阳性率、假阴性率。结果 G试验的敏感度(83.0%)高于GM试验(77.4%),而特异度(74.2%)低于GM试验(89.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。联合检测敏感度、特异度、PPV及NPV分别为92.5%、95.5%、92.1%、92.0%,其敏感度和特异度均高于G试验、GM试验单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 G试验和GM试验联合检测,能提高诊断准确性,更有效地用于侵袭性真菌感染的早期诊断。

决明子营养价值分析及蛋白提取工艺研究

以大决明子为原材料,基于氨基酸比值系数法,对决明子的营养价值进行了分析;并以碱性缓冲液为提取剂,进行决明子蛋白提取工艺研究,探讨了缓冲液浓度及pH值、料液比、浸泡时间对蛋白提取率的影响,最后用正交试验确定大决明子蛋白的最佳提取工艺。结果表明决明子的营养价值高于大豆和紫花苜蓿,与南瓜接近略低于鸡蛋;提取工艺条件最佳为50 mmol/L、pH值=8.0的KH2PO4-NaOH缓冲液,料液比1 g:50 mL,浸泡提取时间12h。此条件下决明子蛋白的提取率为93.3%。

KLF4调控MMP9对原发性肝癌的侵袭迁移能力的影响

目的研究Krüppel样因子4(KLF4)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在原发性肝癌中的表达情况,探讨KLF4调节MMP9对原发性肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法收集原发性肝癌手术患者癌和癌旁组织标本,通过免疫组织化学、实时荧光定量PCR和免疫印迹试验(Western blot)检测50例肝癌组织及对应癌旁组织中KLF4和MMP9的表达情况;构建重组质粒,上调肝癌细胞(HepG2细胞系)的KLF4表达,检测MMP9mRNA及蛋白水平的表达情况;转染后的HepG2细胞运用Transwell侵袭试验和划痕试验观察侵袭和迁移能力的变化。结果相比癌旁组织,KLF4在肝癌组织中的表达明显降低(P<0.05),而MMP9的表达明显增高(P<0.05)。通过构建重组质粒,上调KLF4的表达,发现MMP9的mRNA和蛋白表达均降低,并影响HepG2细胞的侵袭和迁移能力。结论在原发性肝癌中,KLF4低表达,而MMP9高表达。在肝癌细胞中上调KLF4表达可引起MMP9表达下降,进而抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。

AGR2调控IFITM3的表达促进肝癌细胞的增殖

目的:探讨重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2,AGR2)的表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制.方法:通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学检测40例肝癌患者癌组织和对应癌旁组织中AGR2基因、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)的表达情况,构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2,并将其转染至肝癌细胞中,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测AGR2 mRNA和蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit 8)法检测细胞的增殖能力,利用流式细胞技术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测IFITM3的表达.结果:在原发性肝癌组织中AGR2,IFITM3呈现高表达;成功构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2,成功构建稳定高表达AGR2的肝癌HepG2细胞.pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞中AGR2 mRNA和蛋白的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组.与阴性对照组比较,pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞的体外增殖能力和克隆形成能力明显升高,IFITM3蛋白的表达水平也随之升高.结论:上调AGR2可以增加IFITM3的表达,促进肝癌细胞的增殖.

植物胆碱单氧化酶的生物信息学分析

为了研究胆碱单氧化物酶的抗逆机理,运用NCBI、Expasy、Psort、NetPhosK、TMHMM、NPSA网站和MEGA5、DNAman软件,对已在GenBank数据库中注册中的甜菜、菠菜、四翅滨藜草、山菠菜、苋菜等植物胆碱单氧化酶的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果表明:植物胆碱单氧化酶中Ala、Ser、Leu等氨基酸含量较丰富,属于稳定蛋白;不同植物胆碱单氧化酶的氨基酸序列具有较高的同源性(81.52%),均含有转运肽区、2Fe-S中心区和非血红素Fe离子结合区;分子进化树揭示胆碱单氧化酶有较强的保守性,可作为植物遗传分化和分子进化研究的重要依据;分子中不存在跨膜结构域,与疏水区域预测结果一致;可能受蛋白激酶C磷酸化,位点为Ser326;无规卷曲是多肽链中大量的结构元件;包含2个功能结构域,分属于Rieske家族与SRPBCC家族。本研究结果为开展胆碱单氧化酶的酶学特性及甘氨酸甜菜碱生物合成的分子机理研究提供理论参考。

KLF4与原发性肝细胞癌关系的研究进展

KLFs家族是一类具有锌指结构的转录因子,参与多个生理活动的调控,在细胞增殖、凋亡、分化以及胚胎发育等过程中扮演了关键的角色,与真核基因转录调控密切相关.Kruppel样因子4(Kruppel like factor 4,KLF4)作为KLFs家族中重要的一员,KLF4在原发性肝癌组织中呈现高表达,但是KLF4在原发性肝细胞癌的作用机制仍需要进一步的探讨,本文就KLF4在原发性肝细胞癌中的生物学功能进行综述.

抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病中的应用价值

目的探讨用间接免疫荧光法(IIF)抗核抗体(ANA)与免疫印迹法(LIA)特异性抗核抗体谱(ANAs)的联合检测在自身免疫性疾病(AID)中的应用价值。方法 436例患者,其中自身免疫病患者271例,非自身免疫病患者165例,所有患者同时检测血清ANA和ANAs,两种检测方法产生4种检出模式:IIF(+)/LIA(+)、IIF(-)/LIA(-)、IIF(+)/LIA(-)和IIF(-)/LIA(+)。结果 436份标本中IIF(+)/LIA(+)占40.15%,IIF(-)/LIA(-)占25.52%,IIF(+)/LIA(-)占15.27%,IIF(-)/LIA(+)占9.81%,IIF与LIA检测ANA的结果总体符合率为65.67%,ANA和ANAs在自身免疫病患者中的阳性率分别是65.3%和57.9%,显著高于非自身免疫病患者的17.6%和20.0%;ANA和ANAs在自身免疫病组和非自身免疫病组间阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两检测结果仅在MCTD和SLE患者中存在相关性(P<0.01),在其他观察组中不存在相关性(P>0.05)。结论 IIF检测ANA容易导致AID患者部分具有临床意义的ANA特异性抗体漏检,而ANAs检测因其测定的抗体数量有限也容易导致AID患者的ANA漏检。IIF-ANA和LIA-ANAs检测不能相互代替,对需要通过检测ANA来排除AID的患者标本应同时进行IIF-ANA和LIF-ANAs的检测,以避免仅采用一种方法进行检测时导致AID患者漏诊。ANA的IIF法易导致以抗-SSA、抗-SSB和抗-Ro52为主要抗体的患者ANA假阴性,而LIA法特异性ANAs的检测因检测的抗体不全面也无法取代ANA的IIF法检测。在临床实际工作中两种ANA的检测方法不能相互取代,应联合应用。

沉默干扰素诱导跨膜蛋白3可抑制肝癌细胞HepG2增殖和侵袭

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IFITM3小干扰RNA片段(IFITM3 si-RNA),采用脂质体介导转染肝癌细胞(Hep G2细胞系),同时设置无义序列组和空白对照组,实时荧光定量PCR检测转染后IFITM3 m RNA的表达;CCK8(cell counting kit 8)检测转染后细胞增殖能力;Western blot检测IFITM3在蛋白水平的表达;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果和癌旁组织相比,IFITM3在肝癌组织中的明显高表达。与无义序列组和空白对照组比较,IFITM3 si-RNA转染组细胞IFITM3表达和细胞增值率降低,穿膜细胞数也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕实验也表明迁移能力降低。结论 IFITM3在原发性肝癌中高表达;IFITM3在肝癌细胞增殖和侵袭过程中发挥重要作用,有望成为原发性肝癌基因治疗的侯选靶点。

肝胆管囊腺瘤合并先天性胆管扩张症1例

患者女，64岁，因发热（最高体温39.2℃）伴巩膜黄染，于2013年2月入本院治疗。患者病史近三年反复右上腹阵发性疼痛，且多次因“胰腺炎及胆管炎”在当地医院行抗炎治疗。既往乙肝小三阳病史15年。查体：巩膜轻度黄染，右上腹压痛，无反跳痛及肌紧张，未触及包块。肝功能检查：总胆红素28.12μmol/L，谷草转氨酶72.69μ/L，谷丙转氨酶119.40μ/L，碱性磷酸酶553.60μ/L；甲胎蛋白、癌胚抗原、糖类抗原及其他实验室检查结果均正常。腹部磁共振平扫及胆胰管成像提示：胆总管明显扩张，扩张的左侧肝内胆管壁可见乳头状病灶突向腔内（图1）。初步诊断为先天性胆管扩张症（考虑合并肝胆管囊腺瘤）。

电子商务环境下的企业营销理念创新

电子商务的发展与运用对企业营销理念产生了重大的影响,本文从传统企业营销理念出发,分析了其局限性,包括营销地域局部性、营销方式单一、单向性与中间商作用突出性及诚信建立的直接性;在对传统营销理念剖析的基础上,给出了电子商务环境下企业营销理念的创新特征,包括营销区域的转变、营销方式转被动为互动、"点对点"个性化营销、服务营销及更高的诚信要求五方面。

联合检测Cys-C、NT-proBNP、DD和AT-III在糖尿病肾病早期诊断中的临床价值

目的:探讨血清胱抑素C(Cys-C)、氨基末端-脑钠肽前体(NT-pro BNP)、D-二聚体(DD)和抗凝血酶-III(ATIII)联合检测在糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)早期诊断中的临床价值。方法:选取我院129例糖尿病患者,根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为无蛋白尿组43例、微量蛋白尿组49例和临床蛋白尿组37例,另取同期健康体检者45例作为对照组。测定各组Cys-C、NT-pro BNP、DD和AT-III水平。结果:临床蛋白尿组和微量蛋白尿组各项检测水平与对照组及无蛋白尿组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);临床蛋白尿组与微量蛋白尿组各项检测水平相比差异有统计学意义(P<0.05);四者并联检测的灵敏度、特异度和诊断符合率分别为94.2%、55.8%、81.4%,灵敏度明显高于单项检测;四者串联检测的灵敏度、特异度和诊断符合率分别为40.7%、93.0%、58.1%,特异度明显高于单项检测;四项联合诊断的ROC曲线下面积(0.901)大于各指标单独诊断。结论:联合检测Cys-C、NT-pro BNP、DD和AT-III能够提高早期糖尿病肾病的诊断效果。

乙型肝炎相关性肝癌中Toll样受体4调控周期蛋白依赖激酶4/6对其增殖的影响

目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)对乙型肝炎相关性肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法:Western blot法检测36例乙型肝炎相关性肝癌患者组织及相应癌旁组织中TLR4、周期蛋白依赖激酶(cyclindependent kinase,CDK)4和CDK6的蛋白表达水平,并分析癌组织中TLR4与CDK4,CDK6之间的关联性.构建3个特定干扰TLR4的siRNA序列和一个阴性对照序列,通过脂质体转染肝癌细胞Hep-3B,Western blot法筛选出最佳干扰序列.Western blot法检测转染前后肝癌细胞中TLR4、CDK4和CDK6的蛋白表达水平;MTT比色法、平板克隆形成实验检测干扰TLR4表达后肝癌细胞增殖能力.结果:在乙型肝炎相关性肝癌患者组织中,TLR4、CDK4和CDK6蛋白的总体表达水平高于相应癌旁组织(P<0.05),且TLR4分别与CDK4、CDK6的表达呈正相关性(r_1=0.66,r_2=0.57).成功构建并筛选出最佳干扰序列TLR4-siRNA-03.转染TLR4-siRNA-03后,与Control组相比,TLR4-siRNA组中CDK4、CDK6蛋白表达均随之降低(P<0.05),肝癌细胞Hep-3B的生长速度也明显下降(P<0.05),TLR4-siRNA组克隆形成率(18.77%±4.61%)也明显下降(P<0.05).结论:在乙型肝炎相关性肝癌中TLR4可能通过调控CDK4、CDK6来影响其增殖.

植物甜菜碱醛脱氢酶的生物信息学分析

运用生物信息学的方法,对已在GenBank数据库中注册的甜菜、菠菜、山菠菜、玉米、辽宁碱蓬等植物甜菜碱醛脱氢酶(BADH)的氨基酸序列进行分析。结果表明:植物BADH属于稳定蛋白质,含有较丰富的丙氨酸和谷氨酸;不同植物BADH的氨基酸序列具有较高的同源性,含有与酶功能相关的十肽保守序列及半胱氨酸残基;不同植物的BADH具有不同的亚细胞定位;分子进化研究表明,BADH可作为植物遗传分化和分子进化研究的重要依据;氨基酸序列中不存在信号肽;分子中不存在跨膜结构域,可能受蛋白激酶的磷酸化;α?螺旋是多肽链中的主要结构元件;蛋白质保守区域包含典型的醛脱氢酶功能结构域。该研究结果为开展BADH的酶学特性及植物抗逆的分子机理研究提供理论参考。

新老窖泥细菌群落结构差异及其对酿造白酒质量的影响

该实验选取六尺巷酒厂产酒质量低的新窖池窖泥及附近酒厂产酒质量良好的成熟老窖池窖泥,提取总脱氧核糖核酸(DNA),对细菌16S rRNA的V3-V4区基因进行扩增、高通量测序后分析群落结构的差异。结果表明,螺旋菌门(Spirochaetae)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)是不同浓香型白酒生产厂窖泥样品(标记为YRF、XJF及CXF)中的共有优势微生物;梭菌纲(Clostridia)是成熟窖泥中的绝对优势微生物;在窖泥细菌的系统发育多样性上,新窖泥样品(标记为LCX)中梭菌纲与芽孢杆菌纲(Bacilli)的相对丰度显著低于成熟窖泥,是新窖池产酒质量比成熟老窖池差的主要原因。对窖泥细菌群落结构的分析有助于揭示浓香型白酒质量的成因。

宁夏灵武长枣几个优树比较选择研究

本试验采用3～5株优势木对比法开展灵武长枣优树比较研究。对选定区域内的优树,测定其生长性状指标、光合基础性状指标、果实性状指标,利用主成分分析法、隶属函数分析法等方法,对其进行综合评价分析。结果表明:不同编号的灵武长枣优树的综合评价得分排序为1335>1415>2101>2017>2016>1219>1602,编号为1335的灵武长枣优树综合指标表现最佳。该研究为灵武长枣的繁殖推广及研究提供一定的参考依据。

白酒大曲真菌群落结构多样性研究技术与进展

随着现代分子生物学技术在微生物群落结构多样性研究中的广泛应用,打破了传统微生物培养方法的局限性,提高了对于大曲中真菌群落结构多样性的认识。该文主要综述了研究大曲中真菌群落结构多样性的方法,传统可培养技术以及现代分子生物学技术的各种方法,主要包括磷脂脂肪酸技术(PLFA)、聚合酶链式反应(PCR)-变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术、PCR-单链构象多态性(SSCP)技术、基因克隆文库技术、高通量测序(HTS)技术以及组学技术,以及近年来传统可培养技术和现代分子生物学技术手段在大曲中真菌群落结构多样性的应用研究进展,对深入研究大曲发酵过程中真菌多样性构成及变化规律奠定理论基础。

浅谈课堂教学中的辩证关系

教育家吕型伟先生积60多年教育经验归纳为：教育是事业，其意义在于奉献；教育是科学，其价值在于求真；教育是艺术，其生命在于创新。课堂教学既是科学又是艺术，探索课堂教学艺术，尤其是教学艺术的辩证关系，就是要在教学目标、教学思维、课堂结构、教学方法等方面进行有益的探索。

敞开即尊重--吉林农业大学新农科建设下的协同育人模式

提到东北,一句“天下粮仓”足以折射出它在国家粮食安全上的重要地位。地缘赋予东北得天独厚的条件,从“北大荒”到“北大仓”,它逐渐承担起了更重要的民生责任。那些在黑土地上不断精进的辛劳耕耘,和那些漫长等待春华秋实的耐心,让人们把“中国饭碗”端得更加有底气。5月,又到了播种的季节,黑土地的养分正在悄然酝酿着新一轮的遇见。产业的生生不息,驱动着教育的同频共振。

构建农村教研工作的立体框架

怎样卓有成效的开展教研工作，使教研工作有特色、有水平、有新意、有创意，我的工作体会是理清思路，理顺关系，从“点”、“线”、“面”、“体”四个方面，构建新时期教研的立体框架。