利用淀粉的碱性蛋白酶工程菌的培养条件

自70年代开始,国内曾筛选出短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus） 289、209两株产碱性蛋白酶的菌株。由于这两个菌株以葡萄糖为速效碳源,菌株产碱性蛋白酶的能力受培养基中总糖的制约,且两株菌易受短小芽孢杆菌烈性噬菌体PP1—PP10。的感染,因而不利于作为碱性蛋白酶制剂生产用菌。作者已从制革厂毛泥池中分离得到一株碱性蛋白酶产生菌——短小芽孢杆菌cl72,该菌株对PP1—pp10。噬菌体不敏感,对地衣芽孢杆菌pL1噬菌体亦无交叉感染,是野生型的噬菌体抗性菌株。c172菌无淀粉酶基因。

短小芽孢杆菌碱性蛋白酶的性质

对短小芽孢杆菌ｃ１７２（ｐＢＸ９６）转化子发酵淀粉产生的碱性蛋白酶，采用硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５脱盐、ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等方法进行纯化，并对纯化酶的性质进行了研究．结果表明，酶反应的最适ｐＨ值为１１．０；在ｐＨ８．０～１１．０之间稳定；最适反应温度为４０℃；热稳定性较好，４５℃下处理３０ｍｉｎ酶活性不变，６０℃下处理３０ｍｉｎ活力保留６５％．对甲基苯磺酰氟（ＰＭＳＦ）能完全抑制该酶活性，洗涤剂中的三聚磷酸钠对酶有较大钝化作用．

利用人工湿地脱除废水中氨氮和磷的统计分析

论述了利用人工湿地脱除废水中氨氮和正磷酸盐类污染物的统计分析,调查基于国外文献报道的研究数据和实际运行数据。结果表明,污染物输入和输出浓度关系可以由线形规律获得关联,这些污染物因子脱除动力学也可以用适于BOD降解的Kichuth一级脱除方程来描述。由不同人工湿地关联的一级动力学常数具有较好的相关性。

18Sr RNA基因巢式PCR-RFLP分析两株牛源隐孢子虫分离株

目的18S rRNA巢式聚合酶链反应(Nested PCR)-限制片段长度多态性(restriction fragment length polymor-phism,RFLP)鉴定上海(简称SH-BOV)和徐州(简称XZ-BOV)两株牛源隐孢子虫。方法改良-抗酸染色确定感染隐孢子虫的上海株和徐州株牛粪,提取DNA后经18S rRNA基因巢式PCR扩增,扩增产物测序后用Blast和MEGA软件进行同源性和系统发育分析。同时扩增产物分别用SspⅠ和VspⅠ单酶切,且XZ-BOV扩增产物用DdeⅠ酶切后进行RFLP分析。结果通过18S rRNA基因分析,SH-BOV与1株巴西牛隐孢子虫Cryptospridiumbovis同源性为100%,种系发育树上两者在同一分支;XZ-BOV与安氏隐孢子虫C.andersoni同源性为99%,种系发育树上两者在同一分支。扩增产物分别用SspⅠ和VspⅠ单酶切后,可鉴别出SH-BOV为C.bovis,XZ-BOV为C.andersoni或C.muris。XZ-BOV扩增产物用DdeⅠ酶切后可鉴别出XZ-BOV为C.andersoni。结论上海株牛源隐孢子虫(SH-BOV)鉴定为牛隐孢子虫(C.bovis),徐州株牛源隐孢子虫(XZ-BOV)鉴定为安氏隐孢子虫(C.andersoni)。

新发水源性人兽共患寄生虫病的检测和污染源追踪

中国是一个干旱和缺水严重的国家，我国的淡水资源总量为28000亿立方米，占全球水资源的6％，名列世界第四位。但是，我国的人均水资源量只有2300立方米，仅为世界平均水平的1／4，是全球水资源最贫乏的国家之一。而且，随着经济社会的发展，

下腔静脉滤器在下肢深静脉血栓形成治疗中的临床应用分析

目的探讨置入下腔静脉滤器在下肢深静脉血栓形成治疗中的临床应用价值。方法回顾性分析自2004年1月至2008年5月我科共收治的244例下肢深静脉血栓形成患者的临床及随访资料。结果下腔静脉滤器未置入组与置入组肺动脉栓塞发生率的差异有统计学意义(分别为8.19%和0%,P<0.05)。未置入组中有23例(23/196)患者因深静脉血栓形成复发再次住院治疗,下腔静脉滤器置入组中有6例(6/48)患者复发,两组之差异无统计学意义(P>0.05)。下腔静脉滤器置入组的肺栓塞发生率显著降低,但其中1例滤器倾斜,2例滤器移位,2例下腔静脉血栓形成,4例入路侧深静脉血栓形成和3例穿刺点血肿形成。结论下腔静脉滤器近期预防下肢深静脉血栓引起的肺栓塞简便有效,但其近、远期并发症应引起重视;其在下肢深静脉血栓形成治疗中的临床应用价值有待进一步评估和探讨。

利用淀粉产生碱性蛋白酶工程菌的构建

以不能利用淀粉为碳源、抗ｐｐ系列噬菌体和ｐＬ１噬菌体、产碱性蛋白酶（９４００－９８００ｕ／ｍｌ）的ＢａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓＣ１７２－６０为受体株，采用原生质体转化技术将携带糖化型小淀粉酶基因（Ａｍｖ）、Ｃｍ￣ｒ基因、Ｋｍ￣ｒ基因的ｐＢＸ９６质粒导入到受体株内，经两次利福平抗性筛选，获得一株能直接利用淀粉为发酵碳源、保留噬菌体抗性、产碱性蛋白酶的工程菌Ｃ１７２－３０６（ｐＢＸ９６）。菌体增殖９６．５代质粒丢失率为０．７７％，摇瓶发酵蛋白酶活力１４０１４ｕ／ｍｌ，５００Ｌ罐发酵蛋白酶活力平均１０１９２ｕ／ｍｌ。

地衣芽胞杆菌产β-甘露聚糖酶摇瓶发酵条件的研究

目的 :确定地衣芽胞杆菌 NK-2 7-51产β-甘露聚糖酶摇瓶发酵的最佳工艺条件。方法 :以正交设计的试验方法 ,选取 L2 7( 31 3 )正交表 ,考查发酵时间、装液量、接种量 ,p H等工艺参数对酶活力的影响。结果 :经方差分析后表明 ,发酵时间 ,装液量 ,对该菌株产酶有显著影响 ,发酵时间和接种量有显著交互作用。结论 :得出了最佳工艺组合 。

科技与经济发展带来血管外科治疗模式的转变

血管外科在近十年发展迅速,其手术治疗已由传统开放手术为主转变成微创腔内治疗术为主的模式。这是科技与经济发展的必然结果,是现代医学新理念的具体体现。因此,要求从事血管外科的医务工作者科学看待手术模式的转变,熟练掌握各种新技术,努力创新,优化设计,降低手术风险及患者痛苦,提高手术安全性及患者术后生活质量。

CRISPR/Cas9系统在寄生原虫基因编辑中的应用

原虫生活史复杂,大部分难以通过体外培养完成整个生活史,缺乏高效的基因编辑系统。CRISPR/Cas9系统可以通过人工设计的方式,实现基因的精确、高效、快速编辑,被广泛应用于基因工程各个领域。CRISPR/Cas9系统为原虫的未知功能基因研究开辟了新途径。本文介绍CRISPR/Cas9系统的原理和目前在寄生原虫中的基因定位、基因功能研究、高通量基因家族筛选等方面的应用。

高效制备液相色谱法纯化生物制品的实验研究

以牛血清白蛋白和牛血清红蛋白混合物的分离和工业级枯草杆菌中性蛋白酶的纯化为实验物系，在不同的操作条件下，对自行研制的高效制备液相色谱装置的性能进行了实验研究。结果表明，在适宜的操作条件下，此装置的分离和纯化效果令人满意。

地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的制备

提出了一种地衣芽孢杆菌β 甘露聚糖酶制备的工艺。结果表明 :在设定的操作条件下 ,6 6L自控罐发酵酶活可达 2 6 0u/mL。发酵液用AlCl3与壳聚糖絮凝预处理后 ,絮凝体喷雾干燥可制成 90 0u/g的酶粉 ,适合饲料和造纸工业使用 ;絮凝上清液先以平均截留分子质量5万的中空纤维聚砜膜分离 ,透过液再用平均截留分子质量 1万的中空纤维聚砜膜浓缩后 ,喷雾干燥可制成 110 0 0u/g的酶粉 ,适合食品和医药工业使用。以上工艺酶活总收率 88% 。

菌群降解菲和氧化三价砷的双功能验证

从上海某含菲和砷复合污染物的焦化厂土壤中富集、分离得到了一个双功能菌群。在含200mg／L菲和60mg／L As2O3的培养基中，该菌群48h内能降解71．4％的菲和氧化96．2％的三价砷。从分子水平进行功能验证，选择菲降解基因（RHDa）和砷氧化基因（aoxB）构建文库，基因RHDa与Pseudomonas aeruginosa和Pseudomonas putida基因的同源性较高；而基因“aoxB与Pseudomonas stutzeri和Alcaligenes faecalis的同源性较高。采用实时荧光定量PCR技术定量2个基因，在48h内，1mL菌液中aoxB基因拷贝数为3．00×10^8～1．48×10^10，而RHDa则为2．54×10^7～8．70×10^9。该菌群将在含多环芳烃和砷复合污染场地中具有潜在的应用价值。

N_2O回收利用及减排技术研究进展

减排N_2O对控制地球温室效应和保护人类健康具有重要的意义。综述了有关分离纯化N_2O的技术及N_2O回收利用于芳烃氧化制苯酚的研究进展,介绍了N_2O的热分解及催化分解等减排技术的研究成果。指出:采用N_2O直接氧化芳烃制苯酚技术需要解决的技术关键是开发高选择性的催化剂;催化分解是目前可行的N_2O减排技术,而制备高活性且抗O_2、水蒸气及硫化物干扰的催化剂是今后的研究热点。

明亮发光杆菌连续培养条件的优化

为克服市售冻干粉批次间活性差异较大、检测前需复苏等缺点,对明亮发光杆菌从摇瓶到发酵罐进行逐级放大培养,探索其在发酵罐上的最适连续培养条件,获得连续稳定的发光细菌检测液。在摇瓶条件下得到的最适培养条件为：温度18℃,初始pH=7.0,转速200r/min,接种量2%。在此条件下,菌体最大比发光度可达2 500mV。在5L发酵罐中的最适培养条件为：转速200r/min,通气量0.5vvm,稀释率0.10h-1。在此条件下,对明亮发光杆菌进行多批连续培养,菌体比发光度可稳定在500~1 000mV,可连续培养10d左右。

分子生物学技术在隐孢子虫研究中的应用

隐孢子虫是顶复门原虫,主要寄生于人或动物的消化道上皮并引起腹泻,是寄生虫学、环境微生物学研究热点之一。分子生物学技术给隐孢子虫研究注入了强大动力,本文就其在隐孢子虫检测、分子流行病学调查、分类学以及药物设计等研究领域的应用作一综述。

铁(Ⅱ)卟啉二胺配合物的合成和表征

已报道合成的二价铁叶琳配合物主要集中在毗陡、咪唑、NO等配体上．有机胺虽然是配位化学中一类极为经典的配体，但合成金属叶琳胺类配合物的报道却为数甚少，据我们所知，仅限于Ru[1]、Rh[3]、Os[3]等配合物．迄今还未见合成铁（Ⅱ）卟啉胺类的报道．本文通过引入强氧化...

金属氧化物负载RuO_2催化分解N_2O的中试实验研究

文章应用共沉淀法制备了不同的金属氧化物,采用程序浸渍法分别制备了RuO_2负载型催化剂,O_2-TPD表征分析结果表明,采用La改性的复合金属氧化物Me_xO_y(Me=La、Mg、Al)为载体,制备的Ru_2O/Me_xO_y有较好的低温O_2脱附性能,同微型固定床活性变化规律吻合。实验室中试实验结果表明,在原料气组成:14(V)%N_2O+75(V)%N_2+11(V)%O_2、体积空速SV=10 000 h^(-1)、入口温度340℃的条件下,RuO_2/Me_xO_y催化剂在300 h连续实验过程中,N_2O的分解转化率≥98%。CO_2-TPD分析表明反应前后催化剂的总碱量及碱性分布基本相同;SEM分析表明,同新鲜催化剂相比,反应后催化剂的表面相对粗糙,但在实验条件下,RuO_2/Me_xO_y催化分解N_2O的活性基本不发生变化。

类水滑石复合金属氧化物的制备及催化分解N_2O的性能研究

采用共沉淀法制备了一系列类水滑石金属氧化物作为催化剂,并采用X射线荧光光谱(XRF)、BET分析、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、X射线衍射(XRD)和扫描电子显微镜(SEM)等手段对其进行了表征分析。结果表明,所制备的催化剂经过530℃焙烧仍基本保持了类水滑石的结构特征。催化剂表面CO_2吸附态大概可以划分为3种,即300℃以下的低温吸附态、300～550℃的中温吸附态及550℃以上的高温吸附态。催化剂催化分解N_2O性能的变化规律基本与其表面碱性变化相符。含La、Mg、Al的类水滑石复合金属氧化物催化剂具有较好的催化分解N_2O的稳定性。

负载型RuO_2/Me_xO_y(Me=La,Mg,Al)催化剂催化分解N_2O

采用共沉淀法制备LaMgAlO(简称Me_xO_y)复合金属氧化物,以Me-xO_y为载体,采用浸渍法制备系列负载型RuO_2/Me_xO_y催化剂,应用BET、TEM、XRF和SEM对代表性样品进行表征。结果表明,实验条件下,RuO_2负载质量分数2.0%时比较合适,在气体混合物中含有氧和少量水蒸汽条件下,催化剂具有较好的催化分解N_2O稳定性。