初诊多发性骨髓瘤外周血PLR与Treg、Th17的相关性及对预后的影响

目的:探讨初诊多发性骨髓瘤(MM)外周血血小板/淋巴细胞比值(PLR)与调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)的相关性及对预后的影响。方法:本研究纳入郑州人民医院血液内科2015年6月至2022年10月收治的初诊MM患者135例作为MM组,收集临床资料,包括性别、年龄、免疫分型、ISS分期、血钙(Ca)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、PLR、LDH、β2微球蛋白(β2-MG)、Treg、Th17的水平。选取同期本院健康体检的健康志愿者60例作为对照组。比较MM组与对照组的PLR、Treg、Th17水平。运用Pearson分析PLR与Treg、Th17的相关性。分析不同PLR的MM患者与临床特征、预后的关系。结果:MM患者的PLR、Th17均明显高于对照组,Treg的比例明显低于对照组(P<0.05)。MM患者PLR与Treg呈负相关性(r=-0.616),PLR与Th17呈正相关性(r=0.555)。以均值PLR=132.72为界,将135例MM患者分为高PLR组(n=54)和低PLR组(n=81),高PLR的MM患者ISS分期、ALB、Treg明显高于低PLR组,而Th17明显低于低PLR组(P<0.05)。经单因素和COX回归分析,PLR是初诊MM患者预后的独立危险因素(P<0.05)。高PLR的MM患者较低PLR的MM患者有更佳的PFS和OS,差异有统计学意义(P<0.05)。将2015年6月至2018年12月收治的65例患者MM作为训练集,将2019年1月至2022年10月收治的70 MM患者作为验证集,分别比较不同PLR的MM患者的OS,结果显示,训练集和验证集的结论保持一致,高表达的PLR具有更高的OS(P<0.01)。结论:初诊MM患者PLR与Treg、Th17存在相关性,高PLR者预后更好,PLR可用于评估MM预后。

IL-2、IL-15增强免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤活性

目的:观察IL-2、IL-15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响。方法:抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组:(1)编辑前NK细胞组:加入100 U/ml IL-2;(2)单纯编辑组:NK细胞与CNE2细胞10∶1混合,加入100U/ml IL-2;(3)IL-2再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入1 000 U/ml IL-2;(4)IL-15再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入10 ng/ml IL-15。24 h后,流式细胞仪检测各组NK细胞表面NKG2D的表达;LDH释放测定法测定效靶比20∶1时各组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果:编辑前NK细胞组、单纯编辑组、IL-2再培养组、IL-15再培养组NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(97.63±0.83)%、(53.50±1.25)%、(94.47±1.00)%、(98.07±0.21)%。IL-2、IL-15再培养组NK细胞NKG2D的表达分别比单纯编辑组有显著的增加(P<0.01),该4组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为(35.90±3.27)%、(4.70±2.30)%、(31.70±3.56)%、(40.18±2.94)%,IL-2再培养组、IL-15再培养组明显提高编辑后NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性(P<0.01),IL-15的作用强于IL-2。结论:高剂量IL-2、IL-15可以上调免疫编辑后NK细胞表面NKG2D的表达,恢复编辑后NK细胞对鼻咽癌细胞CNE2的杀伤活性,IL-15的作用强于IL-2。

IL-21增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤作用及其可能的机制

目的:探讨细胞因子IL-21对CIK细胞体外杀伤食管癌EC9706细胞活性的影响,并初步分析其可能的分子机制。方法:体外无菌分离人外周血单个核细胞,分别进行常规培养和加IL-21培养CIK细胞。流式细胞术检测2种培养CIK细胞的免疫表型,LDH释放法检测2种培养CIK细胞杀伤食管癌EC9706的活性,ELISA法检测2种CIK细胞培养上清液IFN-γ浓度。结果:常规培养和加IL-21培养的2种CIK细胞增殖数量无明显差异。加IL-21培养的CIK细胞CD3^+CD56^+细胞比例、CD3^+细胞内颗粒酶B和穿孔素表达率均显著高于常规培养CIK细胞[(26.95±3.53)%vs(16.18±1.04)%,(33.29±2.30)%vs(23.58±2.28)%和(59.70±1.91)%vs(45.96±2.67)%,均P<0.05)。效靶比20∶1和30∶1时,加IL-21培养的CIK细胞杀伤EC9706细胞的活性均显著高于常规培养的CIK细胞[20∶1时:(43.66±1.99)%vs(34.59±1.75)%;30∶1时:(57.52±2.15)%vs(42.23±1.87)%,均P<0.05]。加IL-21培养CIK细胞的上清液FN-γ的浓度明显高于常规培养CIK细胞的上清液[(142.7±13.4)vs(42.6±3.3)ng/L,P<0.05]。结论:IL-21增加CD3+CD56+细胞比例和颗粒酶B及穿孔素的表达,提高CIK细胞分泌IFN-γ,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。

顺铂对鼻咽癌细胞NKG2D配体表达和NK细胞杀伤活性的增强作用

目的研究顺铂(Cisplatin,DDP)作用前后人鼻咽癌细胞CNE2NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子表达的改变及NK细胞杀伤活性的变化。方法MTT法测定DDP对CNE2细胞的50%抑制量(IC50);以此浓度DDP作用CNE2细胞24h,乳酸脱氢酶释放法检测效靶比20:1时,NK细胞对DDP作用前后的CNE2细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测DDP作用前后的CNE2细胞表面NKG2D配体(MI-CA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子表达的变化。结果DDP对CNE2细胞的IC50为5mg/L。效靶比20:1时,NK细胞对5mg/LDDP作用前后的CNE2细胞的杀伤活性分别为(38.11±1.41)%,(47.71±1.53)%,差异有统计学意义(P<0.05),DDP作用后CNE2细胞表面MICA/B、ULBP1、ULBP3表达显著升高,与作用前相比差异有统计学意义(P<0.05)。ULBP2、HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05)。结论DDP能提高CNE2细胞NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP3)的表达,从而增强CNE2细胞对NK细胞杀伤的敏感度。

紫杉醇增强肺癌细胞NKG2D配体表达和CIK细胞杀伤活性

目的研究不同浓度紫杉醇作用人肺腺癌A549细胞48小时后NKG2D配体表达的改变及CIK细胞杀伤活性的变化。方法 采用MTT法测定紫杉醇对A549细胞24小时的50%抑制率(IC50);流式细胞术检测IC50、1/2 IC50、1/4 IC50浓度紫杉醇作用A549细胞48小时后A549细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)表达的变化;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,CIK细胞对IC50浓度的紫杉醇作用前及作用48小时后A549细胞的杀伤活性。结果 不同浓度紫杉醇作用48小时后A549细胞表面MICA、MICB、ULBP2、ULBP3表达显著升高,ULBP1表达降低(P<0.05)。效靶比10∶1、20∶1、30∶1时,CIK细胞对A549细胞的杀伤活性分别为(11.08±1.22)%、(36.22±0.91)%、(45.73±2.00)%;CIK细胞对IC50浓度紫杉醇作用48小时后的A549细胞杀伤活性分别为(20.79±3.33)%,(53.47±1.62)%、(66.39±0.77)%,与作用前比较均明显增强(P<0.05)。结论 紫杉醇作用后能提高A549细胞NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP2、ULBP3)的表达,从而增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。

吉非替尼上调NKG2D配体表达增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性

目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼对人肺腺癌A549细胞NKG2D配体表达及NK细胞杀伤活性的影响及其分子机制。方法:MTT法测定吉非替尼对A549细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测吉非替尼、EGFR下游分子LY294002(PI3-K抑制剂)、SB203580(MAPK抑制剂)、STAT21(STAT3抑制剂)、Rottlerin(PKC抑制剂)作用A549细胞24小时后A549细胞NKG2D配体的表达。乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,NK细胞对吉非替尼作用前、后A549细胞的杀伤活性。结果:吉非替尼上调A549细胞MICB、ULBP1表达,增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性,EGFR下游分子MAPK、STAT3抑制剂不影响A549细胞NKG2D配体的表达,PI3-K抑制剂下调A549细胞MICA表达,PKC抑制剂上调ULBP1表达。结论:吉非替尼上调NKG2D配体表达增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性。

BDNF对食管癌细胞株ECa9706体外侵袭能力的影响

目的:本研究观察脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对食管癌细胞株ECa9706体外增殖和迁移能力的影响以及机制.方法:采用MTT和Transwell方法分别观察BDNF以及酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,Trk B)抑制剂K252a对ECa9706细胞增殖和迁移能力的影响,采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和Western blot方法分别检测ECa9706细胞中Trk B和磷脂酶C(phospholipase C,PLC)-γ1的m RNA和蛋白表达水平.结果:BDNF可显著促进ECa9706细胞增殖和迁移能力,该作用可被K252a拮抗.与对照组相比,BDNF可诱导Trk B的m RNA和蛋白表达显著增加,并提高PLC-γ1的蛋白表达水平.结论:BDNF/Trk B/PLC-γ1在食管癌细胞迁移浸润中具有重要作用.

姜黄素对人急性髓系白血病细胞株K562增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨姜黄素对人急性髓系白血病细胞株K562增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:取对数生长期人急性髓系白血病K562细胞,用MTT法测定细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法和Western blot分别检测Bax、BCL-2和Caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果:姜黄素10、20和40μmol/L组培养24 h和48 h细胞增殖抑制率均高于对照组(姜黄素0μmol/L),且细胞增殖抑制率呈浓度-时间依赖性(r=0.879,r=0.914)。姜黄素10、20和40μmol/L组G_(0)/G_(1)细胞比例和细胞凋亡率均高于对照组,且呈药物浓度依赖性(r=0.856,r=0.782)。姜黄素10、20和40μmol/L组Bax和Caspase-3 mRNA表达高于对照组,而BCL-2 mRNA表达低于对照组,且呈药物浓度依赖性(r=0.861,r=0.748,r=-0.817)。姜黄素10、20和40μmol/L组Bax蛋白表达灰度值高于对照组,而BCL-2和Caspase-3蛋白表达灰度值低于对照组,且呈药物浓度依赖性(r=0.764,r=-0.723,r=-0.831)。结论:姜黄素可抑制人急性髓系白血病细胞株K562细胞增殖,将细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期,促进细胞凋亡,且通过调控Bax、BCL-2和Caspase-3而诱导K562细胞凋亡。

血常规与C-反应蛋白联合检测在社区呼吸道感染中的应用分析

目的评价血常规与C-反应蛋白联合检测在社区呼吸道感染性疾病中的应用价值。方法选取2010年5月——2013年4月就诊于我院的110例呼吸道感染患者,其中细菌性感染患者60例为观察组,非细菌性感染者50例为对照组,两组入院即取末梢静脉血,并采用免疫比浊法检测血清C-反应蛋白及血常规。结果观察组CRP阳性率为85.00%,WBC阳性率为76.67%,对照组CRP阳性率为34.00%,WBC阳性率为18.00%,两组患者血清CRP阳性率及WBC阳性率相比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者通过比浊法测定末梢血CRP及WBC的数量,结果如表2,观察组与对照组CRP及WBC的值相比正常值均有不同程度升高,但对照组与正常值较为接近,观察组相比于对照组及正常值差异均有统计学意义,P<0.05。结论在社区呼吸道感染患者的诊断中联合应用血常规与C-反应蛋白检测有助于区分细菌性感染和非细菌性感染,值得在临床上予以推广。

鼻咽癌患者外周血T细胞亚群及活化T淋巴细胞检测中流式细胞术的应用价值探讨

目的:探讨流式细胞术在鼻咽癌患者外周血T细胞亚群及活化T淋巴细胞中的应用价值。方法:回顾性搜集2018年1月—2019年10月于郑州人民医院就诊的52例鼻咽癌患者临床资料作为试验组,并选取同期体检健康者50例为对照组。均采用流式细胞仪检测并对比外周血T细胞亚群及活化T淋巴细胞水平。结果:试验组CD3^(+)、CD4^(+)水平低于对照组,CD8^(+)、CD(16^(+)^(+)56^(+))水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组CD3^(+)/HLA-DR、CD8^(+)/HLA-DR水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鼻咽癌患者免疫功能低于正常群体,而应用流式细胞仪检测鼻咽癌患者的外周血细胞亚群及活化T淋巴细胞可有效反映患者肿瘤的免疫活化状态及病情变化。

流式细胞术分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素对实验结果的影响

目的探讨流式细胞术(FCM)分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素对实验结果的影响。方法以FCM分析血液淋巴细胞免疫表型,分析不同时间测定淋巴细胞、单核细胞与中性粒细胞表面白细胞共同抗原含量,不同设门方法测定淋巴细胞百分比,不同染色方法分析淋巴细胞免疫表型差异,找出影响实验结果的相关因素。结果血液标本放置1 h、6 h、8 h后淋巴细胞白细胞共同抗原含量对比,差异无统计学意义(P>0.05);血液标本放置1 h、6 h、8 h后单核细胞、中性粒细胞白细胞共同抗原含量对比,差异显著(P<0.05);散射光设门、荧光/散射光设门、三色荧光/侧向角散射光测定的GL、TL对比,差异显著(P<0.05);单色、双色、三色法分析T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T+B+NK细胞对比,差异显著(P<0.05)。结论FCM分析血液淋巴细胞免疫表型实验结果受标本放置时间、淋巴细胞设门方法与染色方法影响,临床需选取最佳检测时间、淋巴细胞设门方法与染色方法,以提高分析结果准确性。

肺结核患者血清T淋巴细胞亚群检测流式细胞术的应用

目的分析血清T淋巴细胞亚群检测流式细胞术在肺结核中的应用价值。方法选取2018年12月至2019年6月于本院就诊并被确诊为肺结核的48例患者作为观察组,并纳入10例健康受试者为对照组。采用流式细胞术测定两组血清T淋巴细胞亚群指标。比较两组及观察组间不同结核菌性质、病变累及肺野范围T淋巴细胞亚群指标。结果相比对照组,观察组的CD8+较高,CD4+/CD8+值较低,差异有统计学意义(P<0.05);两组CD3+、CD4+差异不明显,差异无统计学意义(P>0.05);观察组阳性结核菌患者与阴性结核菌患者的各项T淋巴细胞亚群指标,差异无统计学意义(P>0.05);>3肺野患者CD3+低于≤3肺野的患者,差异有统计学意义(P<0.05);CD4+、CD8+、CD4+/CD8+差异无统计学意义(P>0.05)。结论流式细胞术应用于肺结核患者血清T淋巴细胞亚群检测中,对病情及预后具有良好的预测价值。

厄洛替尼增强肺腺癌A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性

目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼对人肺腺癌A549细胞NKG2D配体表达及CIK细胞杀伤活性的影响及其分子机制。方法:流式细胞仪检测厄洛替尼、EGFR下游分子LY294002(PI3K抑制剂)、SB203580(MAPK抑制剂)、STAT21(STAT3抑制剂)作用A549细胞24 h后A549细胞NKG2D配体的表达。乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时,CIK细胞对10μmol/L厄洛替尼作用前、后A549细胞的杀伤活性。结果:厄洛替尼下调A549细胞MICA表达,上调MICB、ULBP1表达,EGFR下游分子MAPK、STAT3抑制剂不影响A549细胞NKG2D配体的表达,PI3-K抑制剂下调A549细胞MICA表达,厄洛替尼增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。结论:EGFR TKI抗肺癌作用与其增强肺癌细胞对免疫细胞杀伤的敏感性有关。

晚期肺腺癌组织中MICA/B的表达变化及其临床意义

目的检测晚期肺腺癌组织中主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A和B(MICA/B)的表达情况,并分析其与患者临床病理特征、预后之间的关系。方法采用免疫组化法检测126例晚期肺腺癌患者病理组织中MICA/B的表达情况,染色总积分<3分为阴性表达,≥3分为阳性表达,分析MICA/B表达与表皮生长因子受体(EGFR)基因类型等临床病理特征、预后之间的关系。结果晚期肺腺癌组织MICA/B的阳性表达率为48.41%,不同性别、年龄患者MICA/B的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同TNM分期、T分期、组织学分级、淋巴结转移、EGFR基因类型患者的差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,MICA/B阳性表达者的生存率低于阴性表达者(P<0.05)。组织学分级、EGFR基因类型、MICA/B表达强度(β=0.642,HR=3.058)是晚期肺腺癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论晚期肺腺癌组织中MICA/B高表达,与晚期肺腺癌的TNM分期、T分期、组织学分级、淋巴结转移、EGFR基因类型密切相关,有望成为晚期肺腺癌病情评估和预后判断的辅助参考指标。

血清降钙素原、C-反应蛋白与白细胞介素-6在乳腺癌手术后切口感染妇女中的改变分析

目的:探讨血清降钙素原(PCT)、血清C-反应蛋白(CRP)与血清白细胞介素-6(IL-6)在乳腺癌手术后切口感染妇女中的改变情况,以期为乳腺癌手术后切口感染的诊断、防治及改善患者预后提供理论依据。方法:选择自2018年1月—2019年1月在郑州人民医院接受手术治疗的乳腺癌患者180例,根据患者是否发生手术后切口感染将患者分为两组,研究组即术后切口感染组22例,参照组即未发生术后切口感染组158例。对比两组患者的血清PCT、血清CRP与血清IL-6的表达水平,同时对两组患者的临床病例资料进行统计分析,利用单因素及多因素logistic回归分析研究影响乳腺癌患者手术后发生切口感染的危险因素:将单因素分析中具有统计学意义的项目纳入到多因素logistic回归分析模型。结果:乳腺癌患者手术后切口感染的发病率较高,达到了12.2%;研究组患者的血清PCT、血清CRP与血清IL-6表达水平(3.55±0.61ng/L,41.52±8.52mg/L,45.52±13.11ng/L)均明显高于参照组患者(0.88±0.15ng/L,18.66±3.21mg/L,12.46±2.89ng/L),P<0.05;患者临床资料的单因素分析结果显示有无糖尿病史、有无放疗化疗史、血红蛋白水平、住院总时间及使用抗生素种类是乳腺癌患者手术后发生切口感染的危险因素,P<0.05;多因素logistic回归分析结果显示有无糖尿病史、有无放疗化疗史、血红蛋白水平、住院总时间及使用抗生素种类等五种因素均是乳腺癌患者手术后发生切口感染的独立危险因素,P<0.05。结论:乳腺癌患者手术治疗容易发生手术切口感染,血清PCT、血清CRP与血清IL-6表达水平可以作为乳腺癌手术后切口感染的在效诊断指标;有无糖尿病史、有无放疗化疗史、血红蛋白水平、住院总时间及使用抗生素种类等五种因素均是乳腺癌患者手术后发生切口感染的独立危险因素,要根据患者的临床资料采取干预措施以有效防治乳腺癌患者手术后切口感染。

厄洛替尼作用后表皮生长因子受体突变的人肺腺癌HCC827细胞对细胞因子诱导的杀伤细胞的杀伤敏感性

目的观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼及EGFR下游主要分子对人肺腺癌HCC827细胞表面NKG2D配体表达的影响,探讨厄洛替尼作用于肺腺癌HCC827细胞后,细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞对HCC827细胞杀伤活性的变化。方法 HCC827细胞分为空白对照组及厄洛替尼5、10μmol·L-1组,应用流式细胞仪检测细胞表面NKG2D配体主要组织相容性复合体I类链相关蛋白(MIC)A、B及UL16结合蛋白(ULBP)1、2、3的表达。HCC827细胞培养24 h后,分别以EGFR下游分子磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580、信号传导及转录激活因子3抑制剂STAT21、蛋白激酶C抑制剂Rottlerin进行作用,应用流式细胞仪分析HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的表达,并与空白对照组进行比较。乳酸脱氢酶释放法检测CIK细胞对空白对照组和厄洛替尼组HCC827细胞的杀伤活性。结果与空白对照组比较,厄洛替尼5、10μmol·L-1组HCC827细胞表面NKG2D配体MICB、ULBP1表达显著增高(P<0.05),MICA、ULBP2、ULBP3表达差异无统计学意义(P>0.05);厄洛替尼5μmol·L-1组与10μmol·L-1组比较,HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,SB203580组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达差异无统计学意义(P>0.05),STAT21组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB表达显著增高(P<0.05),LY294002组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA表达显著降低(P<0.05),Rottlerin组的HCC827细胞表面NKG2D配体ULBP1表达显著增高(P<0.05)。同一效靶比时,CIK细胞对厄洛替尼作用后组HCC827细胞的杀伤率均显著高于未经药物作用组(P<0.05)。效靶比20∶1时经NKG2D单抗封闭后的CIK细胞对未经药物作用组和10μmol·L-1厄洛替尼作用后组HCC827细胞的杀伤率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论厄洛替尼能增高HCC827细胞表面NKG2D配体表达,增强CIK细胞的杀伤活性。

MMP-2、MMP-9在血管性动脉瘤中的表达及他汀类药物的影响分析

目的:探讨MMP-2、MMP-9在血管性动脉瘤中的表达及他汀类药物的影响方法:选取2018年4月〜2019年6月于我院行择期血管性动脉瘤手术治疗的im例患者以及同期健康检查的60例非动脉瘤患者作为研究对象进行回顾性分析,其中入院后给予他汀类药物治疗的45例患者为他汀类药物治疗组,未采用他汀类药物治疗的56例患者为非他汀类药物治疗组,6U例健康体检者为非动脉瘤对照组比较三组患者的基本临床资料,非动脉瘤对照组患者于体检当日抽取空腹静脉血,他汀类药物治疗组和非他汀类药物治疗组患者分别于入院时(T0)、术前Id(T1)、术后1个月(T2)和术后3个月(T3)分别抽取空腹静脉血对血液常规、基质金属蛋白酶-2(matrixmetallo proteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrixmetallo proteinase-9,MMP-9)水平进行检测,并对结果进行比较分析结果.入院时(T0)他汀药物治疗组、非他汀药物治疗组患者MMP-2、MMP-9水平均较4动脉瘤对照组明显增高(P<0.01);与入院时(T0)比较,术前Id(T1)他汀药物治疗组患者MMP-2、MMP-9水平明显降低(r=36.390,P<0.01),而非他汀类药物治疗组患者明显增高(t=22.651,P<0.05);术后1个月(T2)、术后3个月(T2)他汀类药物治疗组和非他汀类药物治疗组患者MMP-2、MMP-9水平均较术前明显降低(P<0.05):组间比较,他汀类药物治疗组患者术前Id(T1)、术后1个月(T2)和术后3个月(T3)的血浆MMP-2、MMP-9水平均明显低于非他汀类药物治疗组,差异具有统计意义(P<0.05).结论:MMP-2和IV1MP-9水平变化与血管瘤有关,术前给予阿托伐他汀治疗可有效降低血管性动脉瘤患者围手术期MMP-2和MM丨3-9水平,这可能对患者预后有一定的作用。

顺铂和氟尿嘧啶增强食管癌细胞NKG2D配体的表达及CIK细胞的杀伤活性

目的研究顺铂(Cisplatin,DDP)和氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人食管癌EC9706细胞NKG2D配体表达及CIK细胞杀伤活性的影响。方法 MTT法测定DDP、5-Fu的50%抑制浓度(IC50);以1/2 IC50浓度DDP、5-Fu作用EC9706细胞72 h,RT-PCR检测DNA损伤修复系统相关信号分子的表达。流式细胞仪检测DDP、5-Fu作用前、后EC9706细胞NKG2D配体的表达。乳酸脱氢酶释放法检测效靶比20∶1时,CIK细胞对DDP、5-Fu作用前、后EC9706细胞的杀伤活性。结果 DDP、5-Fu的IC50分别为5μg/ml、10μg/ml。DDP、5-Fu可上调DNA损伤修复系统相关信号分子mRNA的表达。DDP与EC9706细胞共孵育72 h后,EC9706细胞MICA、MICB、ULBP2、ULBP3表达较DDP作用前明显增强(P<0.05),ULBP1无明显变化(P>0.05)。5-Fu与EC9706细胞共孵育72 h后,EC9706细胞MICA、ULBP2、ULBP3表达明显增强(P<0.05),MICB、ULBP1无明显变化(P>0.05)。效靶比20∶1时,CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性为(37.08±0.62)%,CIK细胞对1/2 IC50DDP、1/2 IC505-Fu作用后的EC9706细胞杀伤活性分别为(59.33±2.10)%、(52.44±0.97)%,与作用前相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DDP、5-Fu通过激活DNA损伤修复系统相关信号分子,提高EC9706细胞NKG2D配体的表达,从而增强EC9706细胞对CIK细胞杀伤的敏感度。

组氨酸三联体核苷酸结合蛋白2通过调控巨噬细胞焦亡抑制动脉粥样硬化

目的:探讨组氨酸三联体核苷酸结合蛋白2(HINT2)对动脉粥样硬化(AS)的影响及其可能机制。方法:分离胸痛患者的外周血单个核细胞(PBMCs)并诱导分化为巨噬细胞,检测细胞中HINT2的表达水平。体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,检测细胞上清液炎症因子的水平及细胞死亡情况。建立载脂蛋白E基因敲除(apoE^(−/−))小鼠AS模型,检测小鼠主动脉根部斑块形成及巨噬细胞的脂质代谢和泡沫化程度。RT-qPCR和Western blot法检测RAW264.7细胞和apoE^(−/−)小鼠主动脉内焦亡相关因子的表达水平。结果:急性冠脉综合征患者PBMCs源性巨噬细胞中HINT2的表达水平显著降低,且与血清中促炎因子水平呈负相关,与抗炎因子水平呈正相关,提示HINT2可能抑制AS的炎症反应。体外实验结果表明,过表达HINT2基因能够抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激下巨噬细胞的脂质积累和泡沫化,降低细胞上清中白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-18和肿瘤坏死因子α等炎症因子的分泌,减少细胞死亡和焦亡相关因子的mRNA及蛋白表达。动物实验结果表明,过表达HINT2基因能够减轻apoE^(−/−)小鼠主动脉根部的斑块负荷,降低巨噬细胞的泡沫化程度,抑制焦亡相关因子核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、caspase-1、消皮素D(GSDMD)、IL-1β和IL-18的mRNA及蛋白表达。结论:HINT2可以抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡,减轻AS过程中的炎症反应,减缓AS的发生与发展。

可手术肺腺癌主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A和B的表达及临床意义

目的检测可手术肺腺癌组织中主要组织相容性复合体－Ⅰ类分子链相关蛋白A和B（MICA/B蛋白）的表达，探讨其临床意义。方法回顾分析郑州人民医院2002年1月至于2003年12月诊治的可手术肺腺癌100例。免疫组织化学染色法检测其MICA/B蛋白的表达，按照免疫组织化学染色评分标准≥5分者为高表达组，〈5分者为低表达组。运用χ2检验分析MICA/B蛋白与患者临床病理特征的关系。Kaplan－Meier生存曲线及Log－rank检验计算MICA/B蛋白表达与可手术肺腺癌总生存期之间的关系。采用Cox回归模型分析各个协变量单一及联合效应。结果MICA/B蛋白在可手术肺腺癌组织中的高表达率为38%（38/100）。MICA/B蛋白表达在EGFR基因突变组中的高表达率显著高于EGFR基因野生组（93.8%比11.8%，P〈0.001），而在患者不同年龄、性别、TNM分期、T分期、组织学分级及淋巴结转移之间差异均无统计学意义。MICA/B蛋白高表达组的总生存期显著短于低表达组（10.4比28.9个月，P＝0.005）。结论 可手术肺腺癌组织中MICA/B蛋白高表达，与EGFR基因突变型及总生存期有密切关系，有可能是可手术肺腺癌患者预后不良的指标。