2021年浙江省禽流感专项监测与分析

为评估高致病性禽流感(HPAI)疫病风险和免疫水平情况,2021年3-5月在浙江省11个地市采集血清、家禽拭子和环境样本4123份,采用血凝抑制试验和荧光RT-PCR方法,检测和分析家禽HPAI强制免疫抗体水平和感染情况。结果显示:H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为91.70%,场点合格率为90.00%;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为90.42%,场点合格率为92.50%;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为91.30%,场点合格率为90.00%;家禽总体免疫抗体合格率均在90%以上。不同地区H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为85.00%~99.17%;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为82.71%~94.38%;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为70.79%~99.17%。不同场点AIV免疫抗体样本合格率为84.49%~97.00%,屠宰场和散养户的AIV免疫抗体样本合格率低于种禽场和规模场。鸡和鸭AIV免疫抗体样本合格率分别在92%和86%以上,鸡的免疫效果要优于鸭。全省未检出H5亚型和H7亚型HPAIV核酸阳性,但监测到其他亚型的低致病性禽流感病毒(LPAIV)的存在。对监测到的AIV阳性样本采用荧光RT-PCR方法进一步分析,103份A型流感样品中发现存在H2(22.33%)、H9(17.48%)、H10(15.53%)、H3(5.83%)和H6(1.94%)5种HA亚型,N3(57.28%)、N8(42.72%)、N2(9.71%)、N6(7.77%)、N9(2.91%)和N1(1.94%)6种NA亚型。103份样品来自12个场点,分别有33.33%和58.33%的场点(屠宰场和市场)检出2种以上HA和NA亚型。家禽流通和屠宰环节中存在不同亚型LPAIV混合感染情况。监测结果表明,HPAI防控措施效果良好,浙江省部分地区免疫效果稍低,但家禽免疫抗体总体水平达到农业农村部要求(70%)以上;浙江省未发现有HPAIV核酸阳性,HPAI疫情发生风险较低,但家禽和环境中存在多亚型LPAIV感染的现象。

14株H9N2亚型禽流感病毒分离株的HA和NA基因序列分析

为了解浙江省H9N2亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的分子特征和遗传变异情况,本试验对2012—2021年分离到的14株H9N2亚型AIV分离株进行HA和NA基因序列测定和分析。结果显示:14株分离株的HA和NA基因均属于Y280分支,HA核苷酸同源性为91.5%~99.4%,NA核苷酸同源性为89.0%~98.7%,其与疫苗株CK/SS/94、CK/F/98、CK/6/96和CK/1/00的HA核苷酸同源性为86.0%~91.1%。14株分离株HA蛋白裂解位点氨基酸组成均为RSSR↓GLF;受体结合位点主要表现为K141N、A142T、T155N、H183N和V190T突变,其中第226位和第228位全部为L和G,可与α-2,6唾液酸受体结合,具有感染人的特性;蛋白潜在糖基化位点均为6个,主要变异表现在第200~202位1个位点缺失和第295~297位1个位点增加;抗原相关位点主要表现为G82E、S137D、D145G、N159G、A160D、T192R和N193D突变,此外,有5株出现D160N突变。14株分离株NA蛋白存在6个潜在糖基化位点,其中1株发生N86H突变,缺失1个潜在糖基化位点;均出现第61~63位颈部氨基酸缺失。结果表明,浙江省H9N2亚型AIV流行毒株不断变异,与疫苗株存在抗原性差异,需加强病毒变异监控和新疫苗研发。

两株H5N1亚型禽流感病毒的基因分析及其在不同宿主中致病性的比较

为了解两株高致病性禽流感病毒(HPAIV)的分子特征及其对不同宿主的致病性,本研究对DK/HuN/4/08和CK/GX/2/09进行全基因组序列的测定,分析结果表明:两个病毒分离株HA基因的裂解位点均具有HPAIV特有的基序(341RRR(R)KR345/346),并且均属于Clade2.3.2分支,基因组同源性在97.4%～98.3%之间。致病性试验显示,两个病毒分离株均能够以106EID50感染量在3 d内引起鸡全部死亡,并且各脏器均检测到高滴度的病毒含量;两者在SPF鸭中呈现不同的致病性,CK/GX/2/09在4 d内可以使感染鸭100%死亡,而DK/HuN/4/08只引起25%的死亡率;同样在小鼠试验中,两者致病力差异与在鸭体中的反应一致,其MLD50分别为1.63 log10EID50和6.2 log10EID50。本研究表明,这两株遗传背景相似的HPAIV在鸡、鸭和小鼠中的致病性不同,为进一步利用反向遗传技术研究这两株病毒对水禽和哺乳动物致病力差异的分子机制奠定了基础。

计算机辅助技术应用于困难气道评估的研究进展

困难气道的早期预测及评估,对于每个麻醉医师都非常重要,而目前国内外对于困难气道的预测方法都不尽完善。近年来发展起来的计算机辅助医学技术,尤其是基于影像学特点进行的模型重建技术,已在多个领域取得巨大进步。将三维模型重建技术运用于困难气道的研究,不但可以更加精确地分析气道各组织解剖特点,还可以进行气管插管的生物力学分析,对困难气道评估方法的完善、新的气管插管设备的研发等都有着极其重要的意义。

远程缺血处理的临床应用进展

缺血再灌注损伤(IRI)是临床上一种常见的病理生理变化,其损伤程度直接关系到疾病的治疗效果。研究发现:给予远距离组织(上肢或下肢)多次短暂、重复缺血再灌注,即远程缺血处理(RIC)可减轻重要器官长时间持续缺血所导致的IRI;在心脏手术、血管手术和冠状动脉介入术中给予RIC能减轻IRI的程度;RIC无创、安全、简单且经济,为治疗缺血性疾病提供了一种新的方法和思路,具有广阔的临床应用前景。

危机管理中的货币操作——效果及不确定性

次贷危机在美国爆发后,迅速席卷全球,演变为全球化的金融危机。以美国为代表的发达国家实施了超宽松的货币政策,避免了金融体系的彻底崩溃。本文通过分析金融危机下美联储货币政策操作的特点,系统地评价此次危机管理的效果,并且对未来的不确定性提出了自己的看法。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鸡和鸭的免疫效果观察

H7N9流感变异毒株的出现给我国家禽养殖业造成了严重的疫情风险。为了解和评估新型重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株)的免疫效果和抗体消长规律,我们开展了鸡、鸭现场免疫试验。监测结果表明,该疫苗对蛋鸡和蛋鸭都具有良好的免疫效果,H5和H7亚型免疫抗体水平在免疫后2周均能达到100%的免疫合格率。对雏鸡也具有较好的免疫效果,免疫一次时H5和H7亚型抗体合格率分别在一免后3周和2周达到70%以上,并维持到一免后13周;进行二次免疫后,H5和H7亚型抗体合格率在二免后1周都达到100%。对雏鸭的免疫效果相对较差,一次免疫的H5亚型抗体水平不能达到70%的免疫合格标准,二免后1周H5和H7亚型抗体合格率均能达到80%以上,必须加强免疫一次才能达到满意的免疫效果。

2021年浙江省H9亚型禽流感监测状况的分析

为了解浙江省家禽H9亚型禽流感病毒(AIV)HI抗体水平和病毒感染情况,本研究于2021年采集了3 698份禽类血清和16 688份拭子样品,针对前者检测其HI抗体效价,统计分析H9亚型AIV抗体合格率(HI≥24为合格);针对后者经荧光定量RT-PCR检测H9亚型AIV,并统计分析AIV的阳性率。AIV抗体合格率统计结果显示:鸡H9亚型AIV抗体总合格率为87.91%(3 251/3 698),场点AIV抗体合格率为86.36%(38/44)。不同地区家禽H9亚型AIV HI抗体水平均较高,依次为浙西(97.82%,224/229)>浙北(97.59%,1 134/1 162)>浙东(89.61%,716/799)>浙中(79.19%,236/298)>浙南(77.77%,941/1 210)。不同场点家禽H9亚型AIV抗体合格率依次为种禽场(95.89%,839/875)>屠宰场(86.87%,1 376/1 584)>规模场(83.21%,1 006/1 209)。AIV阳性率的统计结果显示,H9亚型AIV总阳性率为2.79%(465/16 688),场点阳性率为22.39%(15/67)。不同地区H9亚型AIV阳性率有差异,依次为浙中(5.00%,18/360)>浙南(3.50%,240/6 855)>浙西(2.68%,11/410)>浙北(2.66%,190/7 141)>浙东(0.31%,6/1 922),其中浙中地区AIV阳性率显著高于其他地区(P<0.05)。市场、屠宰场、规模场的禽类和环境样品中H9亚型AIV的阳性率分别为8.03%(118/1 470)、2.90%(334/11 527)和0.70%(13/1 864),种禽场和野鸟栖息地均未检出H9亚型AIV,其中屠宰场H9亚型AIV阳性率显著高于其他来源的样品(P<0.05)。鸡、鸭拭子样品中H9亚型AIV阳性率分别为3.80%(391/10 289)和0.22%(6/2 702),其场点阳性率分别为28.57%(14/49)和15.79%(3/19);而鹅、鸽子和野鸟样品中均未检测到H9亚型AIV。咽拭子和泄殖腔拭子样品H9亚型AIV的阳性率为2.96%(397/13 401),环境拭子样品H9亚型AIV的阳性率为2.34%(68/2 902),采自浙北、浙东两个野鸟栖息地的粪便样品中均未检测到H9亚型AIV。上述结果表明,浙江省家禽H9亚型AI疫苗免疫抗体水平整体较好,但各地区仍存在低水平的H9亚型AIV流行,尤其是市场和屠宰场中H9亚型AIV感染情况严重。本研究系统监测并分析了浙江省H9亚型AI疫苗免疫抗体水平和病毒感染情况,对低致病性H9亚型AI防控决策的制定有重要指导意义。

鸭瘟病毒ZJ2016强毒株部分基因序列的测定与分析

2016年,浙江省一鸭场发生疑似鸭瘟病例,经鉴定,病鸭感染鸭瘟病毒,命名为ZJ2016病毒株。实验应用二代基因测序方法对该病毒核酸进行全基因测序,鉴定分析鸭瘟病毒ZJ2016株抗原与毒力相关基因序列特征。对测序病毒主要囊膜糖蛋白基因gB、gC、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN与致病力基因LORF11、UL2、UL12、UL41、UL47、US10进行核酸与氨基酸序列分析,并与已发表毒株序列及疫苗株(VAC株、clone-03株)序列比较。结果显示,与疫苗免疫保护抗原相关的ZJ2016株囊膜糖蛋白序列与疫苗毒株序列相比未发生明显的变异,而ZJ2016株的LORF11、UL2、UL12、UL41、UL47、US10基因结构及同源性与疫苗株氨基酸序列差异明显,且与中国其他分离强毒株LH2011株、CHv株、CV株同源性较高,表明该毒株具有强毒株的基因型特征。

两种H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的敏感性和特异性评价

为评价两种(A、B)H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能,对50份疑似感染H7N9流感病毒的禽拭子样品进行H7N9流感病毒核酸检测,使用TG-ROC分析方法筛选荧光RT-PCR最适Ct值(阈值),通过2×2列联表分析两种试剂盒的敏感性和特异性,并用Kappa检验评估其一致性。结果显示:以国家禽流感参考实验室的鸡胚病毒分离鉴定结果为“金标准”,A和B两种试剂盒的敏感性、特异性分别为90.9%(10/11)、56.4%(22/39)和54.5%(6/11)、94.9%(37/39);两种试剂盒检测结果差异较大,Kappa值为0.28。TG-ROC分析得出:A试剂盒的检测阳性最适阈值为33,对应的敏感性和特异性为90.91%和92.31%;B试剂盒的检测阳性最佳阈值为37,对应的敏感性和特异性分别为81.82%和87.18%。通过调整阈值,A试剂盒的敏感性和特异性均达到90%以上,B试剂盒均达到81%以上,Kappa值为0.85,检测结果一致。结果表明,虽然不同H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能有差别,但通过调整阈值,可以达到检测所需的最适敏感性和特异性,从而增加临床检测结果的可靠性。本研究为H7N9流感病毒检测试剂盒的应用提供了指导。

3种核酸提取试剂盒对猪不同样品RNA病毒核酸提取效果的比较研究

为了筛选出高效、低成本、用时短的RNA核酸提取试剂盒,为各级实验室开展动物疫病监测提供参考,试验选择3种常用磁珠法核酸提取试剂盒(病毒DNA/RNA提取试剂盒A、病毒RNA提取试剂盒B及病毒总核酸提取试剂盒C)对临床粪便样品提取猪流行性腹泻病毒RNA、临床组织病料样品提取猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA,通过实时荧光定量反转录(RT)-PCR方法进行检测,以Ct值评价分析提取效率及重复性,同时对不同试剂盒提取时间及价格进行综合比较分析。结果表明:对于粪便样品,B、C试剂盒的RNA提取效率要高于A;3种试剂盒对PRRSV浓度较高的组织样品均具有较好的提取效果,A、B试剂盒的RNA提取效率高于C试剂盒,但B、C试剂盒的重复性优于A试剂盒。其中A试剂盒对于组织样品中高浓度病毒样品提取效率较高,时间最短;B试剂盒对于粪便样品中低浓度RNA病毒提取效率最高,但价格最贵,且时间最长;C试剂盒对粪便中低浓度样品RNA提取效率高于A试剂盒,价格最低。综合提取效率、时间及成本等因素分析认为,试剂盒C性价比较高,可用于大批量临床样品检测。说明不同试剂盒对不同种类样品提取后,提取效率存在差异,实验室可根据实际情况进行选择。

2017年浙江省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

兽医系统实验室是指隶属于各级兽医主管部门,承担动物疫病检测、诊断和监测等工作的兽医实验室,作为动物疫病预防控制机构的组成部分,对动物疫病防控发挥着重要支撑工作（[1]）。其中动物疫病检测是兽医系统实验室职责范围内的一项重要工作,而实验室检测能力和水平则是实验室的核心,是动物疫病防控提供技术支撑的固基之本、源之所在（[2]）。

“创皂生活”——STEAM理念下的课程开发与教学设计

文章基于STEAM理念,以"手工皂的制作与应用"为主题创设真实情境,围绕"皂化反应"这一科学概念,设计了"创皂生活"特色STEAM课程,对STEAM理念应用于实际课堂教学的策略进行了探索,对教学设计与实施过程中课堂的主体性、课程的组织与管理、教学评价的适切性进行了反思。

剪切波超声弹性成像评估糖尿病周围神经病变

目的探讨剪切波弹性成像对2型糖尿病胫神经形态学及硬度改变的评估价值。方法利用高频超声与剪切波弹性成像技术检测2016年1月1日~2016年12月31日昆明医科大学第一附属医院收治的74例2型糖尿病[伴周围神经病变(n=39)、不伴周围神经病变(n=35)]及同期健康体检者(n=32)的双侧胫神经行高频超声探查及剪切波弹性成像,测量胫神经横截面积、杨氏模量最大值和平均值,再分别绘制ROC曲线,对比神经横截面积、杨氏模量最大值和平均值的诊断价值并计算最佳诊断界值。结果横截面积、杨氏模量最大值和平均值的曲线下面积分别为0.727、0.878、0.872,最佳诊断界值分别为0.19cm2、60.6KPa、54.5Kpa。结论剪切波弹性成像技术能量化神经硬度改变,从而评估糖尿病周围神经病变,对糖尿病周围神经病变具有良好的诊断价值。

德国教材“物质的量”内容编写中的教与学思想探析

一、问题的提出＂物质的量＂部分内容在中学化学中占有非常重要的地位。＂物质的量＂既是联系宏观世界和微观世界的桥梁,也是化学计量的基础。由于摩尔、物质的量、微粒数、阿伏加德罗常数等多个抽象概念同时出现,且彼此间联系紧密,造成了学生的认知困难。

非洲马瘟检测诊断及防控建议

非洲马瘟是由属于呼长孤病毒科环状病毒属的非洲马瘟病毒引起,以发热、皮下水肿和病毒血症为主要临床特征,主要通过库蠓在马属动物之间传播,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。该文概括比较非洲马瘟的临床诊断、实验室病原学、血清学等检测诊断方法,在实际应用中根据不同检测方法的优点和局限性,综合考虑做出针对性选择。

猪繁殖与呼吸综合征病毒检测方法的研究

目的:为解决猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型RT-PCR检测过程中琼脂糖凝胶电泳需要制胶、转移PCR产物、上样、拍照等繁琐过程,本研究拟应用QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统来代替普通琼脂糖凝胶电泳。方法:选取40份经猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型实时荧光RT-PCR检测为阳性或疑似阳性的核酸样品,进行RT-PCR扩增,产物分别用两种电泳方法观察结果。结果:40份核酸样品的RT-PCR产物,凝胶电泳显示有27份阳性样品,阳性率为67.5%(27/40),QIAxcel毛细管凝胶电泳显示31份阳性样品,阳性率77.5%(31/40)。结论:QIAxcel凝胶电泳可以替代常规琼脂糖凝胶电泳,进行多样本实验,并且具有更高的灵敏度,其具有的方便性和快捷性适合多样本的快速分析。

四国高中化学教材“化学键”内容比较

基于闫春更等建立的教材难度二维度四指标评价模型,对中、美、英、澳四国高中化学教材中“化学键”内容的整合广度、表征深度进行了测评,发现四国教材整合广度数值差异不大,美国教材表征深度明显较高;中国教材注重概念知识体系的清晰表达;英国教材将概念介绍与具体例子相结合;澳大利亚教材的内容与生活实际联系较多。美国教材在内容组织中巧妙设置了“电负性与ΔEN”这一“支架”,在内容呈现中注重情境推理与解释等高级信息处理方式的运用,凸显了化学键知识的认识工具价值。

急性Q热引起心肌炎并心脏骤停1例

Q热是一种由贝纳特柯克斯体引起的人畜共患性疾病,可累及颅脑、肺脏、肝脏、心脏瓣膜、血管、骨关节等部位。由于Q热的临床表现多种多样、流行病学史资料无特异性、医务工作者对其诊断和治疗方面存在认识不足以及实验室检查方法未被广泛应用等原因,导致误诊和延误诊断时有发生[1]。

基于品牌个性视角的企业服务设计研究

无论是在学术领域还是在企业领域,服务品牌化越来越成为关注的焦点。不可否认,在研究的进程和企业实施的过程中都遇见了各种各样的问题。企业如果能够从品牌个性化的视角进行服务设计,并能创造独特的顾客体验,就有助于吸引更多的顾客,并能增强服务企业的品牌资产。