家蚕碱性核酸酶BmdsRNase的原核表达和对dsRNA的降解效果

dsRNase是一种DNA/RNA非特异性碱性核酸酶,这类酶具有广泛的底物特异性,可影响鳞翅目昆虫的RNA干扰效率。为验证从家蚕消化液分离的BmdsRNase能否在家蚕体外表达并降解dsRNA,根据其功能域构建了3个不同基因片段的表达载体,转化大肠埃希菌进行原核表达,体外诱导培养后进行dsRNA的降解试验。SDS-PAGE显示BmdsRNase的3个基因片段均能在原核系统中表达,最适宜的蛋白质诱导时间为2 h,表达产物主要以包涵体形式存在。实时定量PCR结果表明,3种重组表达菌的表达产物均可降解dsRNA。上述结果为后续研究BmdsRNase的功能,以及鳞翅目昆虫的RNA干扰机制提供了实验数据。