RNA干扰Fbxw8基因对人结肠癌细胞增殖能力的影响

目的探讨靶向抑制Fbxw8基因对结肠癌SW480细胞增殖的影响。方法 RNA干扰(RNAi)方法下调SW480细胞中Fbxw8的表达。通过Real-time PCR、western blotting方法分别检测Fbxw8 mRNA和蛋白表达变化;CCK-8、细胞克隆形成实验及BrdU掺入法检测下调Fbxw8对SW480细胞的增殖、DNA合成能力的影响。Western blotting检测下调Fbxw8对SW480细胞增殖相关基因表达的影响。结果 Fbxw8 siRNAs显著降低SW480细胞Fbxw8mRNA和蛋白的表达,CCK-8结果显示:与对照组(0.78±0.11)相比,两对Fbxw8 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.46±0.07、0.49±0.03,P<0.05);细胞克隆形成实验显示与对照组相比,Fbxw8 siRNAs组细胞的克隆形成数目及大小显著降低。BrdU掺入实验显示与对照组(0.83±0.12)相比,Fbxw8 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.47±0.06、0.56±0.09,P<0.05);同时伴随着细胞周期蛋白cyclin E的下调而p27的表达升高。结论 Fbxw8 siR NA可以通过下调cyclin E、上调p27的表达而有效抑制SW480细胞增殖,为结肠癌的基因治疗提供新的候选靶点。

超声气压弹道碎石治疗肝内胆管结石19例分析

目的探讨胆道镜联合EMS超声气压弹道碎石术治疗肝内胆管结石的疗效及安全性。方法采用胆道镜联合EMS超声气压弹道碎石治疗肝内胆管结石19例。结果 19例均一次碎石成功,无结石残留,无胆道出血、胆漏等并发症,黄疸消退,肝功恢复。结论超声气压弹道碎石治疗肝内胆管结石具有安全、高效、并发症少、损伤小等优点。

改良右锁骨下静脉穿刺置管术的体会

目的探索改良右锁骨下静脉穿刺置管术的应用效果。方法以右锁骨下凸为骨性标志,其下方2.0cm为穿刺点,指向距胸锁关节1.0cm的锁骨上缘。结果共应用改良右锁骨下静脉穿刺置管125例,一次置管成功为110例,二次穿刺置管成功为12例,3例改用其他穿刺方法置管成功。结论应用此方法能有效提高右锁骨下静脉穿刺置管的成功率,可操作性强,并发症少。可广泛应用于临床。

胆总管十二指肠吻合术在毕Ⅱ式胃切除术后的胆总管梗阻中的应用

目的探讨毕Ⅱ式胃切除术后行胆总管十二指肠吻合术的应用。方法回顾笔者所在医院2005～2011年毕Ⅱ式胃切除术后并发胆道梗阻的29例患者行胆总管十二指肠吻合术的治疗过程。结果胆管结石和胆道狭窄患者治疗效果满意,短期内未出现胆道逆行性感染和盲端综合征,恶性肿瘤患者引流效果较好,提高了生活质量。结论胆总管十二指肠吻合术在毕Ⅱ式胃切除术后胆管结石和胆管占位中具有很高的应用价值。

应用泛影葡胺治疗粘连性肠梗阻的研究

目的探讨泛影葡胺在粘连性肠梗阻中的诊断和治疗作用。方法应用76%泛影葡胺40～100ml,通过口服或鼻饲,治疗粘连性肠梗阻患者57例。通过动态观察腹部体征和X线摄影,观察造影剂到达的部位和通过情况。结果 54例肠梗阻患者得到治愈,3例患者症状加重,及时进行手术干预。结论应用泛影葡胺造影可以起到诊断肠梗阻的作用,明确梗阻的部位、原因、性质,同时起到治疗作用。

早期乳腺癌保乳治疗与改良根治术的临床疗效比较

目的：比较早期乳腺癌保乳治疗与改良根治术的临床疗效。方法：选择2008年1月~2010年10月在我院住院治疗的56例乳腺癌患者,根据手术方法不同随机分为治疗组和对照组,各28例,对照组用改良根治术治疗,治疗组单用保乳手术治疗,比较两组的手术疗效。结果：与改良根治术比较,保乳手术具有手术时间短、术中出血少、住院时间短、术后并发症发生率低,且两组美容效果比较,治疗组的优良率明显高于对照,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组术后随访的复发率及1、3年的总生存率及无病生存率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：保乳手术治疗乳腺癌与改良根治术比较,具有手术时间短、术中出血少、住院时间短、术后并发症发生率低,且美容效果好的优点,值得推广和应用,临床医生应根据乳腺癌患者的具体情况选择适宜的手术方式。

靶向ADAM17基因siRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响

目的:探讨靶向抑制ADAM17基因对雄激素非信赖性前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法:应用ADAM17 siRNA转染PC-3细胞后,通过RT-PCR、Western印迹方法分别检测ADAM17 mRNA和蛋白表达变化;MTT、BrdU掺入法检测下调ADAM17对PC-3细胞的增殖和DNA合成能力的影响;流式细胞术检测ADAM17 siR-NA对PC-3细胞细胞周期的影响;Western印迹检测下调ADAM17对PC-3细胞增殖相关基因表达的影响。结果:两对ADAM17 siRNAs均可有效地降低PC-3细胞ADAM17 mRNA和蛋白的表达;MTT结果显示与对照组(0.80±0.51)相比,两对ADAM17 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.43±0.57、0.44±0.64,P均<0.05);Br-dU掺入实验显示与对照组(0.79±0.72)相比,ADAM17 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.48±0.43、0.54±0.59,P<0.05);流式细胞术结果显示,与对照组(41.38±1.53)%相比,ADAM17 siRNAs可显著增加G1期细胞数量[(61.83±2.41)%、(59.78±1.92)%,P均<0.05]、降低S期细胞数量[从(33.51±1.47)%减少到(23.64±2.56)%、(25.24±1.86)%,P均<0.05],同时伴随着cyclin D1蛋白的表达下降而p21蛋白的表达升高。结论:ADAM17 siRNA可以通过下调cyclin D1、上调p21的表达而抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,ADAM17可能成为前列腺癌基因治疗的靶点。

三孔法腹腔镜胆囊切除术与传统开腹胆囊切除术的临床疗效比较

目的:观察三孔法腹腔镜胆囊切除术的手术疗效及安全性,并与传统开腹胆囊切除术的临床疗效作比较,旨在为临床治疗胆囊疾病提供进一步的指导依据。方法:选择我院外科2008年1月～2010年1月住院的接受胆囊切除术的76例患者,根据手术方法的不同随机分为A组(三孔法腹腔镜胆囊切除术)和B组(传统开腹胆囊切除术)各38例,观察比较两组平均切口长度、平均手术时间、术中平均出血量、平均住院时间及术后并发症(切口感染、切口出血、胆漏、放射痛、胆管损伤)情况。结果:76例患者中行三孔法腹腔镜胆囊切除术组38例术后2～6d出院,无死亡病例。其中A组平均切口长度、平均手术时间、术中平均出血量、平均住院时间均明显短于B组(P<0.05);A组发生并发症如切口感染、切口出血、胆漏、放射痛的发生率明显低于B组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三孔法腹腔镜胆囊切除术治疗胆囊外科疾病手术用时少,术中出血量少,发生切口出血、感染、胆漏等并发症少于传统手术组,且对患者创伤小,患者痛苦少,适合基层医院广泛推广和应用。

新辅助化疗后保留乳房手术治疗进展期乳腺癌可行性分析

目的对新辅助化疗后保留乳房手术治疗进展期乳腺癌行可行性分析。方法收集2010年6月—2011年6月间进展期乳腺癌患者60例，根据患者意愿分为新辅助化疗后保乳手术组和改良根治术组，每组30例，分别给予新辅助化疗后保乳手术及改良根治手术，随访3年。比较两组的治疗效果，并分析两组乳腺癌循环肿瘤细胞（CTCs）阳性情况，记录两组患者随访后期局部复发率、远处转移率、总生存率和无瘤生存率。结果新辅助化疗后保乳手术组与改良根治术组相比，两组CTCs检出率没有统计学差异（P〉0．05），两组患者在临床完全缓解率、部分缓解率、疾病稳定率以及局部复发率、远处转移率、总生存率和无瘤生存率方面均无统计学差异（P〉0．05）。结论对进展期乳腺癌患者应用新辅助化疗合并保乳手术治疗，能达到与改良根治术类似的治疗效果，可作为治疗进展期乳腺癌的一种选择。

绝经前后三阴性乳腺癌患者差异蛋白分析

目的应用iTRAQ技术分析绝经前后三阴性乳腺癌组织差异蛋白的表达情况,旨在探讨绝经对三阴性乳腺癌发生的影响。方法选择绝经前及绝经后各8例经病理确诊的三阴性乳腺癌患者,应用i TRAQ技术分析差异蛋白显著性功能、差异蛋白pathway并进行差异蛋白验证。结果 (1)绝经前差异蛋白相互作用组较集中,而绝经后的差异蛋白较多,且分布较散。(2)绝经前癌组织的差异蛋白存在于5种差异显著途径中;绝经后癌组织的差异蛋白存在于15种差异显著途径中。(3)与癌旁组织相比,绝经前共有214种显著差异蛋白,绝经后共有360种显著差异蛋白。绝经前的三阴性乳腺癌组织中上调蛋白81种,下调蛋白133种,绝经后上调蛋白157种类,下调203种。结论利用i TRAQ技术发现,绝经前后三阴性乳腺癌患者差异蛋白表达具有一定的特殊性,说明不同雌激素环境下三阴性乳腺癌可能存在不同发病机制,可能成为治疗TNBC的新靶点。

结肠镜检查并发腹腔积气为主要症状的肠穿孔5例分析

结肠镜检查是诊断结直肠疾病有效和直接的方法之一，已经普及至基层医院，但由于其是侵入性操作，极少数会并发结肠穿孔。为了探讨其诊断及治疗方法，笔者回顾性分析了近年来收治的腹腔积气为主要症状的结肠穿孔5例患者的临床资料，现报告如下。

急性胰腺炎并发皮肤毛霉菌病1例

患者，男，37岁。因急性胰腺炎于2009年7月4日住黑龙江省医院南岗分院普外科，于7月7日行腹腔冲洗引流术，术后给予对症治疗。一个月后背部出现皮肤溃疡，面积约10．0cm×10．0cm，深度约3．0cm，颜色鲜红，覆有少许脓苔，经检测证实为毛霉菌感染。

内镜下经鼻胆管引流术治疗T管拔除后胆漏

胆总管探查、T管引流术是胆道疾病常用的术式，在拔除T管过程中，发生胆漏的现象虽然少见，但一旦发生，往往造成胆汁性腹膜炎，甚至死亡。为了探讨其治疗方法，我们回顾性分析了15例内镜下经鼻胆管引流术（endoscopicna80．biliarydrainage，ENBD）治疗T管拔除后胆漏患者的临床资料，现报告如下。

成人及胚胎胰岛细胞联合移植治疗1型糖尿病一例报告

我们采用胚胎和成人胰岛细胞联合移植，成功治疗1例1型糖尿病患者，现报告如下。 资料和方法 1．临床资料：女，16岁，黑龙江省庆安县人。身高1-60m，体重52kg，血型O型，胰岛素抗体阳性。

微重力培养的新鲜和冻存胰岛联合移植治疗1型糖尿病

目的经微重力培养的新鲜和冻存胰岛联合移植提高1型糖尿病的治疗效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为(1)体外实验组:实验组1.1:冻存的胰岛经微重力培养;实验组2.1:冻存的胰岛在普通培养基中培养;对照组1:新鲜大鼠胰岛经微重力培养。观察胰岛收获率和体外胰岛素分泌情况。(2)胰岛移植组:即将新鲜和冻存的胰岛经微重力或普通培养7 d后分别移植入受体鼠体内,观察移植效果。结果经微重力培养的各组胰岛收获率、DNA含量和胰岛素含量高于普通组。普通培养组在培养后期胰岛素分泌明显下降,并且胰岛素刺激指数明显低于经微重力培养组(P<0.05)。移植经过微重力培养的500 IEQ新鲜胰岛和1 500 IEQ冻存胰岛在移植后1周内可达100%纠正糖尿病,全部受体维持正常血糖耐受曲线一直到观察结束。结论采用细胞内低温保存液(HTS)结合细胞冻存液(DMSO)对大鼠胰岛进行冻存前后经微重力培养可以明显提高胰岛冻存质量,是目前胰岛冻存的最佳选择。使经微重力培养的新鲜和冻存胰岛联合移植一次治愈糖尿病成为可能,并有效的节约了胰岛资源,提高了移植效果。

探讨胰液胆管逆流导致胆囊黏膜病理变化的实验及临床研究

目的探讨持续性胰液胆管逆流（pancreaticobiliary reflux，PBR）初期及潜在性PBR胆囊黏膜的病理变化。方法将仓鼠分为4组：PBR造模组（手术造模），空白对照组，造模＋N-亚硝基双胺（BOP）组（诱导胆囊癌）和单纯BOP组；另选择87例正常胰胆管汇合行胆囊切除或经皮经肝胆囊镜治疗的胆囊结石患者，根据胆汁淀粉酶（BA）值升高和正常分为PBR组和对照组。对比胆囊黏膜的病理变化。结果动物实验中PBR造模组胆囊上皮增生6／6，幽门腺化生3／6、肠上皮化生4／6以及细胞低级别瘤变2／6，其中上皮增生与空白对照组（0／5）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。造模＋BOP组胆囊癌（3／6）和高级别瘤变（1／6）与BOP组（0／5）比较明显增高。临床研究中胆囊结石患者PBR组中70．6％（24／34）BA呈高值（〉1000U／L），PBR组胆囊上皮低级别瘤变者（73．5％，25／34）明显多于对照组（24．5％，13／53，P〈0．05）。结论持续性PBR初期阶段即可引起胆囊黏膜增生，有上皮化生发生频度高的倾向。PBR造模仓鼠用BOP可高频度诱发胆囊癌或高级别瘤变。潜在性PBR患者可导致细胞低级别瘤变，可能是引起胆囊恶变倾向的因素。

老年人的胰腺功能特征

胰腺是一个储备功能很大的脏器，伴随年龄的增加，形态和功能都会发生变化。在临床工作中了解这种变化，掌握高龄人群的胰腺生理特征，正确把握老年人胰腺疾病的特点可以为老年人胰腺疾病的诊疗提供充分的理论依据。

黄色肉芽肿性胆囊炎17例诊治体会

目的探讨黄色肉芽肿性胆囊炎的临床诊断治疗经验和体会。方法回顾性分析本院2001年1月—2010年12月17例黄色内芽肿性胆囊炎的临床病理资料。结果术前诊断胆囊炎、胆石症10例,胆囊癌5例,胆囊息肉2例,其中伴发热5例、黄疸2例,术前均未明确诊断。影像学检查及手术可见胆囊壁增厚伴广泛粘连。行胆囊切除手术7例,同时胆总管探查T管引流术5例、肝脏楔形切除4例、胆囊癌根治术1例。所有病例均术后病理确认,胆囊可见典型的泡沫细胞肉芽肿样改变,术后随访6个月~5年,均无远期并发症。结论黄色肉芽肿性胆囊炎无典型临床表现,术前确诊困难。胆囊壁壁内结节伴增厚的影像学特征有诊断有意义。确诊依据病理学检查,提高术前诊断率及术中快速冰冻切片检查有助于手术方式的选择。黄色肉芽肿性胆囊炎为良性疾病,胆囊切除术预后良好。

胆总管十二指肠残端吻合术治疗BillrothⅡ术后胆总管结石的体会

目的探讨胆总管十二指肠残端吻合术治疗毕Ⅱ胃切除术后胆总管结石的疗效价值。方法回顾性分析17例胆总管十二指肠残端吻合术治疗毕Ⅱ胃切除术后胆总管结石的临床资料及随访结果。结果本组病例手术效果良好,无手术并发症。结论应用胆总管十二指肠残端吻合术治疗毕Ⅱ胃切除术后胆总管结石疗效满意。

犬胰岛的分离与纯化

目的探讨影响胰岛分离与纯化结果的相关因素，寻找获得足够数量、高纯度、具有活性的胰岛细胞的方法，为临床胰岛移植应用提供实验基础。方法寻找自动分离技术连续分离22只犬的胰岛，连续性密度梯度离心法纯化胰岛，观察分离纯化出来的胰岛细胞大体形态、超微结构，用葡萄糖刺激释放实验检验其活性。结果纯化前胰岛计数平均为（155040±310）IEQ／胰腺，纯化后的胰岛平均计数为（74200±185）IEQ／胰腺，纯度约为（89．4±2．6）％，回收率约为（47．8±1．3）％，活率达到（93．0±1．7）％。胰岛分离纯化的结果无论在数量上还是在质量上都随着分离技术的不断更新，操作技术的娴熟而有很大提高。葡萄糖刺激释放实验显示低糖组与高糖组比较P〈0．001，提示分离纯化后获得的胰岛功能状态良好。结论从犬中分离和纯化出足够数量的胰岛细胞，可用于临床研究。